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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 供应商:
上海抚生
- 库存:
39
- 克隆性:
多克隆
- 抗原来源:
Rabbit
- 抗体英文名:
Rabbit Anti-Bovine IgM/FITC
- 抗体名:
FITC标记的兔抗牛IgM
- 免疫原:
Native Bovine IgG
- 亚型:
IgG
- 应用范围:
IF=1:100-1000, Flow-Cyt=1:100-1000 not yet tested in other applications. optimal dilutions/concentrations should be determined by the end user.
- 保存条件:
Store at -20℃
- 浓度:
2.0 mg/ml
- 规格:
100ul
别名:Rabbit Anti-Bovine IgM (FITC); Immunoglobulin M;
抗体来源:Rabbit
克隆类型:Polyclonal
交叉反应: Dog
产品应用:IF=1:100-1000, Flow-Cyt=1:100-1000
not yet tested in other applications.
optimal dilutions/concentrations should be determined by the end user.
性状:Liquid
浓度:2.0 mg/ml
免疫原:Native Bovine IgG
亚型:IgG
纯化方法:affinity purified by Protein A
缓冲液:10 mM TBS (pH=7.4) with 1% BSA, 0.03% Proclin300 and 50% glycerol.
保存条件:Store at -20℃ for one year. Avoid repeated freeze/thaw cycles.
注意事项:This product as supplied is intended for research use only, not for use in human, therapeutic or diagnostic applications.
产品介绍:IgM normally constitutes about 10% of serum immunoglobulins. IgM antibody is prominent in early immune responses to most antigens and is largely confined to plasma due to it's large size. Monomeric IgM is expressed as a membrane bound antibody on the surface of B cells and as a pentamer when secreted by plasma cells. Due to it's high valency IgM is more efficient than other isotypes is binding antigens with repeating epitopes (virus particles and red blood cells) and is more efficient than IgG in activiating the complement pathway. The gene for the mu constant region contains four domains separated by short intervening sequences.
商品属性:
| 产品名称 | FITC标记的兔抗牛IgM | 货号 | A-01K96489 |
| 英文名称 | Rabbit Anti-Bovine IgM/FITC | 免 疫 原 | Native Bovine IgG |
| 规格 | 100ul | 用途 | 仅供科研实验 |
二抗的4个基本步骤:
1. 选择正确的种属来源和反应物种
二抗的选择首要基于一抗,应与一抗的种属来源相对应,且需要来自于不同的物种(如下图所示)。
2. 选择正确的二抗形式
选择合适且正确的二抗形式,也是获得实验成功的关键之一。三种二抗形式Whole IgG、F(ab') 、Fab如下图所示。
3. 抗体特异性的选择
要注意区分二抗的特异性和形式的不同,特异性指的是二抗识别的不同一抗亚型或某特殊区域。抗体的特异性主要基于以下三种形式:
(1)轻链特异性
(2)Fc端特异性
(3)亚型特异性
4.偶联标记的选择
不同实验类型适合的标记类型不一样,如下表所示:
公司正在出售的产品:
| P选择素糖蛋白配体1抗体 | RCAN1 Antibody Blocking Peptide |
| 磷酸化肝癌缺失基因1抗体 | ENTPD5 Antibody Blocking Peptide |
| P21蛋白激活的蛋白激酶6抗体 | PRR27 Antibody Blocking Peptide |
| 醛糖还原酶相关蛋白质抗体 | n-Myc Antibody Blocking Peptide |
| Cy5.5标记小鼠抗人CD20单克隆抗体 | A Antibody Blocking Peptide |
| 双特异性磷酸酶抗体11抗体 | STXBP1 Antibody Blocking Peptide |
| 分泌型磷脂酶A2抗体 | ZNF423/OAZ Antibody Blocking Peptide |
| 磷酸化丝裂原活化蛋白激酶活化的蛋白激酶2抗体 | RNF156 Antibody Blocking Peptide |
| 泛素蛋白连接酶抗体 | SPAG16 Antibody Blocking Peptide |
| 甲基转移酶样蛋白3抗体 | SECTM1 Antibody Blocking Peptide |
| PDZ结构域PDZK6蛋白抗体 | Duck hepatitis A virus polyprotein Antibody Blocking Peptide |
| 细胞生长抑制基因39蛋白抗体 | EphB1 + EphB2 Antibody Blocking Peptide |
| 泛素连接酶CUL7蛋白抗体 | FITC标记的兔抗牛IgMRecombinant human TNFRSF9 protein, C-His-Avi (HEK293) / Biotin |
| 同源转录因子DLX5抗体 | MCM4 Antibody Blocking Peptide |
| 丝氨酸蛋白酶45抗体 | phospho-TFII I (Tyr248) Antibody Blocking Peptide |
双重免疫荧光
在同一组织或细胞标本同时检测两种抗原时,需进行双重荧光染色。双重免疫荧光标记法也分为直接法和间接法。
直接法双重免疫荧光标记
直接法双重免疫荧光标记:将标记有两种不同荧光素的抗体(如抗A和抗B)以适当比例混合,滴加在标本上孵育,然后洗去未结合的荧光抗体,在荧光显微镜下分别选择两种相应的激发滤片观察,即可对两种抗原进行定位和定量。直接法简便可靠,但灵敏度较低。
间接法双重免疫荧光标记
间接法双重免疫荧光标记:用未标记的两种特异性一抗(不同种属来源)孵育组织或细胞,洗去多余的一抗后,再用两种不同的荧光素分别标记的二抗孵育组织或细胞,洗去多余的二抗体,后在荧光显微镜下分别选择两种相应的激发滤片观察,从而对两种抗原进行定位和定量。
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文献和实验当FITC在碱性溶液中与抗体蛋白反应时,主要是蛋白质上赖氨酸的r氨基与荧光素的硫碳胺键(thiocarbmide)结合,形成FITC-蛋白质结合物,即荧光抗体或荧光结合物。一个IgG分子中有86个赖氨酸残基,一般最多能结合15~20个,一个IgG分子可结合2~8个分子的FITC,其反应式如下FITC-N=C=S + N-H2-蛋白质 → FITC-NS-C-N-H2-蛋白质常用Marsshall(1958)法标记荧光抗体,也可以根据条件采用Chadwick等标记法或Clark
ml三蒸水中即成; 方法与步骤: 根据Marshall氏法高效价的抗人球蛋白兔免疫血清,分离球蛋白。 1. 用0.15 mol/L NaCl的盐水及0.15 mol/L pH9.0的NaHCO3-Na2CO3缓冲液稀释使每毫升内含抗体10mg,缓冲液为总量的10%; 2. 将以上溶液降温至4℃,按蛋白:荧光素=50—80mg:1mg的比例加入异硫氰酸荧光素,在0—4℃下电磁搅拌12—14h; 3.用半饱和硫酸铵将标记球蛋白
5. 过柱。取透析过夜的标记物,过葡萄糖凝胶G-25或G-50柱,分离出游离荧光素,收集标记的荧光抗体进行鉴定。
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