相关产品推荐更多 >
万千商家帮你免费找货
0 人在求购买到急需产品
- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
大量
- 供应商:
贝博
- 保存条件:
2-8℃
- 规格:
200T
贝博® BBoxiProbe® 线粒体氧气消耗检测试剂盒(Mitochondrial Oxygen Consumption Rate Assay Kit)是利用贝博® 合成的特异性氧气荧光探针BBoxiProbe® R02来检测分离线粒体耗氧情况变化的试剂盒。可以通过简单的混合基于荧光酶标仪便捷的直接进行耗氧量测定。 耗氧量分析是研究代谢的有用工具。耗氧量测量结果是细胞代谢功能,更具体而言是线粒体功能的关键性指示。通过这类指标来探究活细胞代谢,可为细胞功能以及代谢变化在疾病进展中的作用提供深入洞察。 线粒体功能对细胞代谢、存活和能量产生至关重要。线粒体呼吸受损与病理状态(如癌症、缺血性再灌注损伤和神经退行性疾病)有关。线粒体毒性也是安全相关的抗药性和药物戒断症状的常见原因。 BBoxiProbe® R02耗氧量分析可以实时测量分离线粒体的耗氧量,是以高通量形式来评估用于代谢表征的细胞线粒体呼吸以及评估治疗对线粒体功能毒性作用的一种可靠方法。 它可以使用荧光酶标仪在标准微孔板上进行有氧代谢的简单动力学测定。随着呼吸作用的进行,溶解氧被消耗,样品中的氧气浓度降低,导致 BBoxiProbe® R02 分析的信号增加,从而实现对耗氧量的测定。 BBoxiProbe® R02是氧气敏感的荧光探针,最大激发波长为 468nm,最大发射波长为 603nm。其荧光通过分子碰撞与氧气反应,由O2淬灭,在无氧条件下荧光强度更高,反之有氧条件下荧光强度变低,因此荧光信号的量与样品中线粒体外O2的量成反比,从而BBoxiProbe® R02可被用于监测线粒体氧气消耗的变化。在测定中,耗氧率由荧光信号随时间的变化计算。线粒体耗氧量增加,荧光信号的变化率增加;反之,耗氧量减少,荧光信号的变化率降低。 BBoxiProbe® R02与O2的这种反应是非破坏性且完全可逆的,BBoxiProbe® R02对线粒体没有毒性,其是化学稳定的,惰性的,水溶性的和不渗透的,不能透过完整的线粒体膜。因此还可以同时与糖酵解, 线粒体膜电位JC-1, ROS和ATP等检测的试剂结合使用,进行多参数检测。 用BBoxiProbe® R02进行线粒体耗氧检测方法及其简单,不需要适用特殊的仪器设备,只需要荧光酶标仪之类的荧光读板设备即可。 BBoxiProbe® R02采用可见光激发检测,相对于采用紫外光激发的检测试剂,损伤更低,对线粒体的毒害更小。结果更加准确客观。 贝博® BBoxiProbe® 线粒体氧气消耗检测试剂盒可以用于直接,实时分析线粒体呼吸和线粒体功能。本试剂盒可以用来测量各种分离的线粒体,分离的酶,细菌,酵母和霉菌等的胞外耗氧情况测量。 以96孔细胞培养板计,本试剂盒小包装可以检测200个样本。 贝博® BBcellProbe® 可以提供细胞凋亡、增殖、毒性、活性氧、细胞代谢、氧化应激、细胞膜流动性、膜通透性转换孔、细胞耗氧率、细胞内pH、细胞粘附、细胞自噬等数百种检测试剂盒产品。 贝博® BBcellProbe® 可以为您提供各种颜色的BBcellProbe® M系列、N系列、L系列、E系列、G系列等细胞膜、细胞质、细胞核、溶酶体、线粒体、内质网、高尔基体、骨架、微管等细胞、细胞亚结构荧光染色试剂盒产品,以及钙离子、钠离子、氩离子等各种荧光染色试剂盒产品。 贝博® BBcellProbe® 可以提供动物、植物、微生物、酵母、水产、家禽、兽类、土壤等样本的各种生化指标检测的数百种试剂盒产品。
风险提示:丁香通仅作为第三方平台,为商家信息发布提供平台空间。用户咨询产品时请注意保护个人信息及财产安全,合理判断,谨慎选购商品,商家和用户对交易行为负责。对于医疗器械类产品,请先查证核实企业经营资质和医疗器械产品注册证情况。
文献和实验关于仪器设置:
温度对检测有较大影响。有条件的话,务必使用配有温度控制的酶标仪。
常规的荧光信号强度测量,使用基于单色仪或基于过滤器的酶标仪,最佳激发波长使用450-460nm,发射波长使用586-600nm。可根据实际机器和样本选择信号最强的波长。
具有检测增益参数(PMT,Parameters)的通常设置为中或高。
TR-F测量可减少非特异性背景和增加探针灵敏度。 最佳delay time为约30μs,gate (integration)time是100μs。
一般使用底部读数bottom read。
关于氧气封闭液使用:
氧气封闭液可以用移液器吸取添加,添加时需要沿着培养板壁慢慢加入,使其顺板壁向下流到培养基表面。
也可以直接用滴瓶滴加,倒转预热的滴管瓶并轻轻施加压力,使封闭液足以充注瓶尖。 每个孔滴两滴,使每个液滴在孔侧面顺应向下流到培养基表面。
使用移液器添加封闭液时,可将黄色吸头的嘴部用锋利的刀片或剪刀修剪处理。将竖直吸头离尖端3-4mm处45°角修剪处理。
取下滴管瓶内嘴盖,轻轻吸取预热的氧气封闭液。避免上下吹吸形成气泡。
关于线粒体接种密度:
注意所需的线粒体接种密度取决于细胞类型和获得线粒体的方法。 我们推荐进行线粒体接种密度预实验以确定最佳密度。通常从高线粒体密度(通常为80,000个细胞的线粒体,线粒体提取得率>80%)开始,每孔的最佳线粒体数一般为:每孔提取80,000个细胞的线粒体(96孔板)。
检测待测样品都设置3复孔。
注意始终在每个96孔板上留出至少6个孔,以免添加线粒体作为空白对照和信号控制孔。
关于对照孔设置:
一般空白孔要设置,其它对照根据实验需要决定。
(推荐对照设置,以下可选,非必须):
操作步骤:
1. 准备线粒体模型。
2. 提取待检测线粒体,用PBS洗涤线粒体。
3. 加入100ul 线粒体HBSS悬液。
。
4. 加入10ul BBoxiProbe® R02氧荧光探针,充分混匀。
5. (选做)可以在此处添加待测试化合物(通常为1-10μL)(如果需要的话)。
6. 每孔加入100ul氧气封闭液。
7. 然后用该96孔板进行荧光线粒体外O2消耗变化情况检测。
激发波长468nm,发射波长603nm。每2分钟或3分钟读取一次。
8. 绘制耗氧率曲线。
9. 计算每个样品的斜率值
检查线粒体接种和移液的一致性。
增加线粒体密度。
将测定体积减少到60微升。
在某些较短的检测时间区间内,会出现荧光数据的波动情况,出现斜率下降或不变化,需要扩大到更长的时间范围内来分析耗氧率趋势。一般检测时间范围不少于30分钟。
温度对检测有较大影响。有条件的话,务必使用配有温度控制的酶标仪,仪器以及所有培养基和储备溶液均须使用前37℃预热。注意某些读板器的温度控制不一致,如果存在这种情况,请考虑将测定和平衡温度降低到30℃,避开外圈。
2.使用的线粒体类型灵敏度不够?
可以考虑以下改善方案:
增加酶标仪的增益(PMT)设置。
在无酚红或无血清的情况下测定。
增加BBoxiProbe® R02氧荧光探针的体积(15μL/孔)。
增加线粒体密度。
将测定体积减少到60微升。
测量底部读数(如果有)。
调整TR-F焦距。
Cell Metab:减肥的另外一种方式,限制脂肪细胞中的这种微量元素
) 则始终表达低水平的 Tfrc。不同脂肪组织中 Tfrc 的这种表达模式与其预测的铁需求是密切相关的,因为 BAT 具有强大的生热潜能,其线粒体含量比 WAT 高得多。 图片来源:Cell Metabolism 为了进一步研究铁在脂肪组织中的作用,他们通过杂交产生了脂肪细胞中缺乏 Tfrc 的小鼠 (TfrcAKO)。由于缺铁,TfrcAKO 小鼠脂肪组织中线粒体水平和耗氧率 (OCR) 均低于对照组。值得注意的是,BAT 在 TfrcAKO 小鼠中逐渐变白,几乎消失,iWAT 显示了类似的趋势
工具,比如 IDM, FDM,或者迅雷,如果你有 VIP 的话,这里不做详细介绍,大家自行百度。CopyfishCopyfish 是一款 Chrome 应用,支持对网页进行 OCR 扫描,识别文字,并且可以自动翻译,支持中文。笔者此前也介绍过 OCR 软件,但是感觉不如 Copyfish 来得高级,接下来就要给大家演示一波这个插件有多厉害~首先打开一个网页,然后点击 Chrome 扩展栏的 Copyfish 按钮后,就会出现类似截图的箭头,然后选择要扫描的区域,就能 OCR 识别了。然后就可以得到 OCR 识别
某天,Boss 说:某某,把这份文件打成 Word。然后,有的同学可能会拿起纸质稿打开 Word 开始「啪啪」打字...... 那么,是否有更快捷的方法呢?答案是有的。这时候,我们需要利用 OCR(光学字符识别),具体的方法有很多,此处介绍三种。 假设我们需要将以下图片转成文字: 然后,我们逐一介绍这三种方法: 1、Office 工具 对于安装了 Office 2003 的同学们,可以使用其中的 Microsoft Office Document Imaging












