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48
- 英文名:
SR/-Trp Broth(with Raf)
- 供应商:
上海联祖
- 规格:
10×0.5L
英文名称:SR/-Trp Broth(with Raf)
产品规格:10×0.5L
发货周期:1~3天
产品价格:询价
| 货号 | 规格 | 发货期 | 用途 |
| LZ-PYJ5387 | 10×0.5L | 1~3天 | 仅供科研实验 |
产品比较:
与常规的SD/-Trp Broth相比,SS/-Trp Broth(含蔗糖)、SR/-Trp Broth(含棉子糖)和SG/-Trp Broth(含半乳糖)只变换了碳源,可根据实验需要进行选择。
产品简介:
例如SD/-Trp Broth即Minimal SD Base混合了DO Supplement- Trp。用做筛选培养基,用于选择培养含有特异载体的酵母或进行杂交筛选。又如,SD/-Leu Broth,SD/-Trp Broth分别用于筛选bait和prey载体(bait和prey载体带有合成色氨酸和亮氨酸的基因)。携带这两个载体的酵母细胞可以在双缺筛选培养基SD/-Leu/-Trp生长,而不含有这两个基因的亲代酵母菌株(如Y2H Gold)不能生长。
使用方法:
1.取一包产品,加入去离子水中定容至500mL,搅拌溶解。
2.无需调整ph值,121℃高压灭菌15分钟。
3.4℃冰箱避光储存已经灭菌的液体培养基。
培养基的计数方法:
一、稀释涂布平板法(亦称活菌计数法)是一种常用的微生物计数方法,其原理是当样品的稀释度足够高时,培养基表面生长的一个菌落来源于样品稀释液中的一个活菌。通过统计平板上的菌落数,可以推测出样品中大约含有多少活菌。这种方法操作简便,适用于菌体大小和质量都相近的类群,如细菌、酵母菌等的计数。计算公式为每克样品中的菌株数=C/V*M,其中C代表某一稀释度下平板上生长的平均菌落数,V代表涂布平板时所用的稀释液的体积(mL),M代表稀释倍数。
二、显微镜直接计数法利用特定细菌计数板或血细胞计数板,在显微镜下计算一定容积的样品中微生物数量。这种方法不能区分死菌与活菌,但可以估算出1mL培养中液中细胞个数,计算公式为1mL 培养中液中细胞个数=小方格中细胞平均数×400 ×104×稀释倍数(个/mL)。显微镜直接计数法的缺点是不能区分死菌与活菌,因此计数到的细胞数包括了死亡的细胞数。
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培养基操作步骤:
一、用法:称取本品33.0g,加热溶解于1000ml蒸馏水中,分装三角瓶,121℃高压灭菌15分钟,备用。
二、配料:首先,根据培养基的配方,准确称量各种成分,包括粉状和非粉状的成分,如肉膏等,放入烧杯中。
三、溶化:向烧杯中加入适量的水,然后搅拌以溶解各成分。对于含有琼脂的培养基,应注意防止外溢,并在溶化过程中保持搅拌。
四、矫正pH:在培养基溶解均匀并冷却至室温后,使用pH试纸测量pH值,然后根据需要加入酸或碱来调整至合适的pH值。
五、澄清过滤:使用滤纸或多层纱布对培养基进行过滤,以去除杂质。
六、分装:将制备好的培养基分装入试管内或三角瓶内,确保管(瓶)口塞上棉塞,以防止外界微生物污染。
七、灭菌:对分装好的培养基进行灭菌处理,通常是通过高压灭菌来确保无菌环境。
八、检定:灭菌后的培养基可以进行质量检定,以确保其符合使用要求。
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文献和实验for 14 days at 37°C. 11. Between 3 and 7 days and 10 and 14 days incubation, subculture 0.1 ml of test broth ontoan agar plate and incubate plate anaerobically as above. 12. Observe agar plates after 14 days incubation at x300 magnification using
4 7.4 g/L NaH2PO4 Selective scFv (or Fab or ligand) Induction Media 抗体scFv (or Fab or 配体)的选择诱导培养基 2x (SG-CAA) 10 g/L酪蛋白水解物casamino acids (-ade, -ura, -trp) (BD Bacto #223050) 2 g/L半乳糖 galactose 2 g/L棉子糖 raffinose
。 6.阳性克隆质粒的提取和保存 提取阳性克隆酵母菌的质粒,转化至大肠杆菌E.coli DH5α中,因pGADT7质粒含Amp+ 抗性基因,在Amp+抗性平板上筛选阳性克隆AD- X(X代表阳性克隆中携带的龙须菜cDNA,即为初步筛选得到的相互作用蛋白质的cDNA)。 7.阳性克隆的再验证 pGBKT7 –CaM 与AD–X质粒共转化酵母菌Y2HGold,重新验证相互作用消除假阳性。按表1组合,转化后的酵母菌涂布于SD–Trp/-Leu
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