- ￥764
- Sigma
- 美国
- I7267-100ML
- 2025年07月07日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
-20°-20°C
- 保质期：
1-3年
- 库存：
999
- 供应商：
亦高生物
- 规格：
I7267-100ML
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文献和实验家兔椎间盘(intervertebral disc )细胞的体外培养方法
Material and method：Material :1、培养皿、培养瓶、烧瓶、试管等。2、分离组织需要的眼科剪子、眼科镊子。3、5%CO2孵箱、PH计、95%氧气源。4、36电动恒温水浴。5、培养液、各种缓冲液及添加剂DMEM高糖培养基、Hank’s缓冲液 、20%胎牛血清，转换生长因子（TGF-β1）(5ng/mL)、胰岛素-转铁蛋白-硒（10ug/mL胰岛素，5ug/mL转铁蛋白，和0.5ng/mL亚硒酸盐）青霉素100U/Ml，链霉素100U/ml 。6、消化液 胶原
动物和昆虫细胞表达系统，尤其是分泌蛋白的纯化中，His-tag系统则有局限。因为酵母和昆虫细胞的培养基pH通常为酸性，会干扰His-标签蛋白与IMAC纯化树脂的结合。而酵母和哺乳动物细胞培养基，则通常含有氨基酸会竞争His-标签的结合位点，如组氨酸，谷氨酰胺或精氨酸。 Strep-tag®系统对各宿主表达系统的适用情况较为理想。根据其纯化原理，酸性pH和有力的氨基酸不会影响Strep-标签蛋白与纯化树脂的结合（前文也曾提到，此系统的耐受pH范围为4-10）。而哺乳动物细胞培养基中存在的生物素需要注意
十分重要，因其不仅影响蛋白的表达，而且也影响随后的纯化过程。除耐受缓冲液条件有限外，当选择宿主表达系统时，His-tag 也有一些局限。 His-tag 大肠杆菌表达系统中较为有利，但实际情况下对于酵母，哺乳动物和昆虫细胞表达系统，尤其是分泌蛋白的纯化中，His-tag 系统则有局限。因为酵母和昆虫细胞的培养基 pH 通常为酸性，会干扰 His-标签蛋白与 IMAC 纯化树脂的结合。而酵母和哺乳动物细胞培养基，则通常含有氨基酸会竞争 His-标签的结合位点，如组氨酸，谷氨酰胺或精氨酸。 Strep
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