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文献和实验A. 0.1M枸橼酸溶液:称取21.01g枸橼酸(C6H8O7・H20)溶于1000ml蒸馏水中。 B. 0.1M枸橼酸钠溶液:称取29.41g枸橼酸钠(C6H5Na3O7・2H20)溶于1000ml蒸馏水中。 3.2 工作液: 取9ml A液和41ml B液加入450ml蒸馏水中,溶液pH值应为6.0 0.1 4、胰酶(Trypsin): 4.1 ZLI-9011胰蛋白酶消化液: 常用浓度为0.125%,即使用前将一滴试剂1胰酶溶液和三滴试剂2胰酶稀释液均匀混合
(Trypsin): 4.1 ZLI-9011胰蛋白酶消化液: 常用浓度为0.125%,即使用前将一滴试剂1胰酶溶液和三滴试剂2胰酶稀释液均匀混合(1:3稀释),则可直接滴加使用。胰酶的最终浓度可以根据使用者的要求进行调整,浓度范围可以从0.05%(1:10稀释)至0.25%(1:1稀释)。 4.2 ZLI-9010胰蛋白酶: 取0.05g或0.1g胰蛋白酶加入到100ml 0.05%或0.1% pH7.8的无水氯化钙水溶液中,溶解即可。 5、胃酶(Pepsin): 4%胃蛋白
干货!组织解离新手入门&4大踩坑现场与避坑指南|单细胞/原代细胞/流式必看
神经组织(脑、脂肪):对机械损伤极度敏感,必须用最温和的木瓜蛋白酶(Papain)。 · 严格过筛:重悬上机前,必须过40 μm/70 μm筛网,把未消化透的残渣和团块彻底拦截,保护昂贵的芯片和流式探针。 大坑四:细胞活着,但流式测不出目标标签(如CD4、CD8、CD31) 为什么会这样: ·用了烈性的胰蛋白酶(Trypsin),胰酶没有识别特异性,不仅消化了外基质,还把活细胞膜表面的表型受体蛋白破坏了。 绝招怎么破: · 做表型和测序严禁使用胰酶! ·推荐方案:强烈建议换用温和的“胶原酶(I / II
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