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Bestdex系列离子交换填料以葡聚糖为基架,连接不同带电基团而制成。 CM Bestdex C-25为弱阳离子交换介质,是将羧甲基基团偶联于Bestdex G-25而成。 DEAE Bestdex A-50为弱阴离子交换介质,是将二乙基氨基乙基偶联于Bestdex G-50而成。

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文献和实验离子交换层析原理 离子交换层析是根据生物分子的带电荷差异进行分离的一种吸附性层析。当生物分子通过离子交换层析介质的时候,带电荷的分子和层析填料上的相反电荷之间产生静电吸附,这是一种可逆的相互作用,在使用缓冲液洗脱时,不同电荷数量的生物分子,其洗脱缓冲液的浓度不同,从而使生物分子通过离子交换层析介质后得到分离的效果。 特点 介质种类繁多,具有高选择性 pH是离子交换层析至关重要的参数,pH的不同会导致整个实验结果的差异 操作简单,易于控制 属于吸附性层析,通常载量很高,具有浓缩作用 洗脱
高盐蛋白的分离 基本步骤 疏水作用层析作为一种吸附性层析,主要步骤包括平衡、上样、清洗、洗脱和再生步骤。疏水作用层析一般在高盐环境中上样,经过上样和清洗之后,通过降低洗脱液中的盐浓度逐渐对不同的分子进行洗脱。其流程可参考下图(图13): 图13 疏水作用层析流程图 填料选择 疏水填料和离子交换填料类似,都是由基架和疏水配基交联而成,常见的疏水填料配基有 Phenyl、Butyl、Octyl 等,常见疏水填料强弱如图所示: 图14 常见疏水填料强弱图 疏水性强弱,在实验初期
等。 葡聚糖凝胶介质是由多聚葡聚糖与环氧绿丙烷交连而成。最常用的葡聚糖凝胶层析介质是Sephadex G系列,不同型号的凝胶用G表示,G代表交联度,从G10到G100。“G”后面的数字表示每10g干胶的吸水量,可根据待分离混和物分子量大小选用不同“G”值的凝胶。 2. 分离过程: 样品随洗脱液的流动下移 3. 影响凝胶柱层析的主要因素 (1)层析柱的选择与装填 层析柱的大小应根据分离样品量的多少及对分辨率的要求而定。凝胶柱填装后用肉眼观察应均匀
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