EZElisa™犬组蛋白H4（H4）ELISA试剂盒-EZE

ELISA法检测细胞凋亡

  （一） 原理   细胞凋亡的发生，是由于钙- 镁依赖性核酸酶进入核小体间切割DNA , 产生180bp ～200bp 或其倍数的核小体片段。而核小体由于与组蛋白H2A 、H2B 、H3 和H4 形成紧密复合物而不被核酸内切酶切割。采用双抗体夹心酶免疫法，应用小鼠抗DNA 和抗组蛋白的单克隆抗体，与核小体片段形成夹心结构，可特异性检测细胞溶解物中的核小体片段。   （二）材料与试剂   1 ．采用Boehringer

细胞凋亡检测操作步骤之ELISA法

相关专题   细胞凋亡 发生时，内源性核酸内切酶将分解核小体区间的双链DNA，但核小体本身由于由组蛋白紧密结合而免受切割，单克隆抗体可以与核小体形成夹心结构，可通过检测核小体判断细胞是否经历凋亡事件。 (一) 原理 细胞凋亡的发生，是由于钙-镁依赖性核酸酶进入核小体间切割DNA,产生180bp～200bp或其倍数的核小体片段。而核小体由于与组蛋白H2A、H2B、H3和H4形成紧密复合物而不被核酸内切酶切割。采用

细胞凋亡的研究方法

1 ml碘化丙啶 （PI），染色15 min，流式细胞仪测定。荧光素标记的地高辛抗体可产生 523nm的发射光（绿色荧光），代表凋亡细胞；在620 nm处PI产生红色荧光，代表其余全部细胞数目。四、免疫组织化学方法： 1、原理：染色体裂解成核小体DNA，并与组蛋白H2A、H2B、H3、H4 紧密结合，保护DNA。用抗组蛋白和抗DAN的抗体ELISA法，提高灵敏度并能测定早期凋亡细胞。2、方法：抗组蛋白抗体包被酶标板，加入含有核小体的待测细胞裂解液，加入抗DNA 抗体-POD（可与核小体中的DNA结合