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人牙髓干细胞 原代细胞 (带荧光鉴定)

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  • ¥2090 - 5290
  • 华尔纳生物
  • N-43659
  • 武汉
  • 2025年07月15日
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    • 英文名

      人牙髓干细胞

    人牙髓干细胞/人牙髓干细胞/人牙髓干细胞
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    细胞蓝色图

    • 产品名称:

      人牙髓干细胞

    • 细胞形态:

      成纤维样细胞

    • 组织来源:

      牙组织

    • 种属来源:

    • 规格:

      5×10⁵Cells/T25培养瓶

    • 传代特性:

      细胞特性确定传代


    人牙髓干细胞
    一、细胞基本属性
    细胞名称 人牙髓干细胞
    组织来源 牙组织
    商品货号 ORCH430
    种属来源
    产品规格 5×105cells/T25细胞培养瓶
     
     
     
    细胞简介
    干细胞是一类具有自我更新和分化潜能的细胞,它包括胚胎干细胞和成体干细胞 。目前已经成功分离培养包括来自骨髓、肌肉、神经、上皮等组织的成体干细胞 。牙髓干细胞是位于牙髓组织的一种成体干细胞。  2000年,  Gornhtos等首先成 功地分离培养出人牙髓干细胞,  为干细胞的研究开辟了一个新的领域。牙髓干细 胞具有同其他成体干细胞相似的生物学特性,具有较强的克隆形成能力,  可以分化 为牙髓组织中的终末功能细胞并具有一定的横向分化能力。
    培养基 原代间充质干细胞培养体系
    换液频率 每2-3天换液一次
    生长特性 贴壁培养
    细胞形态 成纤维样细胞
    传代特性 细胞特性确定传代
    消化液 0.25%胰蛋白酶
    培养条件 气相:  空气,95%;CO2 ,5%
    质量检测:实验室分离的人牙髓干细胞经STRO-1免疫荧光染色为阳性,纯度可达90%以上, 且不含有HIV-1、  HBV、  HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
    人牙髓干细胞体外培养周期有限;建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养,以此保证该细胞的最佳培养状态。   
    二、细胞培养状态
    发货时发送细胞电子版照片
    三、使用方法 
    在技术部标准操作流程下,建议您收到细胞后尽快进行相关实验。
    客户收到细胞后,请按照以下方法进行操作。
    1. 取出T25细胞培养瓶,用75%酒精消毒瓶身,拆下封口膜,放入37℃、5%CO2、饱和湿度的细胞培养箱中静置3-4h,以稳定细胞状态。
    2. 贴壁细胞消化
    1)吸出T25细胞培养瓶中的培养基,用PBS清洗细胞一次;
    2)添加0.25%胰蛋白酶消化液1mL至T25培养瓶中,轻微转动培养瓶至消化液覆盖整个培养瓶底后,吸出多余胰蛋白酶消化液,37℃温浴1-3min;倒置显微镜下观察,待细胞回缩变圆后,再加入5ml完全培养基终止消化;
    3)用吸管轻轻吹打混匀,按传代比例接种T25培养瓶传代,然后补充新鲜的完全培养基至5mL,置于37℃、5%CO2、饱和湿度的细胞培养箱中静置培养;
    4)待细胞完全贴壁后,培养观察;之后按照换液频率更换新鲜的完全培养基。
    3. 悬浮细胞处理
    1)收集T25细胞培养瓶中的培养基至50ml离心管中,用PBS清洗细胞培养瓶1-2次,收集清洗液;
    2)1200-1500rpm离心3min,弃上清,收集细胞沉淀;
    3)加入5ml新鲜完全培养基,用吸管轻轻吹打混匀、分散细胞;将分散好的细胞调整合适密度接种至培养器皿中,置于37°C、5%CO2、饱和湿度的细胞培养箱中静置培养;
    4)若遇到悬浮细胞团块较大,无法机械吹散时,向步骤2)中细胞沉淀添加0.25%胰蛋白酶消化液2mL至离心管中,用吸-管轻轻吹打混匀,37°C温浴2-3min,消化结束后,加入胰酶抑制剂(或血清)终止消化,用吸管轻轻吹打,分散细胞;1200rpm离心5min,弃上清,收集细胞沉淀;
    5)加入5ml新鲜完全培养基,用吸管轻轻吹打混匀;按传代比例进行接种传代,然后补充新鲜的完全培养基至5mL,置于37°C、5%CO2、饱和湿度的细胞培养箱中静置培养;
    6)待细胞状态稳定后,培养观察;之后按照换液频率更换新鲜的完全培养基。   
    4. 细胞收货脱落
    1)收集所有细胞悬液,1000rpm,离心5min,保留沉淀;
    2)添加0.25%胰蛋白酶消化液0.5mL至离心管中,重悬沉淀,放置于37℃消化3min(或4℃冰箱静置5-7min);消化完向离心管内加入5ml完全培养基终止消化;
    3)经1000rpm,离心5min,丢弃上清,用5ml完全培养基(补加1%FBS,促进贴壁)重悬沉淀,接种于新的培养瓶内;
    4)待细胞完全贴壁后,培养观察;之后按照换液频率更换新鲜的完全培养基(37℃预热)。
    5. 细胞实验
    因原代细胞贴壁特殊性,贴壁的原代细胞在消化后转移至其他实验器皿(如玻璃爬片、培养板、共聚焦培养皿等)时,需要对实验器皿进行包被,以增强细胞贴壁性,避免细胞因没贴好影响实验;包被条件常选用鼠尾胶原Ⅰ(2-5μg/cm2) ,多聚赖氨酸PLL(0.1mg/ml),明胶(0.1%),依据细胞种类而定。悬浮/半悬浮细胞无需包被。       
    四、注意事项
    1. 培养基于4℃条件下可保存3-6个月。
    2. 在细胞培养过程中,请注意保持无菌操作。
    3. 传代培养过程中,胰酶消化时间不宜过长,否则会影响细胞贴壁及其生长状态。
    4. 建议客户收到细胞后前3天每个倍数各拍几张细胞照片,记录细胞状态,便于和技术部沟通;由于运输的原因,个别敏感细胞会出现不稳定的情况,请及时和我们联系,详尽告知细胞的具体情况,以便我们的技术人员跟踪、回访直至问题得到解决。 
    5. 该细胞只可用于科研。 
    1)本产品未通过直接用于活体动物和人的审核  
    2)本产品未通过用于活体诊断的审核  
    备注:由于实验所用试剂、操作环境及操作手法的不同,以上方法仅供各实验室参考

    注意事项

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