Anti-Human CD3 APC (100 test

用全血直接分选 CD3+ T 细胞

上 Strep-tag 的 Fab 片段（Fab-Streps）特异性的结合到琼脂糖基质上。随后，加入全血或其他血液制剂流过柱子。目的细胞通过特异性的 Fab-Strep 作用从而结合到琼脂糖基质上，其他非目的细胞则有效的被洗去。最后，加入生物素使目的细胞从 Fab-Streps 上解离。至此，就已分离得到不带任何标记的、真实的目的细胞可用于下游的实验研究。   1. 实验流程 所需产品： CD3 Fab-TACS® Gravity Kit, human（IBA Lifesciences, Cat

人APC和TSC－2 cDNA的长5＇RACE

 图2 APC 5＇末端的扩增。用对应APC mRNA的位置5846的GSP反转录1mg Hela总RNA得到APC mRNA。cDNA被纯化、加尾，和用对应位置1797（A带）和位置1632（B带）的引物和AAP一起，用ELONGASE酶混合物来扩增（94℃ 30s，接着35个循环的94℃ 15 s，55℃ 30 s，68℃ 5 min）。初步PCR用TE缓冲液稀释100倍，取1ml用引物APC－1632（A带）或引物APC－1242（B带）和AUAP分别重新扩增（30个循环），每个PCR

[实验步骤] 由全血直接分选 CD3+ T 细胞

及释放目标细胞。以不具磁性且可逆的试剂，取代一般具高亲和力的完整抗体，从而达到直接由全血或其他样本，进行温和标准化正选的目的。Fab-TACS 正选，化解了传统使用完整抗体进行正选的困境，其对目标细胞无不必要的刺激，避免了分选流程的细胞活化，也避免完整抗体与特定受体的结合而影响的分析准确度。因此，使用 Fab-TACS 无痕正选技术可富集不含标记、未激活的目标细胞，次次精准。人全血 CD3+ T 细胞分选实例1. 所需产品：(1) CD3 Fab-TACS® Gravity Kit, human