鼠膜蛋白文库

【求助】膜蛋白CDNA文库构建

PCR352 请教： 本人想利用特异性抗体结合CDNA法筛选某蛋白的膜受体，这种方法是否可行？cDNA文库构建工作量大不大？如果构建膜蛋白的cDNA文库，是否就是提取膜蛋白的RNA，然后反转录成CDNA，然后转化就可以了？ 本人不是生化专业，理论知识欠缺，还请高手指教。 zhujoker 为什么用抗体呢？ biogenesci 膜蛋白酵母双杂交有专门的试剂盒的，可以找公司问问

CRISPR/Cas9文库2.0升级版—助你快速、精准地做基因筛选

，不仅涵盖经典的（人/鼠）全基因组敲除文库，还提供针对膜蛋白、激酶等特定通路的现货产品，并支持高灵活度的个性化 Sub-library 定制，全面满足不同维度的基因打靶需求。   同时，和元生物提供从细胞模型构建到表型富集的一站式解决方案。无论是基于细胞存活的正负筛选，还是基于 FACS 的复杂表型荧光分选，均可为您量身定制专属方案。助力药物靶点发现、合成致死等严苛的药效与机制筛选场景。结合自主优化的 NGS 扩增建库技术与标准化生信分析管线，可有效攻克CRISPR筛选分析过程中 sgRNA 覆盖丢失

【建议】本月讨论与整理专帖-T-A克隆，另开帖不加分！

于质粒的纯化。 recA1 减少克隆DNA的非特异性重组。 DE3 编码T7 RNA聚合酶，用于诱导T7-启动的表达系统的表达。 DeoR 可以高效吸收大片段DNA，有利于文库的构建。 Tn10 含 有四环素抗性的转座子。 OmpT 表明大肠杆菌缺乏外膜蛋白酶。缺乏外膜蛋白酶的菌株可以降低表达的外源蛋白在细菌中被降解的程度，有利于获得完整的重组蛋白。 PLys 含编码T7溶菌酶的质粒；通过抑制T7 RNA聚合酶基础表达水平来降低T7启动的表达体系的基础表达水平。 ArgF 由于突变