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文献和实验人 iPS 细胞体外分化为气道上皮肺类器官用于呼吸系统疾病研究应用以及iPSC操作指南
将Mr. Frosty水浴转移到-80 °C的冰箱中。让细胞在-80 °C过夜(16-36小时)。冷冻后,将细胞置于干冰上转移至超低温储存容器(液氮或-150°C冰箱)。 人iPSC的表征 iPSC未分化状态的特征在于碱性磷酸酶(SCR004)和干细胞转录因子Nanog、Oct-4和Sox-2的高度表达。这些细胞在其阶段特异性胚胎抗原(SSEA1、3、4)和足细胞标记蛋白(TRA-1-60,TRA-1-81)标记物的表达方面,也显示出与它们的鼠对应物的显著差异。可以使用高细胞表征试剂盒(SCR001、SCR
研究的胰岛样类器官 随着技术的不断进步,胰岛样类器官的发育和功能越来越接近生理条件下的胰岛组织,胰岛样类器官可以在某些场景下作为人类胰岛的替代品。 长期以来,由于动物模型不能完全模拟人的疾病特征,糖尿病研究一直缺乏真实的疾病模型。基于干细胞的胰岛样类器官忠实地模拟了胰岛的发育过程【8】,并具有与天然胰岛相似的形态结构和细胞组成。将基因编辑技术(如 CRISPR/Cas9)和 iPSC 分化技术的结合,能够通过操纵胰岛样类器官来研究正常和糖尿病人胰岛的发育【9】、功能和病理机制,在促进药物筛选和自体胰岛
类器官扩增和分化 13、将 HM 培养基吸出,用 PBS 清洗后,加入 EM 培养基,放置在 37℃,5% 低氧的培养箱中培养 4 天进行类器官扩增。 14、随后用 DM 培养基进行换液,放置在 37℃,5%CO2 的培养箱中培养 6 天,完成进一步分化。 图 2. 扩增培养基(EM)和分化培养基(DM)孵育后的肝类器官免疫荧光图【2】 肝类器官应用前景 类器官是一种能够进行体外更新和自组装的模型,相比于传统的二维(2D)细胞培养,类器官的生长环境更贴合生理条件。3D 培养的肝类器官可以用于
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