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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 供应商:
上海西格
- 库存:
55
- 英文名:
人眼眶成纤维细胞
- 物种来源:
人
- 规格:
5×105
| 产品名称 | 规格 | 货号 |
| 人眼眶成纤维细胞 | 5×105 | XG-X4692 |
人眼眶成纤维细胞体外培养周期有限;建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养,以此保证该细胞的最佳培养状态。
二、细胞培养状态
发货时发送细胞电子版照片
在技术部标准操作流程下,建议您收到细胞后尽快进行相关实验。
使用方法
1. 取出T25细胞培养瓶,用75%酒精消毒瓶身,拆下封口膜,放入37℃、5%CO2、饱和湿度的细胞培养箱中静置3-4h,以稳定细胞状态。
2. 贴壁细胞消化
1)吸出T25细胞培养瓶中的培养基,用PBS清洗细胞一次;
2)添加0.25%胰蛋白酶消化液1mL至T25培养瓶中,轻微转动培养瓶至消化液覆盖整个培养瓶底后,吸出多余胰蛋白酶消化液,37℃温浴1-3min;倒置显微镜下观察,待细胞回缩变圆后,再加入5ml完全培养基终止消化;
3)用吸管轻轻吹打混匀,按传代比例接种T25培养瓶传代,然后补充新鲜的完全培养基至5mL,置于37℃、5%CO2、饱和湿度的细胞培养箱中静置培养;
4)待细胞完全贴壁后,培养观察;之后按照换液频率更换新鲜的完全培养基。
3. 细胞收货脱落
1)收集所有细胞悬液,1000rpm,离心5min,保留沉淀;
2)添加0.25%胰蛋白酶消化液0.5mL至离心管中,重悬沉淀,放置于37℃消化3min(或4℃冰箱静置5-7min);消化完向离心管内加入5ml完全培养基终止消化;
3)经1000rpm,离心5min,丢弃上清,用5ml完全培养基重悬沉淀,接种于新的培养瓶内;
4)待细胞完全贴壁后,培养观察;之后按照换液频率更换新鲜的完全培养基(37℃预热)。
5)原瓶内贴壁细胞按正常消化处理。
4. 细胞实验
因原代细胞贴壁特殊性,贴壁的原代细胞在消化后转移至其他实验器皿(如玻璃爬片、培养板、共聚焦培养皿等)时,需要对实验器皿进行包被,以增强细胞贴壁性,避免细胞因没贴好影响实验;包被条件常选用鼠尾胶原Ⅰ(2-5μg/cm2) ,多聚赖氨酸PLL(0.1mg/ml),明胶(0.1%),依据细胞种类而定。悬浮/半悬浮细胞无需包被。
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四、注意事项
1. 培养基于4℃条件下可保存3-6个月。
2. 在细胞培养过程中,请注意保持无菌操作。
3. 传代培养过程中,胰酶消化时间不宜过长,否则会影响细胞贴壁及其生长状态。
4. 建议客户收到细胞后前3天每个倍数各拍几张细胞照片,记录细胞状态,便于和技术部沟通;由于运输的原因,个别敏感细胞会出现不稳定的情况,请及时和我们联系,详尽告知细胞的具体情况,以便我们的技术人员跟踪、回访直至问题得到解决。
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文献和实验锐器或拳击伤,车祸、摔伤等严重的眼部挫伤可发生眼眶出血,眶骨骨折。单独的眶骨骨折比较少见,常伴有邻近部位的颅骨、鼻窦的骨折,甚至颅底骨折,所以眶骨骨折后其临床表现可以各人不同。骨折如发生在眶尖部压迫或切断视神经则视力下降,甚至失明。 临床表现 1.疼痛,睁眼困难,视力下降甚至失明; 2.眼睑皮肤水肿、瘀血、下垂或裂伤等; 3.眶压高,眶内出血,眼球突出; 4.筛骨骨折时发生眼睑皮下气肿,触诊时有捻发感。 5.眶尖视神经管处骨折者可发生眼睑皮下瘀血,球结膜
突出; 2.约半数患者出现不同程度的视力障碍; 3.影像检查提示眶内或眶周占位性病变。 诊断依据 1.眼球突出; 2.影像检查提示眼眶占位性病变; 3.手术后病理检查证实。 治疗原则 1.手术摘除肿瘤; 2.全身或局部注射皮质类固醇激素,适合于婴幼儿眼眶毛细血管瘤; 3.对症支持治疗; 4.放射疗法; 5.必要时输全血。 用药原则 1.眶海绵状血管瘤多须手术治疗。术后静滴青霉素、地塞米松减轻手术反应,必要时输血。 2.眼眶毛细
丁香园网友hyong915的观点为:成纤维细胞培养(一) 原代培养1、在手术室无菌条件下,切取新鲜的皮肤,增殖性瘢痕和瘢痕疙瘩组织,修除表皮和皮下组织,盐水反复冲洗后放入含PS的DMEM培养液内带回无菌工作间。2、把组织块置于培养皿内,Hank,s液漂洗三遍后吸净Hank,s液,眼科剪反复剪切组织块成0.5-1mm3大小。用弯头吸管吸取组织块接种于40ml培养方瓶瓶壁上,组织块间留约0.3-0.5cm的间距。3、 塞好瓶塞,放入37℃电热恒温培养箱内3.5小时使培养的组织小块微干涸
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