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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 肿瘤类型:
否
- 供应商:
上海研生
- 库存:
34
- 生长状态:
贴壁
- 是否是肿瘤细胞:
否
- 细胞形态:
圆形或椭圆形细胞
- 物种来源:
人
- 组织来源:
脑组织
- 规格:
5×10⁵Cells/T25培养瓶
基本信息:
细胞名称:人少突胶质细胞
组织来源:脑组织
商品货号:YS-01X8136
种属来源:人
产品规格:5×105cells/T25细胞培养瓶
包被条件:
培养基:原代少突胶质细胞培养体系
换液频率:每2-3天换液一次
生长特性:贴壁培养
细胞形态:圆形或椭圆形细胞
传代特性:细胞特性确定传代
传代比例:
消化液:0.25%胰蛋白酶
培养条件:气相: 空气,95%;CO2 ,5%
细胞简介:

少突胶质细胞是中枢神经系统中胶质细胞的重要组成部分,其主要功能是包绕神 经元的轴突形成髓鞘,协助神经电型号的跳跃式高效传递,维持和保护神经元的 正常功能。此外,少突胶质细胞还具有合成和分泌多种细胞因子来促进神经元、 神经胶质细胞的发育和存活等功能。
原代细胞试用的实验类型:

原代细胞不仅广泛应用于分子、细胞生物学和生物医学基础研究,如蛋白质组学、基因组学、细胞株(系)研究、DNA,RNA和遗传学研究等,还可应用于当今热门的
生物医药产业如药物筛选、药物代谢和毒理研究、癌症药物的研究等。在这些应用中几乎都涉及了几个最常见的且最基础的细胞实验,如下:
一、细胞增殖检测:
常见检测方法:CCK8检测法 ,MTT检测法,Brdu检测法,Edu检测法,平板克隆形成
二、细胞周期检测
常见检测方法:流式检测细胞周期,标记有丝分裂百分率法
三、细胞凋亡检测
常见检测方法:流式检测细胞凋亡,线粒体膜电位,活性氧检测,Hoechst染色,电镜,TUNEL
四、细胞转移能力检测
常见检测方法:细胞划痕实验,Transwell实验,Invasion实验

原代细胞培养方法及注意事项:


1.准备:取各种已消毒的培养用品置于净化台面,紫外线消毒20分钟。开始工作前先洗手、75%酒精擦拭手至肘部。
2.布局:点燃酒精灯,安装吸管帽。
3.处理组织:把组织块置于烧杯中,用Hanks液漂洗2~3次,去除血污;如怀疑组织可能污染,可先置于含有青链霉素的混合液中30~60分钟。
4.剪切:用眼科剪把组织切成2~3毫米大小的块,以便于消化。加入比组织块总量多30~50倍的胰蛋白酶液,然后一并倒入三角烧瓶中,结扎瓶口或塞以胶塞。
5.消化:或用恒温水浴,或置于37℃温箱消化均可,消化中每隔20分钟应摇动一次,如用电磁恒温搅拌器消化更好。消化时间依组织块的大小和组织的硬度而定。
6.分离:在消化过程中见消化液发混浊时,可用吸管吸出少许消化液在镜下观察,如组织已分散成细胞团或单个细胞,立即终止消化,随即通过适宜不锈钢筛,滤掉尚未充分消化开的组织块。低速(500~1000转/分)离心消化液5分钟,吸出上清,加入适量含有血清的培养液。
7.计数:用计数板计数,如细胞悬液细胞密度过大,再补加培养液调整后,分装入培养瓶中。对大多数细胞来说,pH要求在7.2~7.4范围,培养液呈微红色,如颜色偏黄,说明液体变酸,可用NaHCO3调整。
8.培养:置于36.5℃温箱培养,如用CO2温箱培养,瓶盖需拧松半圈。

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文献和实验在银浸染标本中,少突胶质细胞比星状胶质细胞小,其突起也较小而少,呈串珠状,故被称之为少突胶质细胞,但是现在用特异性免疫细胞化学染色显示的少突胶质细胞,其突起并不少,而且还有许多分支。根据少突胶质细胞的分布和位置可分为三种: ① 束间少突胶质细胞 (interfasicular oligodendrocyte) ,分布在中枢神经系统的白质的神经纤维束之间,成行排列,在胎儿和新生儿时期含量较多,而在髓鞘形成过程中迅速减少
少突胶质细胞来源于1-2 天的大鼠。断头后大鼠大脑收集到Ham’s F-12培养液中,移除脑膜和血管。皮质用机械匀浆进行匀浆然后将细胞悬液依次通过230μm和104μm尼龙网进行过滤。细胞通过1000rpm 7分钟离心进行收集,用添加12.5%胎牛血清的DMEM进行重悬细胞。最后以2.0×105 cells/cm2浓度将细胞接种于培养皿中,将培养皿维持在37°C,5%CO2潮湿环境中。3天后更换培养基,以后每两天更换一次。9-11天后细胞能够铺满培养皿。少突胶质细胞祖代生长在星形
学观察结果组织块24h开始贴壁,48~72h可见神经组织边缘游出少量细胞,主要为圆形或梭形。8~9d左右,细胞基本铺满培养孔。此时改用无血清条件培养基培养进行纯化。培养过程中,部分细胞死亡。12d左右获得的细胞胞体基本为呈圆形或多角型,直径约6~10μm。细胞核较大,胞质少。2.2 免疫组织化学染色结果培养的视神经少突胶质细胞的免疫组织化学染色GC蛋白阳性,未加一抗的呈阴性。染色结果显示成熟的少突胶质细胞突起丰富,互相形成蜘蛛网状。苏木素复染,异质细胞较少,90%以上为阳性细胞。3.讨论抑制神经
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