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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
充足
- 英文名:
Paired-basic endopeptidase, Recombinant, Expressed in Yeast
- 保质期:
一年
- 供应商:
翌圣生物科技(上海)股份有限公司
- 保存条件:
2-8℃保存
- 规格:
100μg
双碱性内切酶又称为Kex2蛋白酶、YSCF蛋白酶,在酵母体内Kex2蛋白酶负责加工killer toxin和α-factor的前体,是一种钙离子依赖型的丝氨酸蛋白酶,能特异性识别和切割Arg-Arg、Lys-Arg等双碱性氨基酸羧基端肽键。与胰蛋白酶不同,Kex2不能识别和切割单一碱性氨基酸即精氨酸或赖氨酸的羧基端肽键。Kex2蛋白酶活性不受常规的丝氨酸蛋白酶抑制剂如抑肽酶、PMSF、TPCK所抑制。
翌圣重组Kex2蛋白酶是由毕赤酵母表达,在GMP法规下生产,不含任何动物源成分,无动物源性的病毒污染,与天然的酿酒酵母Kex2酶具有相同的酶特异性。最适作用pH为pH9.0,稳定储存的pH为5.0-6.0。
产品应用
1. 多肽药物生产中的工艺酶切。
2. 蛋白质的酶解和肽图分析、测序等。
产品性质
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来源(Source) |
毕赤酵母表达 |
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分子量(Molecular Weight) |
理论值67.0±6.7 kDa |
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外观(Appearance) |
白色、类白色粉末 |
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酶浓度(Enzyme Concentration) |
≥10.0 units/mg pro |
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活性定义(Activity Definition) |
25℃,50 mM Tris-HCl,2 mM CaCl2,pH8.0的3 mL反应体系中,每分钟催化底物Boc-QRR-pNA释放出1 μmoL对硝-基苯胺(4-nitroaniline)的酶量定义为一个酶活单位(Unit) |
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质量保证(Quality assurance) |
SDS-PAGE胶检测仅可见清晰单一的目的条带;不含其他蛋白酶,无非特异性切割 |
储存条件
冻干粉2~8℃保存,避光,防潮,有效期1年。
溶解保存缓冲液(20 mM NaAc-HAc,pH 5.2,2 mM Ca2+),溶解后存于-20℃以下,建议分装保存,避免反复冻融。
使用方法(应用举例)
推荐反应缓冲液:pH 7.0-9.0,50 mM Tris-HCl,2 mM Ca2+ 或者HEPES,5 mM Ca2+。若溶解后不马上使用,建议使用20 mM (pH 5.2) NaAc-HAc,2 mM Ca2+ 缓冲液溶解冻干粉,溶解后酶的终浓度约为1-10 mg/mL,按照需要分装后储存-20℃以下储存。反应时,用pH 7.0-9.0,50 mM Tris-HCl,2 mM Ca2+ 或HEPES,5 mM Ca2+作为反应稀释液。
注:酶的最适反应pH为9.0,稳定pH为5.0-6.0。
注意事项
1. 本产品仅作科研用途。
2. 为了您的安全和健康,请穿实验服并佩戴一次性手套操作。
Ver.CN20250409
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,例如细菌的质粒、噬菌体、病毒等,常用的载体一般为质粒;根据需要可直接从公司购买合适的载体,也可以自己构建。(3)连接:目的 DNA 片段和适当载体的连接, 一般采用核酸内切酶分别消化 DNA 片段和载体,使它们的末端能够连接到一起构成重组 DNA 分子。由于所用内切酶的切割特点不同,产生三种连接方式:粘端连接、平端连接和不相配的连接。(4)转化:将连接的重组 DNA 产物导入合适的宿主细胞,使其在宿主细胞内复制扩增或表达,赋予宿主细胞新的生物特征。(5)克隆化:重组 DNA 分子转化大肠杆菌后,在平板
的DNA分子,再通过转化或转染宿主细胞,筛选出含有目的基因的转化子细胞,经扩增提取获得大量同一DNA分子。生物技术工程: 基因工程、蛋白质工程、 酶工程、细胞工程等基因工程----实现基因克隆所采用的方法 及相关的工作称基因工程, 又称重组DNA工艺学。目的 :1、分离获得某一感兴趣的基因或DNA序列 2、获得感兴趣基因的表达产物(蛋白质)(二) 工具酶 •限制性核酸内切酶 • DNA聚合酶I • 逆转录酶 • T4DNA 连接酶 • 碱性磷酸酶 • 末端转移酶 • Taq












