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- 大小鼠 Langendorff 离体心脏灌流心肌细胞分离
- 全国
- 2025年07月16日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 提供商：
佰诺仕（广州）生命科技有限公司
- 服务名称：
技术服务/技术培训
- 规格：
次
培训内容：
1.麻醉并处死动物：通常使用麻醉剂，确保无痛操作。
2.心脏摘除：迅速开胸，暴露心脏，并切断主动脉，保留肺循环血液以减少心脏损伤。
3.Langendorff装置连接：将心脏的主动脉口插入Langendorff灌流系统的 cannula（灌注针），并用固定线绑紧，随后灌注冷的Krebs-Henseleit缓冲液（KB液）或Tyrode's溶液，去除血液，随后转为37°C的氧合灌注液，维持心脏活性。
4.灌流过程：可以进行恒压或恒流灌流，模拟不同的生理或病理条件。
5.记录数据：通过压力换能器、电生理记录系统等设备监测心脏功能参数。
6.获取单心肌细胞：对心脏进行酶消化处理，用于获取单个心肌细胞，用于细胞水平的研究，比如细胞培养、电生理特性分析、钙信号传导研究等。分离过程涉及心脏的切片、用胰蛋白酶或胶原酶消化心肌组织，以及经过离心、过滤等步骤来纯化心肌细胞。
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文献和实验为了克服ChIP-Seq的缺陷，近岸蛋白质开发了ChiTag酶和CUT&Tag技术。CUT&Tag是一种革命性的新技术，它不需要甲醛交联和免疫共沉淀，即可特异性的将目的蛋白附近的DNA片段直接连上接头并打断，进行高通量测序。该方法可一管式高通量应用，或在单细胞研究中使用。该方法使用了ChiTag酶，可以在打断基因组的同时加上接头，不需要繁琐的补平加A加接头，并且可在一天内完成从细胞到测序文库制备全流程。
细胞等），由于肝脏组织细胞连接复杂，实质细胞体积大且脆弱，通常需要采用灌流的方式得到肝实质细胞。灌流能通过血管灌注使胶原酶直接作用于血窦网络，相比于普通机械剪切消化来说更能避免损伤从而更温和更有效地释放肝实质细胞，维持好的细胞状态以进行下游实验。简单来说灌流法是获取高纯度、高活性肝实质细胞的金标准方法。 但是手动灌流操作难度较大，整个过程比较复杂耗时，操作人员需要经过培训练习并积累长期经验。对于时间和人员问题，可以考虑自动化灌流，批次间结果稳定且不需要专门的技术训练，如肝脏灌流试剂盒（Liver
【分享】TIANGEN 2009全国巡回荧光定量培训班－厦门大学专场
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