Recombinant Mouse IGF2

重组蛋白的制备涉及多个步骤，包括基因克隆、表达系统选择和蛋白纯化：
● 基因克隆：基因克隆是将目标基因导入表达载体中的过程。研究人员可以选择不同的克隆方法，如限制性酶切克隆、PCR扩增克隆等，根据需要构建目标基因的DNA序列。
● 表达系统选择：选择适合的表达系统是重组蛋白制备的关键一步。常用的表达系统包括大肠杆菌、酵母、昆虫细胞和哺乳动物细胞。每种表达系统都具有不同的优缺点，适用于不同类型的蛋白质表达。
5大蛋白表达系统：
商品属性：

货号	XG-DB4017	种属	Mouse
宿主	E.Coli	表达区间	25-91
分子量	7.3 kDa	标签	N-terminal His Tag
规格	50μg、200ug、1mg	用途	仅供科研实验

商品介绍：

别称：C11orf43, IGF 2, IGF II, IGF-II, IGF2, IGF2_HUMAN, IGFII, INSIGF, Insulin like Growth Factor 2, insulin like growth factor 2 (somatomedin A), Insulin like growth factor II, Insulin like growth factor II precursor, Insulin like growth factor type 2, pp9974, Preptin, putative insulin like growth factor II associated protein, Somatomedin A, Somatomedin-A  纯度 Greater than 95% by SDS-PAGE gel analyses 应用  Western Blot, ELISA 性状  Lyophilized from a 0.2 μm filtered solution in 10 mM Hepes, 500 mM NaCl with 5% trehalose, pH7.4 溶解方法Centrifuge the vial at 10,000 rpm for 1 minute, reconstitute at 200 μg/ml in sterile distilled water by gentle pipetting 2-3 times, don’t vortex 存储 -20°C for 12 months as lyophilized; 2-8°C for 1 month under sterile conditions after reconstitution

表达、纯化、复性和定量，具体步骤如下：
一、重组蛋白质的诱导表达
1. 挑取转化有质粒的单菌落， 接种于 3ml 选择性 LB 液体培养基中， 37 oC，250 rpm/min 振摇培养过夜。
2. 次日将培养过夜的菌液 500 μl 再接种于 10ml（1:20）选择性 LB 液体培养基 中， 37 oC，250 rpm/min 振摇培养至光密度（OD600=0.6）时，取 1 ml 样本作 为诱导前标本， 10000g 离心 1min 收集菌体沉淀，－20 oC 冻存备用。
3. 加入 1 mol/L IPTG 于菌液中，使 IPTG 终浓度为 1 mM ，37 oC ，250 rpm/min 振摇培养 4 ～ 5 小时。取 1 ml 样本作为诱导后标本，同上法收集菌体沉淀， -20 oC 冻存备用。
4. 将诱导前后菌体沉淀用 20 ~ 40 μl PBS（pH= 8.0）重悬， 加入等体积的 2×SDS 上样缓冲液， 煮沸加热 5min，SDS 凝胶（SDS-PAGE）电泳分离 ， 考马斯亮蓝染色 3 小时后，脱色观察结果。
5. 选取诱导成功的细菌克隆，扩大诱导规模，收集菌体沉淀，于－ 20 oC 保存，准备做下一步分析及纯化。

二、重组蛋白质的分离纯化
重组蛋白质的可溶性鉴定
1. 将按上法诱导培养后收集的菌体重悬于裂解液 1 (Lysis buffer under native conditions )中，然后在－80 oC 低温冰箱中放置 10 min。
2. 冰中解冻。
3. 在冰浴上用超声破碎仪破菌 6 次， 每次 10 sec，间歇 10 sec，电压 200-300 V。
4. 10000g，4oC，离心 20min，取上清（为溶液 A）， － 20 oC 保存； 另将沉淀用 同样裂解液 1 溶解（为溶液 B），同样 －20 oC 保存，供后继分析使用。
5. 将上述 A、B 溶液和诱导前后的细菌进行 SDS-PAGE 电泳， 考马斯亮蓝染色，分析重组蛋白质的溶解性。如果诱导表达的蛋白质位于 A 溶液中， 则为
可溶性蛋白；如果是在 B 溶液中，则为非可溶蛋白。
​​​​​ 公司正在出售的产品：
FCGRT & B2M Protein Rat 重组大鼠 FCGRT & B2M Heterodimer 蛋白
A Beta29-40( Beta-Amyloid 29-40 0.1mgA Beta29-40( Beta-Amyloid 29-40) β淀粉样肽29-40(野生型)
MIF重组小鼠 MIF / Migration Inhibitory Factor 蛋白 (His 标签) Protein
S100A5 Protein Human 重组人 S100A5 蛋白 (His 标签)
PDE1C重组
大鼠肝X受体β(LXRβ)ELISA试剂盒 ，英文名： LXRβ ELISA Kit
Iestinal efoil factor (ITF) ELISA Kit 猪肠三叶因子(ITF)ELISA试剂盒
人博卡病毒(HBoV)核酸检测试剂盒(PCR-荧光探针法) 48T
CLIAKitforMCV(Humanai-matedciullinatedvimeinaibody)ELISAKit人抗突变型瓜氨酸波形蛋白抗体规格：48T/96T
体液人体腺病毒(adenovirus)定量PCR扩增检测试剂盒20次
E
Recombinant Mouse IGF2小鼠可溶性血栓调节蛋白(sTM)ELISA试剂盒 ，英文名： sTM ELISA Kit
大鼠中性粒细胞趋化蛋白2(NAP-2/CXCL7)ELISA检测试剂盒Ratneuophilactivatingprotein-2,NAP-2ELISAKit 96T/48T
人登革热抗体IgM(DF-Ab IgM)免疫试剂盒 Human dengue fever aibody IgM,DF-Ab IgM ELISA kit
RatOrexinAELISAKit大鼠阿立新A(OrexinA)ELISA试剂盒规格：96
TNFSF13B Protein Cynomolgus 重组食蟹猴 BLyS / TNFSF13B / BAFF 蛋白 (Fc 标签)
半乳糖凝集素8(GAL8)重组蛋白 Recombinant Galectin 8 (GAL8)
BST2重组小鼠 TETHERIN / BST2 / CD317 蛋白 (Fc 标签) Protein
CD82 Protein Human 重组人 CD82 / KAI-1 蛋白 (His 标签)
IL22重组人 IL22 / IL-22 / Interleukin 22 蛋
重组蛋白质为非可溶性蛋白（ 变性条件下）的分离纯化1. 将菌体沉淀溶于适量裂解液 2（Lysis buffer under denaturing conditions ）中，室温下搅拌和吹打沉淀，避免泡沫生成。
2. 10000g ，4 oC，离心 30 min，收集上清液。
3. 将 Ni-NTAAgarose 充填柱子，并连接于 Pharmarcia 低压液相层析系统，用 5 倍柱体积的裂解液 2 平衡 Ni-NTAAgarose，调节 A280 值至零线。
4. 将适量上清液上样到 Ni-NTAAgarose 柱子中， 并用 lysis buffer 冲洗至 A280 值低于 0.01。
5. 分别用 5 ～ 10 倍柱体积的清洗液 1 和清洗液 2（Washbuffer 1 and 2）清洗柱 子，直至 A280 值低于 0.01。
6. 用洗脱液（Elution buffer）洗脱重组蛋白质， 在 A280 值监测下，收集出现峰 线后含有重组蛋白的所有洗脱液。 ​​​​​​​