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- 碧云天（beyotime）
- 国产
- L00261
- 2025年07月05日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
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零下20℃
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至少一年有效
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现货
- 供应商：
上海经科化学科技有限公司
- 规格：
5µg
pLenti-GEM-sgRNA (GEM基因敲除质粒)是一种在动物细胞中可以同时表达Cas9、目的基因的sgRNA和puromycin抗性基因的质粒。用于在动物细胞中直接基于CRISPR/Cas9技术敲除目的基因，或者通过包装慢病毒后基于CRISPR/Cas9技术敲除目的基因。本质粒中sgRNA的有效性已经通过T7EI法的验证。
本质粒在细菌中为Amp抗性，全长约13,000bp。本质粒的关键图谱信息请参考图1。本质粒可直接转染细胞用于目的基因的CRISPR/Cas9敲除，以及通过puromycin筛选稳定细胞株；也可以与pMDLg、Rev及VSV-g共转HEK293T细胞进行重组慢病毒(lentivirus)的包装，然后再用于感染细胞或组织并进行目的基因的CRISPR/Cas9敲除。
图1. 表达sgRNA、Cas9和puromycin抗性的pLenti-sgRNA质粒关键图谱信息。
本质粒中的sgRNA基于碧云天研发的CRISPR/Cas9 sgRNA快速筛选和验证体系获得，sgRNA的有效性已经通过T7EI法验证。
本质粒用于实验时，建议同时选购无任何靶向的对照质粒pLenti-Control-sgRNA (L00011)或靶向GFP的对照质粒pLenti-GFP-sgRNA (L00013)。
碧云天同时提供基于CRISPR/Cas9技术的GEM基因敲除的质粒(L00261 pLenti-GEM-sgRNA)、慢病毒(L00262 GEM Knockout Lentivirus)、HEK293T细胞(L00263 GEM Knockout HEK293T Cells)、HEK293T敲除细胞的RIPA裂解液(L00264 GEM Knockout HEK293T RIPA Lysate)、HEK293T敲除细胞的Trizol裂解液(L00265 GEM Knockout HEK293T Trizol Lysate)等产品，具体请在碧云天网站查询或在本产品网页点击相应产品。
GEM基因的基本信息如下：
| Species | Gene Symbol | Gene ID | GenBank Accession | Transcript |
| Human | GEM | 2669 | BC022010 | NM_181702 |
| About the gene | |
| Official Symbol | GEM |
| Previous Symbol | - |
| Official Full Name | GTP binding protein overexpressed in skeletal muscle |
| Synonyms | KIR |
| Location | 8q22.1 |
| Gene Type | protein-coding gene |
| Uniprot ID | P55040 |
| Pathway/Library | cAMP & Ca Signaling Pathway Related Genes Library |
| Gene Summary | The protein encoded by this gene belongs to the RAD/GEM family of GTP-binding proteins. It is associated with the inner face of the plasma membrane and could play a role as a regulatory protein in receptor-mediated signal transduction. Alternative splicing occurs at this locus and two transcript variants encoding the same protein have been identified. |
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文献和实验/Cas9 表达质粒混合物一起导入成熟小鼠的胰腺，构建同时修饰此 13 个基因的小鼠模型。结果显示，此 PDAC 小鼠有超过 60% 的这些靶基因显示基因敲除，提示 CRISPR/Cas9 介导的突变诱发了肿瘤的形成。同样，利用 Dox 诱导 Cas9 表达的 GEM 模型也被用于验证已知多种肠道肿瘤基因（如 Apc 和 Trp53）。除了修饰 TSGs, CRISPR/Cas9 技术还应用于验证染色体重排的致癌性，如在肺癌病人观察到的 Eml4-Alk 基因的融合现象。 另外，应用 GEM 模型
CRISPR/Cas9 基因敲除实验-- sgRNA 及引物设计
前期记录先确定目标基因CRISPR/Cas9 基因敲除实验 -- 确定目标基因然后对目的基因进行背景调查CRISPR/Cas9 基因敲除实验-- 目标基因背景调查设计 sgRNA 及引物CRISPR-Cas9 基因敲除 sgRNA 设计CRISPR-Cas9 基因敲除 sgRNA 设计好之后对前期文章的补充：设计 sgRNA 之后，需要对结果进行判断：但为什么 0.7044 分数的哪一个没有选，我也不知道为什么，总感觉他们的顺序不是随意的排的。或许有人能解答一下为什么。顺手把设计工具的解说放上
最近 CRISPR/Cas9 基因敲除技术可谓风靡全世界的实验室，CRISPR 被称为规律成簇间隔短回文重复，其实际上就是一种基因编辑器，是细菌用以保护自身对抗病毒的一个系统。后来，研究人员发现，它似乎是一种精确的万能基因武器，可以用来删除、添加、激活或抑制其他生物体的目标基因。由于其相对于前几代基因敲除技术而言更为简便高效。所以一经问世便受到科研界的热捧。利用 Cas9 质粒建立 knock-out 细胞系实验过程主要有以下几步：1. 确定待敲除基因的靶位点；2. 设计识别靶位点识别的一对
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