Recombinant Human IGSF11

● 基因克隆：基因克隆是将目标基因导入表达载体中的过程。研究人员可以选择不同的克隆方法，如限制性酶切克隆、PCR扩增克隆等，根据需要构建目标基因的DNA序列。
● 表达系统选择：选择适合的表达系统是重组蛋白制备的关键一步。常用的表达系统包括大肠杆菌、酵母、昆虫细胞和哺乳动物细胞。每种表达系统都具有不同的优缺点，适用于不同类型的蛋白质表达。
5大蛋白表达系统：
商品属性：

货号	XG-DB2331	种属	Human
宿主	E.Coli	表达区间	24-241
分子量	43.7 kDa	标签	N-terminal His-IF2DI Tag
规格	50μg、200ug、1mg	用途	仅供科研实验

商品介绍：

别称：brain and testis specific immunoglobin superfamily protein, BTIGSF, CXADR like 1, CXADRL1, Igsf13, immunoglobulin superfamily member 11, Immunoglobulin superfamily member 11 precursor, MGC35227, V set and immunoglobulin domain containing 3, V set and immunoglobulin domain containing protein 3, VSIG3  纯度 Greater than 95% by SDS-PAGE gel analyses 应用  Western Blot, ELISA 性状  Lyophilized from a 0.2 μm filtered solution in 10 mM Hepes, 500 mM NaCl with 5% trehalose, pH7.4 溶解方法Centrifuge the vial at 10,000 rpm for 1 minute, reconstitute at 200 μg/ml in sterile distilled water by gentle pipetting 2-3 times, don’t vortex 存储 -20°C for 12 months as lyophilized; 2-8°C for 1 month under sterile conditions after reconstitution

表达、纯化、复性和定量，具体步骤如下：
一、重组蛋白质的诱导表达
1. 挑取转化有质粒的单菌落， 接种于 3ml 选择性 LB 液体培养基中， 37 oC，250 rpm/min 振摇培养过夜。
2. 次日将培养过夜的菌液 500 μl 再接种于 10ml（1:20）选择性 LB 液体培养基 中， 37 oC，250 rpm/min 振摇培养至光密度（OD600=0.6）时，取 1 ml 样本作 为诱导前标本， 10000g 离心 1min 收集菌体沉淀，－20 oC 冻存备用。
3. 加入 1 mol/L IPTG 于菌液中，使 IPTG 终浓度为 1 mM ，37 oC ，250 rpm/min 振摇培养 4 ～ 5 小时。取 1 ml 样本作为诱导后标本，同上法收集菌体沉淀， -20 oC 冻存备用。
4. 将诱导前后菌体沉淀用 20 ~ 40 μl PBS（pH= 8.0）重悬， 加入等体积的 2×SDS 上样缓冲液， 煮沸加热 5min，SDS 凝胶（SDS-PAGE）电泳分离 ， 考马斯亮蓝染色 3 小时后，脱色观察结果。
5. 选取诱导成功的细菌克隆，扩大诱导规模，收集菌体沉淀，于－ 20 oC 保存，准备做下一步分析及纯化。

二、重组蛋白质的分离纯化
重组蛋白质的可溶性鉴定
1. 将按上法诱导培养后收集的菌体重悬于裂解液 1 (Lysis buffer under native conditions )中，然后在－80 oC 低温冰箱中放置 10 min。
2. 冰中解冻。
3. 在冰浴上用超声破碎仪破菌 6 次， 每次 10 sec，间歇 10 sec，电压 200-300 V。
4. 10000g，4oC，离心 20min，取上清（为溶液 A）， － 20 oC 保存； 另将沉淀用 同样裂解液 1 溶解（为溶液 B），同样 －20 oC 保存，供后继分析使用。
5. 将上述 A、B 溶液和诱导前后的细菌进行 SDS-PAGE 电泳， 考马斯亮蓝染色， 分析重组蛋白质的溶解性。如果诱导表达的蛋白质位于 A 溶液中， 则为
可溶性蛋白；如果是在 B 溶液中，则为非可溶蛋白。
重组蛋白质为非可溶性蛋白（ 变性条件下）的分离纯化
1. 将菌体沉淀溶于适量裂解液 2（Lysis buffer under denaturing conditions ）中，室温下搅拌和吹打沉淀，避免泡沫生成。
2. 10000g ，4 oC，离心 30 min，收集上清液。
3. 将 Ni-NTAAgarose 充填柱子，并连接于 Pharmarcia 低压液相层析系统，用 5 倍柱体积的裂解液 2 平衡 Ni-NTAAgarose，调节 A280 值至零线。
4. 将适量上清液上样到 Ni-NTAAgarose 柱子中， 并用 lysis buffer 冲洗至 A280 值低于 0.01。
5. 分别用 5 ～ 10 倍柱体积的清洗液 1 和清洗液 2（Washbuffer 1 and 2）清洗柱 子，直至 A280 值低于 0.01。
6. 用洗脱液（Elution buffer）洗脱重组蛋白质， 在 A280 值监测下，收集出现峰 线后含有重组蛋白的所有洗脱液。
公司正在出售的产品：
ITC肉汤(基础) incubation media ITC肉汤(基础)  HA重组甲型流感 H1N2 (A/swine/Guangxi/13/2006) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白 (His 标签) Protein
10%氯胰酪胨大豆肉汤 250g 用于球菌的多管发酵法测定及增菌培养(GB/T4789.10-2008)。  ShK(Stichodactyla helianthus Neurotoxin 0.1mgShK(Stichodactyla helianthus Neurotoxin)-(Gln9) 海葵神经毒素(35肽)
SD大鼠脂肪间质干细胞成软骨诱导分化完全培养基SDratadiposemesenchymalstemcellsintochondrocytesinduceddifferentiationofcompletemedium  IL22RA2重组人 IL22BP / IL22RA2 蛋白 (His & Fc 标签) Protein
锰盐营养琼脂 250g 用于嗜热需氧芽孢杆菌的检验  CTF1 Protein Human 重组人 Cardiotrophin-1 / CTF1 蛋白
纤维二糖5每菌添加于  LAYN Protein Human 重组人 Layilin / LAYN 蛋白 (Fc 标签)
JMMediumBase  HA重组甲型流感 H3N2 (A/Perth/16/2009) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白 (His 标签) Protein
2216E琼脂 2216E　Agar 250 用于海生细菌的培养和计数  pre S1/S2 protein [HBV] 乙肝病毒pre S1/乙肝病毒pre S2(抗原 0.5mgpre S1/S2 protein [HBV] 乙肝病毒pre S1/乙肝病毒pre S2(抗原)
肠道菌增菌肉汤(EE肉汤)250g/瓶用于肠道菌的增菌培养incubationmedia肠道菌增菌肉汤(EE肉汤)250g/瓶用于肠道菌的增菌培养  AKT1重组人 AKT1 / PKB / PKBα 蛋白 (His 标签) Protein
品红亚琼脂平板(9cm) 10个/包 用于饮用水、水源水中总大肠菌群的选择性分离和确证  CTF1 Protein Human 重组人 Cardiotrophin-1 / CTF1 蛋白 (Fc 标签)
HE琼脂(HE)250g用于沙门氏菌的选择性分离培养(GB标准)  DPP7 Protein Human 重组人 DPP7 / DPPII / DPP2 蛋白 (His 标签)
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RNS培养基250g/瓶用于植物组织培养incubationmediaRNS培养基250g/瓶用于植物组织培养  MAPK14重组人 p38 alpha / MAPK14 蛋白 (Activated in vitro, His 标签) Protein
黄素 3.0mg/支*5 每支添加于225ml HBJ005中制成LB1肉汤  CTHRC1 Protein Human 重组人 CTHRC1 蛋白 (His 标签)
3%NaClMR-VPMedium  HA Protein Influenza 重组甲型流感 H4N6 (A/Swine/Ontario/01911-1/99) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白 (His 标签)
JM培养基基础 250g 海博新产品  TREM1重组人 TREM1 蛋白 (His & Fc 标签) Protein
Recombinant Human IGSF1140%尿素水 40%Urea Water 5ml*10 加入尿素酶琼脂基础  信号素5B(SEMA5B)重组蛋白 Recombinant Semaphorin 5B (SEMA5B)
麦康凯肌醇阿东醇青霉素琼脂(MIAC)基础瓶用于克雷伯氏菌选择性分离，每培养基中添加0244incubationmedia麦康凯肌醇阿东醇青霉素琼脂(MIAC)基础瓶用于克雷伯氏菌选择性分离，每培养基中添加0244  LDLRAD3重组人 LDLRAD3 蛋白 (ECD, Fc 标签) Protein
VioletRedBileAgar  CTLA4 Protein Human 重组人 CTLA4 / CD152 蛋白 (His & Fc 标签)
Rappaport-VassiliadisMdeium