- ￥2800 - 6200
- 上海研生
- YS-01X7175
- 国产
- 2025年07月10日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 肿瘤类型：
否
- 供应商：
上海研生
- 库存：
32
- 是否是肿瘤细胞：
否
- 物种来源：
兔
- 规格：
5×10⁵Cells/T25培养瓶
细胞名称：兔羊膜间质细胞
商品货号：YS-01X7175
产品规格：5×105cells/T25细胞培养瓶
方法简介：实验室分离的兔羊膜间质细胞采用组织贴块法并结合内皮细胞专用培养基培养筛选制备而来，细胞总量约为5×10⁵cells/瓶。
质量检测：实验室分离的兔羊膜间质细胞经CD31免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
兔羊膜间质细胞体外培养周期有限；建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养，兔羊膜间质细胞以此保证该细胞的最佳培养状态。
二、细胞培养状态
发货时发送细胞电子版照片
三、使用方法
客户收到细胞后，请按照以下方法进行操作。
1. 取出T25细胞培养瓶，用75%酒精消毒瓶身，拆下封口膜，放入37℃、5%CO2、饱和湿度的细胞培养箱中静置3-4h，以稳定细胞状态。
2. 贴壁细胞消化
1)吸出T25细胞培养瓶中的培养基，用PBS清洗细胞一次；
2)添加0.25%胰蛋白酶消化液1mL至T25培养瓶中，轻微转动培养瓶至消化液覆盖整个培养瓶底后，吸出多余胰蛋白酶消化液，
37℃温浴1-3min；倒置显微镜下观察，待细胞回缩变圆后，再加入5ml完全培养基终止消化；
3)用吸管轻轻吹打混匀，按传代比例接种T25培养瓶传代，然后补充新鲜的完全培养基至5mL，置于37℃、5%CO2、饱和湿度
的细胞培养箱中静置培养；
4)待细胞完全贴壁后，培养观察；之后按照换液频率更换新鲜的完全培养基。
3. 细胞收货脱落
1)收集所有细胞悬液，1000rpm，离心5min，保留沉淀；
2)添加0.25%胰蛋白酶消化液0.5mL至离心管中，重悬沉淀，放置于37℃消化3min(或4℃冰箱静置5-7min)；消化完向离心管内
加入5ml完全培养基终止消化；
3)经1000rpm，离心5min，丢弃上清，用5ml完全培养基(补加1%FBS，促进贴壁)重悬沉淀，接种于新的培养瓶内；
4)待细胞完全贴壁后，培养观察；之后按照换液频率更换新鲜的完全培养基(37℃预热)。
4. 细胞实验
因原代细胞贴壁特殊性，贴壁的原代细胞在消化后转移至其他实验器皿（如玻璃爬片、培养板、共聚焦培养皿等）时，需要对实验
器皿进行包被，以增强细胞贴壁性，避免细胞因没贴好影响实验；包被条件常选用鼠尾胶原Ⅰ（2-5μg/cm2） ，多聚赖氨酸PLL
（0.1mg/ml），明胶（0.1%），依据细胞种类而定。悬浮/半悬浮细胞无需包被。
原代细胞培养方法及注意事项：
1.准备：取各种已消毒的培养用品置于净化台面，紫外线消毒20分钟。开始工作前先洗手、75%酒精擦拭手至肘部。
2.布局：点燃酒精灯，安装吸管帽。
3.处理组织：把组织块置于烧杯中，用Hanks液漂洗2~3次，去除血污；如怀疑组织可能污染，可先置于含有青链霉素的混合液中30~60分钟。
4.剪切：用眼科剪把组织切成2~3毫米大小的块，以便于消化。加入比组织块总量多30~50倍的胰蛋白酶液，然后一并倒入三角烧瓶中，结扎瓶口或塞以胶塞。
5.消化：或用恒温水浴，或置于37℃温箱消化均可，消化中每隔20分钟应摇动一次，如用电磁恒温搅拌器消化更好。消化时间依组织块的大小和组织的硬度而定。
6.分离：在消化过程中见消化液发混浊时，可用吸管吸出少许消化液在镜下观察，如组织已分散成细胞团或单个细胞，立即终止消化，随即通过适宜不锈钢筛，滤掉尚未充分消化开的组织块。低速（500~1000转/分）离心消化液5分钟，吸出上清，加入适量含有血清的培养液。
7.计数：用计数板计数，如细胞悬液细胞密度过大，再补加培养液调整后，分装入培养瓶中。对大多数细胞来说，pH要求在7.2~7.4范围，培养液呈微红色，如颜色偏黄，说明液体变酸，可用NaHCO3调整。
8.培养：置于36.5℃温箱培养，如用CO2温箱培养，瓶盖需拧松半圈。
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文献和实验￣12天有经验的人可以触摸到胎儿，14￣16天可明显地摸到胎儿。6. 分娩雌兔在怀孕最后2￣3天期间，开始叼草筑巢并从自体的胸部和腹部拉毛铺垫其上为幼兔营造巢穴，此时孕兔食欲不振，一般在最后一天的凌晨左右分娩。在无其他因素影响的情况下，30分钟内可完成分娩过程。包在羊膜内的胎儿，带着胎盘一起产下，母兔咬破羊膜并吃掉羊膜和胎盘，舔净仔体上的羊水和血液。一般情况下，家兔的分娩过程不需人工辅助，并应尽可能保证环境的安静，防止雌兔受到惊吓而引起吃仔现象。7. 哺乳母兔通常在凌晨或夜间哺乳仔兔，且时间
雄性子宫 uterus masculinus （ 1）脊椎动物羊膜类雄性中缪勒管退化，但哺乳类缪勒管尾端有痕迹残存，左右相合形成盲囊，称雄性子宫。但因其直接与尿生殖窦相接，与其说是子宫，莫如说与阴道相当。也称雄性阴道（ vagina m-asculina），在食肉类和反刍类相当发达，可以区分出相当于阴道和相当于子宫的部位，而且又由于其与前列腺相接，故又有前列腺窦之称。 （ 2）部分哺乳类（例如鼠、兔），贮精囊在形态上与子宫类似，称为雄性子宫。
试剂和材料：1. 一抗：（1） ABCG2-----------------小鼠单克隆BXP-21---------1：100（2） 连接蛋白-43-----------兔多克隆CX43-------------1：100（3） 细胞角蛋白3（K3）-----小鼠单克隆AE5----------- 1：500（4） 细胞角蛋白12（K12）---兔多克隆J7-------------- 1：2002. 二抗；（1） 抗小鼠IgG-------------Alexa-488----
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