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- 2026年01月05日
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ROS染色原理主要基于特定物质与细胞内游离亚铁原卟啉(FH)、活性氧(ROS)、过氧化物酶(POX)、环氧合酶(COX)、血红素氧化酶(HO)等物质进行氧化还原反应。这些反应产物能够使细胞内酶染色，从而实现对ROS浓度的检测。1
在机体内，ROS的主要来源之一是线粒体内膜的呼吸链底物端。在线粒体的电子传递链复合物将电子传递给氧气时，一部分氧气被还原，形成O2-或H2O2。另一个重要的ROS来源是NADPH氧化酶，其催化亚基被称为NADPH氧化酶2(NOX2/gp91phax)，能够在细胞质膜上表达。这些酶能够通过电子传递产生ROS，大量存在于吞噬细胞，并在其他各种组织细胞中以较低水平广泛存在，参与多种膜受体下游信号激活。因此，对ROS浓度或相对水平进行可靠的测量具有重要意义，通过检测细胞内ROS水平，可以深入了解细胞信号传导并研究疾病的潜在作用机制。
ROS(reactive oxygen species)即活性氧自由基，主要包括活性氧族如超氧阴离子自由基(O2-·)、过氧化氢(H2O2)、羟自由基(OH·)和单线态氧，通常是有氧代谢的副产物。
在病理条件下，由于活性氧的产生和清除失去了正常平衡，会对组织细胞造成损伤。
二氢乙锭(Dihydroethidium, DHE)，可自由透过活细胞进入细胞内，并被细胞内的ROS氧化，形成氧化乙锭;氧化乙锭可掺入染色体DNA中，产生红色荧光。
根据活细胞中红色荧光的产生，可以判断细胞ROS含量的多少和变化。检测ROS水平常用于凋亡、衰老、自噬、炎症、缺血再灌注损伤、神经退行疾病等领域的研究。
ROS染色是活氧检测，组织冰冻切片不能用固定液固定，最好是新鲜组织，ROS阴性细胞仅有较低的荧光强度，ROS阳性细胞有较强的红色荧光。
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文献和实验and show the characteristic membrane blebbing (bubble formation)seen in cells dying via apoptosis.Promega公司的DeadEnd™比色法细胞凋亡检测系统能标记片断化的DNA，而这种片段化的DNA被视为是细胞凋亡的典型生化特征之一。DeadEnd™比色法细胞凋亡检测系统是一种在组织切片与培养细胞中标记凋亡细胞核的理想方法，与此同时，还可以做形态学上的评估。本文中，将展示此种方法在细胞凋亡的原位细胞, 动物模型及多种病理学组织切片中的应用。抗Fas
1 光学显微镜和倒置显微镜 （1） 未染色细胞：凋亡细胞的体积变小、变形，细胞膜完整但出现发泡现象，细胞凋亡晚期可见凋亡小体。贴壁细胞出现皱缩、变圆、脱落。 （2） 染色细胞：常用姬姆萨染色、瑞氏染色等。凋亡细胞的染色质浓缩、边缘化，核膜裂解、染色质分割成块状和凋亡小体等典型的凋亡形态。 2 荧光显微镜和共聚焦激光扫描显微镜 一般以细胞核染色质的形态学改变为指标来评判细胞凋亡的进展情况。 常用的DNA特异性染料有：HO 33342
抗体的结构决定了其对应的功能，同一抗体的V区和C区的氨基酸组成和顺序不同，决定了其功能上的差异。V区和C区的组成和结构，决定了抗体的生物学功能。 图1：抗体的主要功能（图片来源：Abbas et al: Cellular and Molecular Immunology, 7e.) 1、特异性识别功能 抗体可以通过其结构上的可变区域与抗原结合，同时，具有极高的特异性。这种特异性识别功能可以使抗体识别和结合到感染的病原体，肿瘤细胞等不同种类的分子，帮助免疫系统识别并定位到这些分子，进而启动
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