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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
-20°C储存;避免反复冻融
- 英文名:
Exonuclease I(Exo I)
- 库存:
期货
- 供应商:
上海阿拉丁生化科技股份有限公司
- 规格:
E666128-4KU/E666128-20KU
| 规格: | E666128-4KU | 产品价格: | ¥597.9 |
|---|---|---|---|
| 规格: | E666128-20KU | 产品价格: | ¥2397.9 |
产品内容
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产品简介
本产品来源于重组E.coli菌株,其携带有Exo I基因,具有从3’-5’方向水解单链DNA的
外切酶活性,能够逐步释放脱氧核糖核酸5’单磷酸,并留下完整的5’端二核苷酸。本产品
主要应用于PCR扩增后降解消化引物,对于双链DNA和磷酰或乙酰基团封闭的3’ OH末端
DNA链无活性。
活性定义
将在37℃条件下,30分钟内催化释放10 nmol的可溶性核苷酸所需的酶量定义为1个
活性单位(U)。
质量控制
经SDS-PAGE电泳检测,经考马斯亮蓝染色后分析其纯度大于95%。加入BSA可
保证酶的稳定性。
使用方法
以下举例PCR产物测序前的清理。该反应去除了单链的引物,降解未配对的核苷酸。
1.将PCR产物与Exonuclease I按下表混合。
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2.
混匀后37℃孵育30分钟。
3. 80℃温育20分钟即可失活。
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文献和实验Generating Nested Deletions with Exonuclease III
Exonuclease III (Exo III) will digest double-stranded DNA in a 3′ to 5′ direction if the DNA is blunt ended or possesses a 5′ overhang. It will not digest if there is a 3′ overhang of three or more bases, or if the 3′ end has had thiophosphate
The protocol for LIC by Exonuclease III
The protocol for LIC by Exonuclease III 梁耀极 1. Design the primers with 15-bp overlap; 2. Digest the vector by proper restriction enzyme; For getting high quality vectors, there are some good advices as follows: 1) The restriction
point. Add 4U Exonuclease III/ml reaction mix and incubate @ 37℃ (‰400 digested/min). 4. Remove 5ml aliquots into the S1 nuclease tubes (on ice) at various times. When all time points have been collected, incubate the tubes 30' @ RT. 5. Add 2ml STOP
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