鼠膜蛋白文库

【求助】膜蛋白CDNA文库构建

PCR352 请教： 本人想利用特异性抗体结合CDNA法筛选某蛋白的膜受体，这种方法是否可行？cDNA文库构建工作量大不大？如果构建膜蛋白的cDNA文库，是否就是提取膜蛋白的RNA，然后反转录成CDNA，然后转化就可以了？ 本人不是生化专业，理论知识欠缺，还请高手指教。 zhujoker 为什么用抗体呢？ biogenesci 膜蛋白酵母双杂交有专门的试剂盒的，可以找公司问问

【建议】本月讨论与整理专帖-T-A克隆，另开帖不加分！

于质粒的纯化。 recA1 减少克隆DNA的非特异性重组。 DE3 编码T7 RNA聚合酶，用于诱导T7-启动的表达系统的表达。 DeoR 可以高效吸收大片段DNA，有利于文库的构建。 Tn10 含 有四环素抗性的转座子。 OmpT 表明大肠杆菌缺乏外膜蛋白酶。缺乏外膜蛋白酶的菌株可以降低表达的外源蛋白在细菌中被降解的程度，有利于获得完整的重组蛋白。 PLys 含编码T7溶菌酶的质粒；通过抑制T7 RNA聚合酶基础表达水平来降低T7启动的表达体系的基础表达水平。 ArgF 由于突变

RACE PCR 专题，欢迎参加讨论！

我做了一点RACE PCR的工作，应lhailzhj 主任的邀请，在这里作一点介绍，望广大战友补充和修正，谢谢！近年来随着生物技术的不断发展，出现了许多克隆新基因的方法和手段，如图谱克隆技术、转座子标签技术、mRNA差异显示技术二基因组减法技术以及cDNA文库筛选技术等。但上述方法人多具有实验周期长、技术步骤烦琐且工作量大等特点。cDNA末端快速扩增技术(rapid amplification of cDNA ends, RACE)是一种基于PCR从低丰度的转录本中快速扩增cDNA