β-甘油磷酸盐 二钠盐 水合物，SigmaG9422-10G

三磷酸胶瞽酶钙―钴法

铵1分钟；     (8)流水洗；     (9)干燥后梯度乙醇脱水，二甲苯透明；     (10)甘油明胶封固。       3．结果  酶活性处显示黑棕色。       4．对照实验   ①用β―甘油磷酸钠代替ATP钠盐应为阴性；②孵育液中加入ι―四咪唑抑制碱性磷酸酶排除假阳性；③去底物。       5．注意事项  此法要求Ca：―浓度在孵育前后不能降低，否则产生的磷酸根离子不能被完全捕获而影响准确定位。如染色效果不好可在孵育前将切片放入1％CaCl2 溶液中，37℃作用5分钟。

DNA探针标记常用试剂的配制

ml，加浓HCl 75ml ，边加边缓慢搅动，至pH7.4，于加水至1000ml。　　（18）1mol/L DTT(二硫苏糖醇)：3.0g DTT溶于20ml水中，分装，于-20℃贮存。　　（19）0.5mol/L EDTA（乙二胺四乙酸二钠盐）：在烧杯中先加入300ml水，加入93.5g EDTA－Na2·2H2O，充分混匀，加10mol/l NaOH调pH至8.0，加水至500ml。　　（20）10mol/L NaOH：200g NaOH溶于450ml水中，混匀，再加水至500ml。　　（21

使用Hoecsht 33258荧光染料定量DNA

手套、面罩，并且在通风橱内操作。 4.2 10XTNE储存缓冲液 溶解于800ml蒸馏水中：12.11g Tris碱[Tris（羟甲基）氨基甲烷]，分子量=121.14；3.72g EDTA乙二胺四乙酸，二钠盐，二水合物，分子量=372.20；116.89g 氯化钠，分子量=58.44。用浓盐酸调节溶液PH至7.4，补加蒸馏水定容至1000ml，使用前用0.45μm滤膜过滤，4℃可保存3个月。 注