- ￥1947.90
- 阿拉丁
- 上海
- M666121
- 2025年07月16日
企业认证
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
室温
- 英文名：
Magbead Saliva DNA Kit
- 库存：
期货
- 供应商：
上海阿拉丁生化科技股份有限公司
- 规格：
M666121-96T
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产品简介 该试剂盒提供了一种简单、快速、高效的唾液DNA提取方法，适用于从唾液中 提取基因组DNA。在高盐存在时， DNA结合于硅基包被的Magbeads表面。漂洗后， 高纯度的DNA被洗脱于Buffer EB或去离子水中。纯化得到的DNA纯度好（A260/280 的比值在1.7-1.9之间），完整度高（>15 kb），可用于二代测序、定量PCR、芯片 检测等下游实验。 自备仪器、试剂 1）恒温混匀仪 2）2/15 ml磁力架 3）32通道核酸提取仪 4）96通道核酸提取仪 5）96 DW Plate 6）8 channel Comb 7）Spin tips pack 8）无水乙醇 实验前准备及重要注意事项 1.向25mg Proteinase K中加入1.25 ml Proteinase K Storage Buffer使其溶解，之后 -20℃保存。配置好的Proteinase K溶液勿长时间室温放置，避免反复冻融，以免影响其活性。 2.第一次使用前按照试剂瓶标签向Buffer GW1和Buffer GW2中加入无水乙醇并做好 标记。 3.Magbeads严禁冰冻、离心。冰冻、离心可能会对Magbeads造成不可逆的损害。 操作步骤 Ⅰ.手动单管操作 1.依次向2.0 mL离心管中加入20 μl蛋白酶K、350 μl唾液和500 μl Buffer KCL。 2.涡旋震荡混匀后，将离心管放于65℃、 1600 rpm的恒温混匀仪上震荡裂解20分 钟,形成裂解液。 注意：如无恒温混匀仪，将离心管涡旋震荡10秒钟后放于65℃水浴锅中孵育20分钟，期间每隔5分 钟涡旋震荡10秒钟。 3.将离心管从恒温混合仪上取下，短暂离心后加入20 μl Magbeads PN。之后将离心 管放于25℃、 1600 rpm的恒温混匀仪上震荡裂解10分钟或将离心管连续颠倒混匀 15分钟。 4.将离心管放于磁力架上静置1分钟，待Magbeads完全吸附于离心管侧壁后充分弃 去溶液（保持离心管固定于磁力架上）。 5.将离心管从磁力架上取下，加入750 μl Buffer GW1（使用前请检查是否已加入无 水乙醇） 后涡旋点震1分钟或涡旋震荡5秒钟后放于25℃、 1600 rpm的恒温混匀仪 上震荡混匀2分钟（震荡过程中确Magbeads处于混匀状态）。之后将离心管放于 磁力架上静置1分钟，待Magbeads完全吸附于离心管侧壁后轻轻颠倒磁力架将离 心管盖上的杂质洗落后彻底弃去溶液（保持离心管固定于磁力架上）。 6.重复步骤5。 7.将离心管从磁力架上取下，加入750 μl Buffer GW2（使用前请检查是否已加入无 水乙醇）后涡旋点震1分钟或涡旋震荡5秒钟后放于25℃、 1600 rpm的恒温混匀仪 上震荡混匀2分钟（震荡过程中确Magbeads处于混匀状态）。之后将离心管放于 磁力架上静置1分钟，待Magbeads完全吸附于离心管侧壁后轻轻颠倒磁力架将离 心管盖上的杂质洗落后彻底弃去溶液（保持离心管固定于磁力架上）。 8.保持离心管固定于磁力架上，向离心管中加入750ul Buffer MW3，待悬起的磁珠 重新吸附于磁力架上后立即充分弃去溶液。 9.保持离心管固定于磁力架上，用移液器进一步去除离心管管底和管盖上的溶液， 之后室温放置5-10分钟，使乙醇挥发干净。 10.将离心管从磁力架上取下，加入50-200 μl Buffer EB。涡旋震荡使磁珠完全悬浮于 洗脱液中后将其放于56℃、 1600 rpm的恒温混匀仪上震荡洗脱10分钟，或将离心 管放于56℃水浴锅中孵育10分钟，期间每隔3分钟涡旋震荡10秒钟。 11.将离心管放于磁力架上静置2分钟，待Magbeads完全吸附于离心管侧壁后用移液 器将洗脱液转移至新的离心管中-20℃保存备用。 Ⅱ.与32通道核酸提取仪匹配 1 ．按下表向96DW深孔板中加入相应试剂
4.将加入试剂的深孔板和磁套放于32通道核酸提取仪的相应位置，运行唾液提取程序，约 28分钟后程序运行结束，取出深孔板和磁套。 5.将深孔板6&12列中的洗脱产物转移至1.5 ml离心管中低温保存。 Ⅲ.与96通道核酸提取仪匹配 1 ．按下表向96DW深孔板中加入相应试剂
2.将加入试剂的深孔板和磁套放于96通道核酸提取仪的相应位置，运行唾液提取程序，约 28分钟后程序运行结束，取出深孔板和磁套。 3.将Plate 6中的洗脱产物转移至1.5 ml离心管中低温保存。 | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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文献和实验一、什么是外泌体？ 外泌体（Exosomes）是大小为 30-150 nm、呈茶托状的细胞外囊泡（Extracellular vesicles, EVs），广泛存在于细胞培养上清及各种体液中，包括血液、淋巴液、唾液、尿液、精液、乳汁等。 几乎所有细胞都可以分泌外泌体，但是外泌体来源不同，其内部装载的 RNA、蛋白质、脂类等重要物质在数量和丰度上有很大差异。 二、外泌体的作用和功能 外泌
背景： 全血中提取DNA是一项古老又基本的分子生物学的工作，根据不同的下游的实验和分析，历史上使用方法种类非常多，传统酚氯仿抽提法，高盐盐析法，硅胶模离心柱吸附法，磁珠法，等等。各种方法都有自己的优点和缺点。不同的方法适合不同的下游实验需求。一直以来血样，尤其是病例血样的采集是一个很繁琐和高成本的问题。随着时代的发展，各种成本更是急剧上升，准确、清晰的采集血样的成本急剧上升的后果是研究工作者非常迫切需要一种试剂盒，可以一次性的尽可能的将采集到的最大血样量（1-10ml）的DNA
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