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- E8431
- 美国
- 2026年06月10日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 英文名：
pGL4.25 [luc2CP/minP] Vector
- 供应商：
普洛麦格
- 规格：
20µg
说明：
构建一个可以检测某一功能信号通路的细胞系，可以有助于解译参与这一信号通路的信号分子。这些工具载体是通过在载体的最小启动子的上游插入多个反应元件重复序列而获得的。Promega 利用pGL4 骨架上优化的luc2 萤火虫萤光素酶基因设计了一系列载体，可对多条通路的活性进行检测。这些载体上还包含一个潮霉素抗性筛选基因，既可用于瞬时转染，也可用于筛选稳定转染细胞系。我们提供含有三种经过改造的不同萤火虫萤光素酶基因(luc2 、luc2P 或luc2CP ) 的最小启动子载体。luc2 基因经过改造，去除了大部分隐藏的转录因子结合位点，并通过编码优化提高了在哺乳动物细胞中的表达效率。luc2P 、luc2CP 和RapidResponseTM 基因是在luc2 基因的基础上增加了降解序列，从而可以调控luc2 基因在细胞中的半衰期。RapidResponseTM 基因对刺激的响应更快，但是以牺牲信号强度为代价。luc2P 基因( 半衰期为1 个小时) 反应比luc2 基因( 半衰期为3 个小时) 快，信号强度也适合，而luc2CP 基因( 半衰期为0.4 个小时) 反应更快但信号强度最弱。最小启动子载体有含筛选标签( 潮霉素) 和不含筛选标签的可供订购。为了提高实验效率，一些预设的反应元件载体已经整合到了pGL4.27 载体中。其中一些载体也可订购其稳定表达的细胞系(GloResponse ™细胞系)。
特点：
• 预设的载体不再需要克隆和验证检测。
• 增强的报告基因表达水平：为了更适于哺乳动物细胞的表达，将合成的基因密码子进行了优化。
• 降低了表达产物的背景和危险：去掉了隐藏的DNA 调控元件和转录因子结合位点。
• 瞬时应答更快：Rapid ResponseTM 技术应用了去稳定萤光素酶基因。
• 可轻松地从瞬时转换到稳定细胞：有多种哺乳动物细胞筛选标记可供选择。
储存条件：储存于-20℃。
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文献和实验Lentiviral Vector Mediated Transgenesis
for ubiquitous or tissue?specific or constitutive or externally controllable transgene expression, as well as RNAi?mediated gene knockdown. Curr. Protoc. Mouse Biol. 1:169?184. © 2011 by John Wiley & Sons, Inc. Keywords: lentiviral vector
Preparing Vector DNA For Transfection/Targeting
if need be). -To each 1/2 of a prep, containing approximately 200-250 µg of supercoiled DNA, add the following: 40 µl of 10 x Enzyme buffer 50-100 units enzyme (I prefer a new tube of enzyme for this) bring up to 400 µl with sterile ddH2O. Digest
Detection and Selection of Lentiviral Vector-Transduced Cells
into both mitotic active and inactive cells in vitro and in vivo, a characteristic that overcomes many of the barriers of therapeutic gene therapy application. In the past few years, different lentiviral vector systems have been developed based on primate
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