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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
大量
- 英文名:
Indo-1,AM,Cell Permeable
- CAS号:
112926-02-0
- 保质期:
有效期6个月
- 供应商:
翌圣生物科技(上海)股份有限公司
- 保存条件:
-20℃避光干燥保存
- 规格:
50UG
Indo-1是一种细胞生物学常用的钙离子荧光探针,与Fura-2为目前使用最广泛的比率法测定的钙荧光指示剂,Indo-1能特异性地结合Ca2+,同时可发出荧光,结合 Ca2+后的最大发射波长从结合前的475 nm向400 nm(Ca2+饱和时)偏移,该信号变化可被流式细胞仪较好的捕捉:在氩离子激光器的351-364光谱范围内单一波长激发该探针,在400 nm 和475 nm 的波长处分别检测结合钙离子和未结合钙离子的荧光信号,通过二者荧光强度的比率测定钙离子浓度。由于Indo-1是极性大的酸性化合物,无法进入细胞内,为此在其负性基团上结合乙酰氧甲酯,使其成为Indo-1/AM,该变化既增加了酯溶性又消除了负电荷,极大的提高了细胞渗透性。在细胞内,Indo-1/AM被酯酶水解成Indo-1后可与胞浆游离Ca2+可逆性结合。
组分信息
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组分名称 |
40775ES50 |
40775ES72 |
40775ES80 |
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Indo-1, AM , Cell Permeant 细胞可渗透钙离子荧光探针 |
50 μg |
5×50 μg |
1 mg |
产品性质
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CAS 号(CAS NO.) |
112926-02-0 |
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分子式(Molecular Fomular) |
C47H51F2N3O22 |
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分子量(Molecular Weight) |
1009.91 |
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Ex/Em(nm, Ca2+-bound) |
346/475 |
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结构式(Structure) |
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储存条件
室温运输。-20℃避光干燥保存,可保存1年。
使用说明
- Indo-1/AM储存液的配制
利用高质量无水DMSO溶解Indo-1/AM配制成2 - 5 mM的储存液,该储存液可分装于-20℃避光干燥密封保存,最长可保存6个月,但是避免反复冻融,建议分装保存。每次使用前需回温至室温。
- Indo-1/AM工作液的配制
利用合适缓冲液(如HHBS)将Indo-1/AM稀释成2 - 20 μM的工作液,并添加0.04% Pluronic F-127和有机阴离子转运抑制剂probenecid(0.5 - 1 mM)。
注:① 对于大多数细胞系,建议最终浓度为4 - 5 μM的Indo-1/AM。细胞加载所需的指示剂的确切浓度必须根据经验确定。
② Indo-1/AM工作液需现配现用,避免反复冻存。
③ Pluronic F-127 可以防止Indo-1/AM在缓冲液中聚合并能帮助其进入细胞。
- 取出预培养的细胞,除去培养基,使用缓冲液洗涤细胞3次。
注:如果使用含血清的培养基,血清中的酯酶会降低Indo-1/AM进入细胞的效果。另外含有酚红的培养基会使本底值略微偏高,所以加工作液之前需尽量去除培养基残留。
- 将 Indo-1/AM工作液加入细胞,加入量以覆盖细胞为准。在37℃培养30 - 60 min。
- 用缓冲液(如HHBS)洗涤细胞 3 次,以充分去除残留的Indo-1/AM工作液。然后加入缓冲液覆盖细胞。
- 数字成像显微镜检测细胞。
注:某些细胞具有自体荧光会影响结果分析,需使用未加载探针细胞做对照,在结果分析时在同一波长下扣除自荧光。
注意事项
1. 本产品仅作科研用途。
2. 为了您的安全和健康,请穿实验服并佩戴一次性手套操作。
3. 荧光染料均存在淬灭问题,请尽量注意避光,以减缓荧光淬灭。
4. 乙酰氧基甲基酯(Acetoxymethylester,AM)容易吸潮,从冰箱取出后,请确认在干燥的环境放至室温后再开封。由于试剂极其微量,开封前请将其短暂离心,以保证粉末落入管底
5. 第一次使用时,建议母液现配现用。且溶解后的试剂尽可能在短时间内使用,以保证实验效果。
6. 母液遇水极易分解,若单次不能用完,建议分装保存,例如5μL/管,用封口膜封口,并严格做到≤-20℃密封干燥保存。
7. 建议您在正式实验前先摸索一下细胞量、钙离子荧光探针的终浓度、培养时间等,找到最佳实验条件。
Ver.CN20241124
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文献和实验[1] Cai L, Chen Q, Yao Z, Sun Q, Wu L, Ni Y. Glucocorticoid receptors involved in melatonin inhibiting cell apoptosis and NLRP3 inflammasome activation caused by bacterial toxin pyocyanin in colon. Free Radic Biol Med. 2021;162:478-489. doi:10.1016/j.freeradbiomed.2020.11.003(IF:6.170)












