庆大霉素硫酸盐，SigmaG3632-1g

盘点 PCR 的七大应用领域

DNA 样品，将未甲基化的胞嘧啶（C）转化为尿嘧啶（U）。重亚硫酸盐处理不会影响甲基化的胞嘧啶（m5C） 。为了检测甲基化位点，一对引物经设计带有鸟嘌呤（G），可与目标序列中的 m5C 配对；为了检测未甲基化位点，另一对引物带有腺嘌呤（A），可与重亚硫酸盐转化分子中的U配对（随后，与后续 PCR 循环中的胸腺嘧啶（T）配对）。通过引物配对得到的阳性 PCR 扩增结果可用于确定位点的甲基化状态（图 7）。 图 7.甲基化特异性 PCR 第一步，使用重亚硫酸盐处理 DNA 样品，将未甲基化的胞嘧啶转化

烟碱nicotine

　　烟碱 nicotine C10 H14 N2 ，是烟草的主要生物碱。碱本身为油状液体、可溶于水和有机溶剂，但实验上，是用其酒石酸盐的结晶。尚未应用于临床。在光和空气作用下会发生褐变。具有光学异构体。天然物为 L型，沸点 247℃（部分分解），比重 d20 4 =1.0097。有特臭，甚苦。在烟叶里。以与柠檬酸、苹果酸结合形态而存在的占 2— 8％。毒性强，每公斤体重给 0.001— 0.004g就会出现中毒症状，对于交感神经和副交感神经的神经节，开始产生

DNA甲基化研究方法的回顾与评价(图)

。 2.2.11 甲基化敏感性斑点分析（methylation sensitive dot blotassay，MS-DBA） G Clément等2005年[43]报道了一种新的方法，能够定量或半定量分析样本中的甲基化水平。这个方法的过程是：先用重亚硫酸盐处理待测DNA 片段，随后以非CG区的引物行PCR扩增，将扩增产物变性后转移到尼龙膜上，用3'端DIG标记的含有2个CG（或TG）的双核苷酸探针与DNA 杂交，随后用带有荧光标记的抗DIG抗体与之反应。与双CG的探针获得杂交的标本含有甲基