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产品信息
| 品系全称 |
B6.Cg-Tg(Aqp2-cre)1Dek/J |
| 有度品系编号 |
YDS0154 |
| 品系来源 |
Jax. 006881(公司内鉴定方案未用到jax中的IPC引物) |
| 品系背景 |
C57BL/6 |
| 常用名 |
AQP2-Cre |
| NCBI ID |
未知 |
| 基因名 |
aquaporin 2 |
| 基因位置 |
未知 |
| 基因表达 |
cre,cre recombinase,bacteriophage P1 |
| 表达部位 |
肾细胞(集合管)和睾丸(精子) |
构建方案
AQP2-Cre 转基因含有一个 9.5 kb 的小鼠aquaporin 2基因 5' 侧翼区域的片段位于 Cre 重组酶序列的上游(在氨基末端带有 SV40 核定位信号和一个 11 个氨基酸的表位标签,来源于位于羧基末端的单纯疱疹病毒糖蛋白 D),随后是 SV40 晚期区域多聚腺苷酸化信号。在 (C57BL/6 x SJL)F2 遗传背景下获得转基因小鼠,将转基因雌性与 C57BL/6 雄性回交至少 5 代。
3. 保种方式
活体保种,繁殖基因型为半合子×非转基因携带者。当维持一个活群体时,半合子雌性可以与群体中的野生型(非携带者)雄性或C57BL/6J雄性交配。对于“cre -lox”的研究,由于雄性在精子和肾组织中表达cre,因此推荐该转基因的母体遗传。
4. 生殖泄露
在小鼠aquaporin 2启动子的指导下,在肾细胞(收集管)和睾丸(精子)中观察到转基因cre活性。当与含有loxp侧翼序列的小鼠交配时,cret介导的重组将导致侧翼序列的缺失。
5. 研究应用
研究方向及表型:
工具鼠(肾脏学、生理学、代谢或II型糖尿病研究)
具体内容及相关参考文献:
将含有loxP-flanked (floxed) ET-1基因的小鼠与AQP2-Cre小鼠进行交配以评价集合管(CD)衍生的ET-1对肾脏水代谢的调节作用。
Collecting duct-specific knockout of endothelin-1 alters vasopressin regulation of urine osmolality. Ge Y , et al.
含有loxP-flanked (floxed) ETA受体基因的小鼠与AQP2-Cre小鼠交配以研究CD ETA受体在调节肾功能方面的生理作用。
Collecting duct-Ge Y , et al. specific knockout of the endothelin A receptor alters renal vasopressin responsiveness, but not sodium excretion or blood pressure.
通过PPARγ floxed小鼠与AQP2-Cre小鼠的遗传杂交,获得了具有PPARγ基因CD特异性KO的小鼠,为ppar γ依赖的体液稳态控制机制的研究提供了一个新领域。
Collecting duct-specific deletion of peroxisome proliferator-activated receptor gamma blocks thiazolidinedione-induced fluid retention. Zhang H , et al.
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文献和实验家族。当 KRAS 基因发生异常时,下游信号传导失调导致肿瘤发生,KRAS 突变也是中国 NSCLC 的患者第二大常见的基因突变,其中 KRAS G12C 在肺腺癌中最为常见。 目前 NSCLC 的小鼠模型主要集中在腺癌亚型上,大多数的研究采用条件性 KRAS 点突变模型进行,在 KRAS-LSL-G12C 或 KRAS-LSL-G12D 小鼠细胞中引入 Cre 重组酶导致内源性水平上突变等位基因的表达,模拟人类肿瘤发展的启动条件。Jackson 等[2] 就采用了这样的方式构建肿瘤模型,他们在 KRASG12
的生理条件下发挥作用;④Cre重组酶的编码基因可以置于任何一种启动子的调控之下,从而使这种重组酶在生物体不同的细胞、组织、器官,以及不同的发育阶段或不同的生理条件下产生,进而发挥作用,这一点也是该系统在应用过程中最为重要的一点。 3.Cre/loxP系统的工作流程 利用Cre/loxP系统实现体内某特定基因在特定条件下的敲除,需要两只转基因小鼠。第一只小鼠一般采用胚胎干细胞技术获得,首先在体外构建一个在目的基因两端分别含有一个loxP位点的基因序列,之后将体外构建好的这段基因
。随后,才能进行杂合子小鼠的相互交配。注意点:-不同的 KO Founder 之间不能相互交配。-不同的 KO Founder 的子代之间也不建议相互交配。条件性基因敲除获得 flox 纯合同时 Cre 阳性的小鼠(f/+;Cre-)×(f/+;Cre+)→ f/f;Cre+Flox 小鼠在去除 Neo 基因以后(CRISPR/Cas9 途径获得的 CKO 小鼠省略此步骤),获得仅含有两个 loxP 位点的 flox 杂合子小鼠(flox/+,可缩写成 f/+)。 flox 杂合子(f/+)小鼠与组织
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