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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 品系:
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- 细胞类型:
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- 肿瘤类型:
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- 供应商:
武汉华尔纳生物科技有限公司
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- 运输方式:
快递
- 器官来源:
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- 细胞形态:
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- 相关疾病:
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- 组织来源:
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- 英文名:
人视网膜微血管内皮细胞
细胞代次低,活性高,品质保证,提供全程7*24小时专业技术指导售后服务 (养不活无理由全额退款)

- 组织来源:
眼组织
- 细胞形态:
呈鹅卵石样,不规则细胞
- 种属来源:
人
- 规格:
5×10⁵Cells/T25培养瓶
- 传代特性:
细胞特性确定传代
- 产品名称:
人视网膜微血管内皮细胞
| 一、细胞基本属性 | |
| 细胞名称 | 人视网膜微血管内皮细胞 |
| 组织来源 | 眼组织 |
| 商品货号 | ORCH413 |
| 种属来源 | 人 |
| 产品规格 | 5×105cells/T25细胞培养瓶 |
|
细胞简介
|
糖尿病性视网膜病变、年龄相关性黄斑变性等视网膜疾病均与视网膜血管病理性 改变密切相关。随着对视网膜血管性疾病的研究深入,发现视网膜血管内皮细胞 是该病变的关键细胞。通过体外分离培养原代视网膜微血管内皮细胞获得大量纯 度高的内皮细胞,可为视网膜血管性疾病研究提供可靠的体外模型。 |
| 培养基 | 原代内皮细胞培养体系 |
| 换液频率 | 每2-3天换液一次 |
| 生长特性 | 贴壁培养 |
| 细胞形态 | 呈鹅卵石样,不规则细胞 |
| 传代特性 | 细胞特性确定传代 |
| 消化液 | 0.25%胰蛋白酶 |
| 培养条件 | 气相: 空气,95%;CO2 ,5% |
二、细胞培养状态
发货时发送细胞电子版照片
三、使用方法
在技术部标准操作流程下,建议您收到细胞后尽快进行相关实验。
客户收到细胞后,请按照以下方法进行操作。
1. 取出T25细胞培养瓶,用75%酒精消毒瓶身,拆下封口膜,放入37℃、5%CO2、饱和湿度的细胞培养箱中静置3-4h,以稳定细胞状态。
2. 贴壁细胞消化
1)吸出T25细胞培养瓶中的培养基,用PBS清洗细胞一次;
2)添加0.25%胰蛋白酶消化液1mL至T25培养瓶中,轻微转动培养瓶至消化液覆盖整个培养瓶底后,吸出多余胰蛋白酶消化液,37℃温浴1-3min;倒置显微镜下观察,待细胞回缩变圆后,再加入5ml完全培养基终止消化;
3)用吸管轻轻吹打混匀,按传代比例接种T25培养瓶传代,然后补充新鲜的完全培养基至5mL,置于37℃、5%CO2、饱和湿度的细胞培养箱中静置培养;
4)待细胞完全贴壁后,培养观察;之后按照换液频率更换新鲜的完全培养基。
3. 悬浮细胞处理
1)收集T25细胞培养瓶中的培养基至50ml离心管中,用PBS清洗细胞培养瓶1-2次,收集清洗液;
2)1200-1500rpm离心3min,弃上清,收集细胞沉淀;
3)加入5ml新鲜完全培养基,用吸管轻轻吹打混匀、分散细胞;将分散好的细胞调整合适密度接种至培养器皿中,置于37°C、5%CO2、饱和湿度的细胞培养箱中静置培养;
4)若遇到悬浮细胞团块较大,无法机械吹散时,向步骤2)中细胞沉淀添加0.25%胰蛋白酶消化液2mL至离心管中,用吸-管轻轻吹打混匀,37°C温浴2-3min,消化结束后,加入胰酶抑制剂(或血清)终止消化,用吸管轻轻吹打,分散细胞;1200rpm离心5min,弃上清,收集细胞沉淀;
5)加入5ml新鲜完全培养基,用吸管轻轻吹打混匀;按传代比例进行接种传代,然后补充新鲜的完全培养基至5mL,置于37°C、5%CO2、饱和湿度的细胞培养箱中静置培养;
6)待细胞状态稳定后,培养观察;之后按照换液频率更换新鲜的完全培养基。
4. 细胞收货脱落
1)收集所有细胞悬液,1000rpm,离心5min,保留沉淀;
2)添加0.25%胰蛋白酶消化液0.5mL至离心管中,重悬沉淀,放置于37℃消化3min(或4℃冰箱静置5-7min);消化完向离心管内加入5ml完全培养基终止消化;
3)经1000rpm,离心5min,丢弃上清,用5ml完全培养基(补加1%FBS,促进贴壁)重悬沉淀,接种于新的培养瓶内;
4)待细胞完全贴壁后,培养观察;之后按照换液频率更换新鲜的完全培养基(37℃预热)。
5. 细胞实验
因原代细胞贴壁特殊性,贴壁的原代细胞在消化后转移至其他实验器皿(如玻璃爬片、培养板、共聚焦培养皿等)时,需要对实验器皿进行包被,以增强细胞贴壁性,避免细胞因没贴好影响实验;包被条件常选用鼠尾胶原Ⅰ(2-5μg/cm2) ,多聚赖氨酸PLL(0.1mg/ml),明胶(0.1%),依据细胞种类而定。悬浮/半悬浮细胞无需包被。
四、注意事项
1. 培养基于4℃条件下可保存3-6个月。
2. 在细胞培养过程中,请注意保持无菌操作。
3. 传代培养过程中,胰酶消化时间不宜过长,否则会影响细胞贴壁及其生长状态。
4. 建议客户收到细胞后前3天每个倍数各拍几张细胞照片,记录细胞状态,便于和技术部沟通;由于运输的原因,个别敏感细胞会出现不稳定的情况,请及时和我们联系,详尽告知细胞的具体情况,以便我们的技术人员跟踪、回访直至问题得到解决。
5. 该细胞只可用于科研。
1)本产品未通过直接用于活体动物和人的审核
2)本产品未通过用于活体诊断的审核






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文献和实验的培养要点根据微血管内皮细胞的生长特性,需要采用一些特殊的培养条件,并且这些培养条件可能因为微血管内皮细胞的起源不同而有所差异。微血管内皮细胞的培养一般选用基础培养基、胎牛血清、双抗、谷氨酰氨、内皮细胞生长因子。 6、PriCells的产品(1) 原代微血管内皮细胞, 5×105 细胞数/1ml(2) 原代细胞分离试剂盒(3) 原代细胞分离鉴定盒(4) 原代内皮细胞特制基础培养基(5) 原代内皮细胞培养特制添加剂
摘要: 目的 探讨脑微血管内皮细胞的体外培养方法并进行细胞超微结构研究及组织型纤溶酶原激活物(TPA ) 活性测定。 方法 取新生小鼠脑组织, 通过匀浆、过筛、胶原酶消化、差速粘附等技术对鼠脑微血管内皮细胞进行原代培养, 待细胞铺满瓶底时, 用01125%胰酶20102%EDTA 消化, 离心收集内皮细胞, 进行传代培养。原代、传代各取8 例, 吸取培养液用酶联免疫吸附试验测试TPA 活性。 结果 经Ð 因子相关抗原免疫组织化学鉴定、细胞超微结构观察, 证明培养的是血管内皮细胞。培养
抗人CD105单克隆抗体(NeoMarkers),兔抗人CD34、CD31多克隆抗体(Antibody Diagnostica Inc),兔抗人vW因子多克隆抗体(华美公司),抗兔及抗鼠ABC试剂盒、DAB显色试剂盒为华美公司产品,其他试剂均为国产分析纯以上级别。 3、方法: 植块法原代细胞培养: 细胞培养瓶的处理:选用50ml玻璃培养瓶,高压蒸汽灭菌,瓶底铺自制鼠尾胶(制作方法参见2),移入80℃烤箱烤干,临用前用消毒D-Hanks平衡盐缓冲液冲洗3次






