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- 中国
- HY-P2295-5mg
- 2025年07月16日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 供应商：
广州威佳科技有限公司
- 规格：
5mg
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文献和实验）茎杆序列中G和C的含量不能太高5’-端的第一个碱基最好不要选择G由于被测对象DNA或RNA是大分子，存在扭曲现象，因此要选择被测对象的外围碱基序列，即容易接近的那段序列来设计信标。荧光猝灭依赖的是能量共振转移，而转移的效率与荧光基团发射光谱同猝灭基团激发光谱的完全重叠有关。为了荧光能有效猝灭，荧光基团的发射光谱应完全覆盖猝灭基团激发光谱。符合此要求且较常用的荧光剂-淬灭剂有：EDANS（5′- (2′-氨乙基氨基奈-1-磺酸)和DABCYL（4′-(4′-二甲基氨基叠氮苯) 苯甲酸 6-荧
，首先第一个Fmoc氨基酸通过一个酸性接头接到不溶载体树脂上，Fmoc去保护通过用碱处理树脂来完成，一般是Poperidine。 用预先激活或原位激活连接第二个Fmoc氨基酸。要求总多肽合成后，通过TFA分离来除去树脂和去保护。 Fmoc分离 固相多肽合成中多肽分离主要用酸解 Fmoc法用弱酸，比如TFA或TMSBr。各种添加剂， 一般为thiol compound , 水和酚，用来保护多肽的免分离中Carbocation的破坏。 下列保护基与TFA和TMSBr分离相合
/0.5%TFA 溶液数次，然后用0.1%TFA平衡 2.用200ul 0.1%TFA 将冻干样品复溶 3.用ZipTip 吸入压出复溶液大约10次左右 4.用0.1%TFA 冲洗 5.先用Tris-HCl Buffer(50mM/L PH 8.2)冲洗ZipTip，然后用ZipTip缓慢吸入2.55mg/ml SPITC (Tris-HCl Buffer配制)，然后50℃ 水浴 1h 6.取出ZipTip，将多余试剂用0.1%TFA 冲洗干净，衍生后的样品用2.5ul 80%ACN/0.5%TFA
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