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人羊膜间充质干细胞 原代细胞 （带荧光鉴定）

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  • ￥2090 - 5290
  • 华尔纳生物
  • N-40252
  • 武汉
  • 2025年07月11日
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    • 英文名：

      人羊膜间充质干细胞

    人羊膜间充质干细胞/人羊膜间充质干细胞/人羊膜间充质干细胞
    细胞代次低，活性高，品质保证，提供全程7*24小时专业技术指导售后服务   （养不活无理由全额退款）

    细胞蓝色图

    • 产品名称：

      人羊膜间充质干细胞

    • 组织来源：

      羊膜组织

    • 细胞形态：

      成纤维细胞样

    • 种属来源：

      人

    • 规格：

      5×10⁵Cells/T25培养瓶

    • 传代特性：

      可传3-5代左右；3代以内状态最佳


    人羊膜间充质干细胞
    一、细胞基本属性
    细胞名称
    人羊膜间充质干细胞
    组织来源
    羊膜组织
    商品货号
    ORCH310
    种属来源
    人
    产品规格
    5×105cells/T25细胞培养瓶
    细胞简介
    人羊膜间充质干细胞分离自胎盘羊膜组织；胎盘(placenta)是哺乳动物妊娠期间由胚胎的胚膜和母体子宫内膜联合长成的母子间交换物质的过渡性器官，由羊膜、叶状绒毛膜和底蜕膜构成。胎儿在子宫中发育，依靠胎盘从母体取得营养，而双方保持相当的独立性。胎盘还产生多种维持妊娠的激素，是一个重要的内分泌器官。有些爬行类和鱼类也以胎生方式繁殖后代，胚胎生长出一些辅助结构如卵黄囊、鳃丝等与母体组织紧密结合，以达到母子间物质的交换，这样的结构称假胎盘。羊膜是胎盘的最内层，与眼结膜组织结构相似，含有眼表上皮细胞，包括结膜细胞和角膜上皮细胞生长所需要的物质，其光滑，无血管、神经及淋巴，具有一定的弹性；在电镜下，其分为五层：上皮层、基底膜、致密层、纤维母细胞层和海绵层，羊膜基底膜和羊膜羊膜基质层含有大量不同的胶元，主要为Ⅰ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ、Ⅶ型胶原和纤维粘连蛋白、层粘连蛋白等成份。羊膜细胞主要由羊膜上皮细胞和羊膜间充质细胞组成，均具有多分化潜能，可转化为神经元，且还有合成、释放生物活性物质和神经营养因子的功能。
    培养基
    含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等
    包被条件
     
    换液频率
    每2-3天换液一次
    生长特性
    贴壁
    细胞形态
    成纤维细胞样
    传代特性
    可传3-5代左右；3代以内状态最佳
    消化液
    0.25%胰蛋白酶
    培养条件
    气相：空气，95%；CO2，5%
     
    方法简介：实验室分离的人羊膜间充质干细胞采用胰蛋白酶 - 胶原酶混合酶消化后差速贴壁制备而来，细胞总量约为5×10⁵cells/瓶。
    质量检测：实验室分离的人羊膜间充质干细胞经CD44免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
    人羊膜间充质干细胞体外培养周期有限；建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养，以此保证该细胞的最佳培养状态。
     
    二、细胞培养状态
    发货时发送细胞电子版照片
    三、使用方法
    人羊膜间充质干细胞是一种贴壁细胞，细胞形态呈成纤维细胞样，在技术部标准操作流程下，细胞可传3-5代左右；建议您收到细胞后尽快进行相关实验。
    客户收到细胞后，请按照以下方法进行操作。
    1. 取出T25细胞培养瓶，用75%酒精消毒瓶身，拆下封口膜，放入37℃、5%CO2、饱和湿度的细胞培养箱中静置3-4h，以稳定细胞状态。
    2. 贴壁细胞消化
    1)吸出T25细胞培养瓶中的培养基，用PBS清洗细胞一次；
    2)添加0.25%胰蛋白酶消化液1mL至T25培养瓶中，轻微转动培养瓶至消化液覆盖整个培养瓶底后，吸出多余胰蛋白酶消化液，37℃温浴1-3min；倒置显微镜下观察，待细胞回缩变圆后，再加入5ml完全培养基终止消化；
    3)用吸管轻轻吹打混匀，按传代比例接种T25培养瓶传代，然后补充新鲜的完全培养基至5mL，置于37℃、5%CO2、饱和湿度的细胞培养箱中静置培养；
    4)待细胞完全贴壁后，培养观察；之后按照换液频率更换新鲜的完全培养基。          
    3. 细胞收货脱落
    1)收集所有细胞悬液，1000rpm，离心5min，保留沉淀；
    2)添加0.25%胰蛋白酶消化液0.5mL至离心管中，重悬沉淀，放置于37℃消化3min(或4℃冰箱静置5-7min)；消化完向离心管内加入5ml完全培养基终止消化；
    3)经1000rpm，离心5min，丢弃上清，用5ml完全培养基(补加1%FBS，促进贴壁)重悬沉淀，接种于新的培养瓶内；
    4)待细胞完全贴壁后，培养观察；之后按照换液频率更换新鲜的完全培养基(37℃预热)。
    4. 细胞实验
    因原代细胞贴壁特殊性，贴壁的原代细胞在消化后转移至其他实验器皿（如玻璃爬片、培养板、共聚焦培养皿等）时，需要对实验器皿进行包被，以增强细胞贴壁性，避免细胞因没贴好影响实验；包被条件常选用鼠尾胶原Ⅰ（2-5μg/cm2） ，多聚赖氨酸PLL（0.1mg/ml），明胶（0.1%），依据细胞种类而定。悬浮/半悬浮细胞无需包被。   
          
    四、注意事项
    1. 培养基于4℃条件下可保存3-6个月。
    2. 在细胞培养过程中，请注意保持无菌操作。
    3. 传代培养过程中，胰酶消化时间不宜过长，否则会影响细胞贴壁及其生长状态。
    4. 建议客户收到细胞后前3天每个倍数各拍几张细胞照片，记录细胞状态，便于和技
    术部沟通；由于运输的原因，个别敏感细胞会出现不稳定的情况，请及时和我们联系，详尽告知细胞的具体情况，以便我们的技术人员跟踪、回访直至问题得到解决。
    5. 该细胞只可用于科研。
    1)本产品未通过直接用于活体动物和人的审核
    2)本产品未通过用于活体诊断的审核
     
    备注：由于实验所用试剂、操作环境及操作手法的不同，以上方法仅供各实验室参考

    注意事项

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      PromoCell MSC分化培养操作步骤 一、向神经细胞分化的操作流程 1、将塑料培养器用纤维连接蛋白包被根据操作手册，用纤维连接蛋白（C-43050）包被合适的组织培养瓶。使用浓度为10μg/ml。2、接种间充质干细胞用MSC生长培养基（C-28010）在用纤维连接蛋白包被过的培养瓶中接种培养，接种密度为4000个/cm2。3、培养间充质干细胞将细胞培养至80%的饱和度，每48小时更换一次培养基。4、诱导间充质干细胞用MSCU经细胞分化培养基（C-28015）诱导培养，用MSC

    • PriCells: 正常人羊膜细胞（HAM）原代细胞培养

      实验材料：1. 人胎盘；2. PBSA/GASP：含抗生素的PBSA（庆大霉素，50μg/ml；两性霉素B，1.25μg/ml；链霉素100μg/ml；青霉素100U/ml）；3. 丙三醇；4. 含50%丙三醇的DMEM；5. 胰蛋白酶/EDTA；6. Millicell微孔膜组织培养插片；7. 塑料刮片和无菌棉拭子；实验方法：1. 用PBSA/GASP清洗组织；2. 分离人羊膜，用戴手套的手从胎盘上将羊膜钝性分离下来，分离出的羊膜薄层包括上皮细胞，基底膜和一些基质组织；3. 用无菌棉拭子除去

    • 原代细胞的取材

      组织在含高浓度抗菌素（400单位/mL）甚至加入适量的两性霉素B或10%达克宁液的培养液内于4℃下存放2小时以上，再用PBS洗2~3次，以确保所取材料无菌。要用无菌包装的器皿或事先消毒好的带少许培养液（内含400单位/mL抗菌素）的小瓶等便于携带的物品来取材，所取材料应避免接触有毒有害的化学物质，如碘、汞等。（3）取材和原代细胞制作时，要用锋利的器械，如手术刀或剃须刀片切碎组织，尽可能减少对细胞的机械损伤。（4）要仔细去除所取材料上的血液（血块）、脂肪、坏死组织及结缔组织，切碎组织时应避免组织干燥

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    476 人阅读发布时间：2023-02-14 12:58

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