Recombinant Human Sm-E

重组蛋白的制备涉及多个步骤，包括基因克隆、表达系统选择和蛋白纯化：
● 基因克隆：基因克隆是将目标基因导入表达载体中的过程。研究人员可以选择不同的克隆方法，如限制性酶切克隆、PCR扩增克隆等，根据需要构建目标基因的DNA序列。
● 表达系统选择：选择适合的表达系统是重组蛋白制备的关键一步。常用的表达系统包括大肠杆菌、酵母、昆虫细胞和哺乳动物细胞。每种表达系统都具有不同的优缺点，适用于不同类型的蛋白质表达。
5大蛋白表达系统：
商品属性：

货号	XG-DB3434	种属	Human
宿主	E.Coli	表达区间	1-92
分子量	12.7 kDa	标签	N-terminal His Tag
规格	50μg、200ug、1mg	用途	仅供科研实验

商品介绍：

别称：AL022645, B raf, B-raf, Braf, C76690, HYPT11, RUXE_HUMAN, Sm protein E, Sm-E, Small nuclear ribonucleoprotein E, SmE, snRNP-E, snRNPE, snrpe  纯度 Greater than 95% as determined by SDS-PAGE 应用  Western Blot, ELISA 性状  Lyophilized from a 0.2 μm filtered solution in 10 mM Hepes, 500 mM NaCl with 5% trehalose, pH7.4 溶解方法Centrifuge the vial at 10,000 rpm for 1 minute, reconstitute at 200 μg/ml in sterile distilled water by gentle pipetting 2-3 times, don’t vortex 存储 -20°C for 12 months as lyophilized; 2-8°C for 1 month under sterile conditions after reconstitution

表达、纯化、复性和定量，具体步骤如下：
一、重组蛋白质的诱导表达
1. 挑取转化有质粒的单菌落， 接种于 3ml 选择性 LB 液体培养基中， 37 oC，250 rpm/min 振摇培养过夜。
2. 次日将培养过夜的菌液 500 μl 再接种于 10ml（1:20）选择性 LB 液体培养基 中， 37 oC，250 rpm/min 振摇培养至光密度（OD600=0.6）时，取 1 ml 样本作 为诱导前标本， 10000g 离心 1min 收集菌体沉淀，－20 oC 冻存备用。
3. 加入 1 mol/L IPTG 于菌液中，使 IPTG 终浓度为 1 mM ，37 oC ，250 rpm/min 振摇培养 4 ～ 5 小时。取 1 ml 样本作为诱导后标本，同上法收集菌体沉淀， -20 oC 冻存备用。
4. 将诱导前后菌体沉淀用 20 ~ 40 μl PBS（pH= 8.0）重悬， 加入等体积的 2×SDS 上样缓冲液， 煮沸加热 5min，SDS 凝胶（SDS-PAGE）电泳分离 ， 考马斯亮蓝染色 3 小时后，脱色观察结果。
5. 选取诱导成功的细菌克隆，扩大诱导规模，收集菌体沉淀，于－ 20 oC 保存，准备做下一步分析及纯化。

二、重组蛋白质的分离纯化
重组蛋白质的可溶性鉴定
1. 将按上法诱导培养后收集的菌体重悬于裂解液 1 (Lysis buffer under native conditions )中，然后在－80 oC 低温冰箱中放置 10 min。
2. 冰中解冻。
3. 在冰浴上用超声破碎仪破菌 6 次， 每次 10 sec，间歇 10 sec，电压 200-300 V。
4. 10000g，4oC，离心 20min，取上清（为溶液 A）， － 20 oC 保存； 另将沉淀用 同样裂解液 1 溶解（为溶液 B），同样 －20 oC 保存，供后继分析使用。
5. 将上述 A、B 溶液和诱导前后的细菌进行 SDS-PAGE 电泳， 考马斯亮蓝染色， 比较分析重组蛋白质的溶解性。如果诱导表达的蛋白质位于 A 溶液中， 则为
可溶性蛋白；如果是在 B 溶液中，则为非可溶蛋白。
公司正在出售的产品：
大鼠白细胞介素1βelisa试剂盒   大鼠白细胞介素1β试剂盒   规格型号：96T/48T   大鼠白细胞介素1β试剂盒，规格型号：96T/48T，来源：elisa试剂盒（进口分装），产品别名：大鼠白细胞介素1β试剂盒、大鼠白细胞介素1βeisa试剂盒   保存条件：2-8℃   保质期：6个月。    NLGN1 Protein Mouse 重组小鼠 Neuroligin 1 / NLGN1 蛋白 (His 标签)
大鼠白细胞介素18elisa试剂盒   大鼠白细胞介素18试剂盒   规格型号：96T/48T   大鼠白细胞介素18试剂盒，规格型号：96T/48T，来源：elisa试剂盒（进口分装），产品别名：大鼠白细胞介素18试剂盒、大鼠白细胞介素18eisa试剂盒   保存条件：2-8℃   保质期：6个月。    LH(Luteinizing Hormone 0.5mgLH(Luteinizing Hormone) 人促黄体生成素(多肽)
大鼠白细胞介素17elisa试剂盒   大鼠白细胞介素17试剂盒   规格型号：96T/48T   大鼠白细胞介素17试剂盒，规格型号：96T/48T，来源：elisa试剂盒（进口分装），产品别名：大鼠白细胞介素17试剂盒、大鼠白细胞介素17eisa试剂盒   保存条件：2-8℃   保质期：6个月。    CD86重组食蟹猴 CD86 / B7-2 蛋白 (Fc 标签) Protein
大鼠白细胞介素16elisa试剂盒   大鼠白细胞介素16试剂盒   规格型号：96T/48T   大鼠白细胞介素16试剂盒，规格型号：96T/48T，来源：elisa试剂盒（进口分装），产品别名：大鼠白细胞介素16试剂盒、大鼠白细胞介素16eisa试剂盒   保存条件：2-8℃   保质期：6个月。    DNAJC30 Protein Human 重组人 DNAJC30 蛋白 (His 标签)
大鼠白细胞介素13elisa试剂盒   大鼠白细胞介素13试剂盒   规格型号：96T/48T   大鼠白细胞介素13试剂盒，规格型号：96T/48T，来源：elisa试剂盒（进口分装），产品别名：大鼠白细胞介素13试剂盒、大鼠白细胞介素13eisa试剂盒   保存条件：2-8℃   保质期：6个月。    PHPT1重组人 PHPT1 / PHP14 蛋白 (His 标签) Protein
大鼠白细胞介素10elisa试剂盒   大鼠白细胞介素10试剂盒   规格型号：96T/48T   大鼠白细胞介素10试剂盒，规格型号：96T/48T，来源：elisa试剂盒（进口分装），产品别名：大鼠白细胞介素10试剂盒、大鼠白细胞介素10eisa试剂盒   保存条件：2-8℃   保质期：6个月。    XCL1 Protein Canine 重组狗 XCL1 蛋白 (His 标签)
大鼠白细胞活化黏附因子elisa试剂盒   大鼠白细胞活化黏附因子试剂盒   规格型号：96T/48T   大鼠白细胞活化黏附因子试剂盒，规格型号：96T/48T，来源：elisa试剂盒（进口分装），产品别名：大鼠白细胞活化黏附因子试剂盒、大鼠白细胞活化黏附因子eisa试剂盒   保存条件：2-8℃   保质期：6个月。    花生四烯酸-15-脂加氧酶(ALOX15)重组蛋白 Recombinant Arachidonate-15-Lipoxygenase (ALOX15)
鸭γ干扰素elisa试剂盒   鸭γ干扰素试剂盒   规格型号：96T/48T   鸭γ干扰素试剂盒，规格型号：96T/48T，来源：elisa试剂盒（进口分装），产品别名：鸭γ干扰素试剂盒、鸭γ干扰素eisa试剂盒   保存条件：2-8℃   保质期：6个月。    EGF重组小鼠 EGF / Epidermal Growth Factor 蛋白 Protein
大鼠白细胞间介素31   英文名称：   Rat Ierleukin 31      英文缩写：   IL-31    NCR2 Protein Human 重组人 NCR2 / NKp44 / CD336 蛋白 (His 标签)
大鼠缺血性修饰蛋白   英文名称：   Rat Ischemia Modified Albumin      英文缩写：   IMA    MAPRE3重组人 MAPRE3 / EB3 蛋白 (His 标签) Protein
大鼠细胞间粘附分子-1   英文名称：   Iercellular Adhesion Molecule-1      英文缩写：   ICAM-1    PVRL2 Protein Human 重组人 CD112 / Nectin-2 / PVRL2 蛋白
大鼠干扰素-α   英文名称：   Ierferon α      英文缩写：   IFN-α    Phospho-PAK4 (Ser99 0.5mgPhospho-PAK4 (Ser99) peptide 0酸化p21激活激酶4多肽抗原
Recombinant Human Sm-E大鼠白细胞活化黏附因子(ALCAM)ELISAKit   ELISA.   96T/48T    HA重组甲型流感 H7N9 (A/Hangzhou/1/2013) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白 (His 标签) Protein
大鼠白介素9(IL-9)ELISAKit   ELISA.   96T/48T    FAM19A4 Protein Human 重组人 FAM19A4 / TAFA4 蛋白 (Fc 标签)
重组蛋白质为非可溶性蛋白（ 变性条件下）的分离纯化
1. 将菌体沉淀溶于适量裂解液 2（Lysis buffer under denaturing conditions ）中，室温下搅拌和吹打沉淀，避免泡沫生成。
2. 10000g ，4 oC，离心 30 min，收集上清液。
3. 将 Ni-NTAAgarose 充填柱子，并连接于 Pharmarcia 低压液相层析系统，用 5 倍柱体积的裂解液 2 平衡 Ni-NTAAgarose，调节 A280 值至零线。
4. 将适量上清液上样到 Ni-NTAAgarose 柱子中， 并用 lysis buffer 冲洗至 A280 值低于 0.01。
5. 分别用 5 ～ 10 倍柱体积的清洗液 1 和清洗液 2（Washbuffer 1 and 2）清洗柱 子，直至 A280 值低于 0.01。
6. 用洗脱液（Elution buffer）洗脱重组蛋白质， 在 A280 值监测下，收集出现峰 线后含有重组蛋白的所有洗脱液。