- ￥600 - 3200
- 上海莼试
- CS-01Y64725
- 国产
- 2025年11月19日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
21
- 英文名：
IM-156 (acetate)
- CAS号：
2043654-54-0
- 供应商：
上海莼试
- 保存条件：
Store at -20°C
- 规格：
5 mg 10 mg 25 mg 50 mg
化学性质:
规格：5 mg 10 mg 25 mg 50 mg
CAS：2043654-54-0
别名：N/A
化学名：N/A
IM-156 (acetate)分子式：C13H16F3N5O·XC2H4O2
分子量：315.3
溶解度：DMF: 1 mg/ml,DMSO: 1 mg/ml,Ethanol: 1 mg/ml
储存条件：Store at-20°C
General tips：For obtaining a higher solubility , please warm the tube at 37 ℃ and shake it in the ultrasonic bath for a while.
Shipping Condition: Evaluation sample solution : ship with blue ice All other available size: ship with RT , or blue ice upon request
本产品仅供科学实验研究使用! 不能用于临床或动物诊断！
产品描述:
IM-156 is an inhibitor of mitochondrial complex I, also known as NADH dehydrogenase (IC50 = 2.2 μM) and an activator of AMP-activated protein kinase α (AMPKα).1,2 It reduces the oxygen consumption rate (OCR; IC50 = 3.3 μM) and decreases mitochondrial ATP production in Eμ-Myc mouse lymphoma cells.1 IM-156 (10, 30, and 50 μM) increases AMPKα activity in primary rat peritoneal mesothelial cells and protects against chlorhexidine-induced peritoneal fibrosis in rats when administered at a dose of 1 mg/kg.2 It reduces tumor growth in an AT-84 murine oral cancer model and decreases age-related decline in novel object recognition, spatial working, and contextual memory in mice.3,41.Izreig, S., Gariepy, A., Kaymak, I., et al.Repression of LKB1 by miR-17~92 sensitizes MYC-dependent lymphoma to biguanide treatmentCell Rep. Med.1(2)100014(2020) 2.Ju, K.D., Kim, H.J., Tsogbadrakh, B., et al.HL156A, a novel AMP-activated protein kinase activator, is protective against peritoneal fibrosis in an in vivo and in vitro model of peritoneal fibrosisAm. J. Physiol. Renal. Physiol.310(5)F342-F350(2016) 3.Lam, T.G., Jeong, Y.S., Kim, S.-A., et al.New metformin derivative HL156A prevents oral cancer progression by inhibiting the insulin-like growth factor/AKT/mammalian target of rapamycin pathwaysCancer Sci.109(3)699-709(2018) 4.Bang, E., Lee, B., Park, J.-O., et al.The improving effect of HL271, a chemical derivative of metformin, a popular drug for type II diabetes mellitus, on aging-induced cognitive declineExp. Neurobiol.27(1)45-56(2018).
使用方法:
1. 常用筛选浓度
注意：用来筛选稳转株的工作浓度需要根据细胞类型，培养基，生长条件和细胞代谢率而变化，推荐使用浓度为50-1000μg/mL。对于第一次使用的实验体系建议通过建立杀灭曲线(kill curve)，即剂量反应性曲线，来确定最佳筛选浓度。
一般而言，哺乳动物细胞50-500μg/mL;细菌/植物细胞20-200μg/mL;真菌300-1000μg/mL。
2. 杀灭曲线的建立
注意：为了筛选得到稳定表达目的蛋白的细胞株，需要确定能够杀死未转染宿主细胞的抗生素浓度，可通过建立杀灭曲线(剂量反应曲线)来实现，至少选择5个浓度。
1) 第一天：未转化的细胞按照20-25%的细胞密度铺在合适的培养板上，37℃，CO2培养过夜;注：对于需要更高密度来检测活力的细胞，可增加接种量。
2) 根据细胞类型，设定合适范围内的浓度梯度。以哺乳动物细胞为例，可设定50，100，250，500，750，1000μg/mL。先用去离子水或者PBS buffer按照1:10的比例将母液稀释到5 mg/ml，然后按照下表稀释到相应浓度的工作液。
3) 第二天：替换旧的培养基，换用新鲜配制的含有相应浓度药物的培养基。每个浓度做三个平行孔。
4) 接下来每3-4天更换新的含药物培养基。
5) 按照固定的周期(如每2天)进行活细胞计数来确定阻止未转染细胞生长的恰当浓度。选择在理想的天数(通常是7-10天)内能够杀死绝大多数细胞的浓度为稳定转染细胞筛选用的工作浓度。
3. 稳定转染细胞的筛选
1) 转染48h后，用含有适当浓度的潮霉素B筛选培养基来传代细胞(直接传代或者稀释后传代)。
注意：细胞处于活跃分裂状态时抗生素的杀伤。则当细胞过于稠密，其效率会降低。为了得到较好的筛选效果，最好将细胞稀释至丰度不超过25%
2) 每隔3-4天更换含有药物的筛选培养液。
3) 筛选7天后观察并评估细胞克隆(集落)的形成情况。集落的形成可能还需要一周或者更多的时间，这取决于宿主细胞类型，转染，以及筛选效果。
4) 挑取并转移5-10个抗性克隆于35mm细胞培养板，继续用含药物的筛选培养液维持培养7天。
5) 之后更换正常培养基培养即可。
蛋白酶抑制剂混合物实验步骤:
(1)实验开始前将RNA提取液于65℃水浴锅中预热,离心管中加入ME(巯基乙醇),(10mL加80ul,50mL中加入300ul)
(2)取约0.8g菌丝体(液体培养获得的菌丝用真空抽滤即可！固体培养就更好说了),在液氮中迅速磨成精细粉末,装入50mL离心管,按1g材料8mL的量加入预热的RNA提取液,颠倒混匀
(3)65℃水浴3-10 min,期间混匀2-3次
(4)加入等体积的酚(注意是酸酚pH4.5)::yi戊醇(25:24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(5)取上清,等体积的yi戊醇(24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(6)加入1/4V体积10M LiCl溶液,4℃放置6h以上(或过夜)
(7)10,000rpm,4℃离心20min
(8)弃上清,用500ul SSTE溶解沉淀
(9)酚::yi戊醇(25:24:1)抽提两次,:yi戊醇(24:1)抽提1次(10,000rpm,4℃,5min)
(10)加2V体积的无水乙醇,在-70℃冰箱沉淀30min以上
(11)12,000rpm,4℃离心20 min
(12)弃上清.沉淀用70%酒精漂洗一次,干燥
(13)加200ul的DEPC处理水溶解
(14)用非变性琼脂糖凝胶电泳和紫外分光光度计扫描检测RNA的质量(在抽提过程中,若蛋白质含量或其它的杂质还较多,可以增加抽提次数)
公司正在出售的产品:
规格：5 mg 10 mg 25 mg 50 mg
CAS：2043654-54-0
别名：N/A
化学名：N/A
IM-156 (acetate)分子式：C13H16F3N5O·XC2H4O2
分子量：315.3
溶解度：DMF: 1 mg/ml,DMSO: 1 mg/ml,Ethanol: 1 mg/ml
储存条件：Store at-20°C
General tips：For obtaining a higher solubility , please warm the tube at 37 ℃ and shake it in the ultrasonic bath for a while.
Shipping Condition: Evaluation sample solution : ship with blue ice All other available size: ship with RT , or blue ice upon request
本产品仅供科学实验研究使用! 不能用于临床或动物诊断！
| 产品名称 | IM-156 (acetate) | 产品货号 | CS-01Y64725 |
| 规格 | 5 mg 10 mg 25 mg 50 mg | CAS号 | 2043654-54-0 |
| 含量 | >98.00% | 分子式 | C13H16F3N5O·XC2H4O2 |
| 分子量 | 315.3 | 用途 | 仅供科研研究使用 |
IM-156 is an inhibitor of mitochondrial complex I, also known as NADH dehydrogenase (IC50 = 2.2 μM) and an activator of AMP-activated protein kinase α (AMPKα).1,2 It reduces the oxygen consumption rate (OCR; IC50 = 3.3 μM) and decreases mitochondrial ATP production in Eμ-Myc mouse lymphoma cells.1 IM-156 (10, 30, and 50 μM) increases AMPKα activity in primary rat peritoneal mesothelial cells and protects against chlorhexidine-induced peritoneal fibrosis in rats when administered at a dose of 1 mg/kg.2 It reduces tumor growth in an AT-84 murine oral cancer model and decreases age-related decline in novel object recognition, spatial working, and contextual memory in mice.3,41.Izreig, S., Gariepy, A., Kaymak, I., et al.Repression of LKB1 by miR-17~92 sensitizes MYC-dependent lymphoma to biguanide treatmentCell Rep. Med.1(2)100014(2020) 2.Ju, K.D., Kim, H.J., Tsogbadrakh, B., et al.HL156A, a novel AMP-activated protein kinase activator, is protective against peritoneal fibrosis in an in vivo and in vitro model of peritoneal fibrosisAm. J. Physiol. Renal. Physiol.310(5)F342-F350(2016) 3.Lam, T.G., Jeong, Y.S., Kim, S.-A., et al.New metformin derivative HL156A prevents oral cancer progression by inhibiting the insulin-like growth factor/AKT/mammalian target of rapamycin pathwaysCancer Sci.109(3)699-709(2018) 4.Bang, E., Lee, B., Park, J.-O., et al.The improving effect of HL271, a chemical derivative of metformin, a popular drug for type II diabetes mellitus, on aging-induced cognitive declineExp. Neurobiol.27(1)45-56(2018).
使用方法:
1. 常用筛选浓度
注意：用来筛选稳转株的工作浓度需要根据细胞类型，培养基，生长条件和细胞代谢率而变化，推荐使用浓度为50-1000μg/mL。对于第一次使用的实验体系建议通过建立杀灭曲线(kill curve)，即剂量反应性曲线，来确定最佳筛选浓度。
一般而言，哺乳动物细胞50-500μg/mL;细菌/植物细胞20-200μg/mL;真菌300-1000μg/mL。
2. 杀灭曲线的建立
注意：为了筛选得到稳定表达目的蛋白的细胞株，需要确定能够杀死未转染宿主细胞的抗生素浓度，可通过建立杀灭曲线(剂量反应曲线)来实现，至少选择5个浓度。
1) 第一天：未转化的细胞按照20-25%的细胞密度铺在合适的培养板上，37℃，CO2培养过夜;注：对于需要更高密度来检测活力的细胞，可增加接种量。
2) 根据细胞类型，设定合适范围内的浓度梯度。以哺乳动物细胞为例，可设定50，100，250，500，750，1000μg/mL。先用去离子水或者PBS buffer按照1:10的比例将母液稀释到5 mg/ml，然后按照下表稀释到相应浓度的工作液。
3) 第二天：替换旧的培养基，换用新鲜配制的含有相应浓度药物的培养基。每个浓度做三个平行孔。
4) 接下来每3-4天更换新的含药物培养基。
5) 按照固定的周期(如每2天)进行活细胞计数来确定阻止未转染细胞生长的恰当浓度。选择在理想的天数(通常是7-10天)内能够杀死绝大多数细胞的浓度为稳定转染细胞筛选用的工作浓度。
3. 稳定转染细胞的筛选
1) 转染48h后，用含有适当浓度的潮霉素B筛选培养基来传代细胞(直接传代或者稀释后传代)。
注意：细胞处于活跃分裂状态时抗生素的杀伤。则当细胞过于稠密，其效率会降低。为了得到较好的筛选效果，最好将细胞稀释至丰度不超过25%
2) 每隔3-4天更换含有药物的筛选培养液。
3) 筛选7天后观察并评估细胞克隆(集落)的形成情况。集落的形成可能还需要一周或者更多的时间，这取决于宿主细胞类型，转染，以及筛选效果。
4) 挑取并转移5-10个抗性克隆于35mm细胞培养板，继续用含药物的筛选培养液维持培养7天。
5) 之后更换正常培养基培养即可。
蛋白酶抑制剂混合物实验步骤:
(1)实验开始前将RNA提取液于65℃水浴锅中预热,离心管中加入ME(巯基乙醇),(10mL加80ul,50mL中加入300ul)
(2)取约0.8g菌丝体(液体培养获得的菌丝用真空抽滤即可！固体培养就更好说了),在液氮中迅速磨成精细粉末,装入50mL离心管,按1g材料8mL的量加入预热的RNA提取液,颠倒混匀
(3)65℃水浴3-10 min,期间混匀2-3次
(4)加入等体积的酚(注意是酸酚pH4.5)::yi戊醇(25:24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(5)取上清,等体积的yi戊醇(24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(6)加入1/4V体积10M LiCl溶液,4℃放置6h以上(或过夜)
(7)10,000rpm,4℃离心20min
(8)弃上清,用500ul SSTE溶解沉淀
(9)酚::yi戊醇(25:24:1)抽提两次,:yi戊醇(24:1)抽提1次(10,000rpm,4℃,5min)
(10)加2V体积的无水乙醇,在-70℃冰箱沉淀30min以上
(11)12,000rpm,4℃离心20 min
(12)弃上清.沉淀用70%酒精漂洗一次,干燥
(13)加200ul的DEPC处理水溶解
(14)用非变性琼脂糖凝胶电泳和紫外分光光度计扫描检测RNA的质量(在抽提过程中,若蛋白质含量或其它的杂质还较多,可以增加抽提次数)
公司正在出售的产品:
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| Multifungin | 淀粉酶β检测试剂盒 Amyβ ELISA Kit |
| Cefotetan | 淀粉酶α检测试剂盒 Amyα ELISA Kit |
| Terminolic acid | 电子转移黄素蛋白α肽检测试剂盒 ETFα ELISA Kit |
| Ampicillin (D-(-)-α-Aminobenzylpenicillin) | 电子转移黄素蛋白β肽检测试剂盒 ETFβ ELISA Kit |
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| Sulfamethazine | 淀粉酶γ检测试剂盒 Amyγ ELISA Kit |
| BAY-Y 3118 | 淀粉样蛋白β前样蛋白2检测试剂盒 APLP2 ELISA Kit |
| PPA-904 | 凋亡信号调节激酶I检测试剂盒 ASK1 ELISA Kit |
| N-(Ketocaproyl)-DL-homoserine lactone | 凋亡抑制因子5检测试剂盒 API5 ELISA Kit |
| Emetine (hydrochloride) | IM-156 (acetate)动力蛋白胞浆1重链1检测试剂盒 DYNC1H1 ELISA Kit |
| Lanoconazole | 动力蛋白激活蛋白1检测试剂盒 DCTN1 ELISA Kit |
| 人前列腺素F2αELISA试剂盒 | 动力蛋白激活蛋白2检测试剂盒 DCTN2 ELISA Kit |
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