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- 2025年07月11日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 英文名：
人滑膜细胞
- 库存：
999
- 供应商：
上海圻明
- 细胞类型：
详见说明
- 组织来源：
详见说明
- 物种来源：
详见说明
- 细胞形态：
详见说明
- 运输方式：
常温/冷冻
- 生长状态：
详见说明
- 规格：
T/25*1瓶
欢迎光临圻明生物细胞专场，我们拥有上千种类齐全的细胞资源库，让广大科研工作者买的放心，用的省心！
人滑膜细胞哪里买传代建议一传二
1)当细胞汇合度达到85%以上时，可进行传代。
2)在生物安全柜内，打开培养瓶瓶口，收集瓶内的培养基；
3)向培养瓶内加入3ml无菌的1×PBS 后，水平放置培养瓶，使PBS能够浸润到培养瓶底面上所有的面积，吸弃PBS；
4)向瓶内加入消化液1ml，浸润底面后放入37℃ CO2培养箱中孵育1~2min；
5)孵育完成后在倒置显微镜下观察细胞是否变圆飘起，若全部消化下来则直接向培养瓶内加入2ml含10%FBS的完全培养基中，将悬液吸入15ml离心管；
注：如还有部分细胞未消化下来，可采用分步消化：
① 准备一个无菌的15ml离心管，加入2ml含10%FBS的完全培养基；
② 将消化下来的细胞吸入①中的离心管内中和（避免吹打）；
③ 向之前消化的培养瓶中加入1ml胰酶继续消化2min左右，轻拍培养瓶，95%左右细胞脱落后加入2ml含10%FBS的完全培养基中和，中和后的细胞悬液移入①中的离心管内。
6)1000rpm离心5min；
7)准备两个新的T-25培养瓶，各加入4ml完全培养基。
8)离心完成后，弃上清，用2ml完全培养基重悬离心细胞，将重悬后的细胞转入2个T-25培养瓶，每个培养瓶各1ml；
9)水平放置培养瓶，震荡混匀后，将培养瓶置于37℃，5%CO2培养箱中静置培养。
冻存 （细胞冻存建议每瓶T25冻一支）
1）~6）参照传代步骤
7）离心完成后，弃上清，用1mL冻存液重悬细胞沉淀，然后转入1.8ml冻存管中；
8）将冻存管转入填充满异丙醇的程序降温盒中，之后转入-80℃冰箱中过夜降温；
9）第二天，取出降温完成的序降温盒中的冻存管，尽快转入液氮罐中保存。
产品仅供科研不用于诊断治疗等其他用途。欢迎新老客户咨询订购人滑膜细胞哪里买，其他相关产品
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文献和实验我养过人类原代滑膜细胞，探讨传代经验：其实最好还是在细胞长满时、还没有接触性抑制之前传代为好1、预温0.25% trypsin， 0.02%EDTA2、用Ca－free的PBS洗涤贴壁细胞三次3、用1份0.25% trypsin， 0.02%EDTA和3份PBS室温下消化（不要用全量消化液因为对于细胞的悬浮作用不但未见有增强作用而且对细胞本身没有好处）4、在倒置显微镜下观察细胞悬浮情况，约有半数以上细胞开始漂浮就用移液管（滴管）移出，置入离心管中5、离心1000rpm，10min6、上清液移回
实验材料： 1. 实验动物：大鼠、兔，人手术切除的关节等； 2. 清洗液：不含Ca2+ 和Mg2+ 的1×PBS，添加100IU/ml青霉素、100µg/ml链霉素，pH7.2； 3. 培养液：RPMI1640培养基，补加15%小牛血清； 实验方法： 1. 将大鼠处死后，用75%酒精消毒； 2. 用手术剪剖开其四肢皮肤与肌肉，暴露长骨两端的关节，取出关节面滑膜组织置于盛有缓冲液的培养皿中； 3. 剔除滑膜组织外层结构及周边软骨组织，用缓冲液洗2—3次；
做一个定量。 纯化GST融合蛋白时，有些容易降解的蛋白质会出现电泳时有类似GST分子量的降解条带出现。 山明水秀lxm 请问GST pulldown的柱子从哪里买到的，具体叫什么柱子呢，谢谢 xiaohuilang 上样量太大造成的 本文由丁香园论坛提供，想了解更多有用的、有意思的前沿资讯以及酷炫的实验方法的你，都可以成为师兄的好伙伴 师兄微信号：shixiongcoming
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