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文献和实验基因敲除模型:NLRP3−/−、GSDMD−/−、caspase-1/11−/−小鼠、RACK1ΔMΦ。 4、检测内容:LDH(乳酸脱氢酶)释放实验检测细胞毒性、ELISA 检测细胞因子分泌、WB 检测、免疫沉淀(IP)、pull down、质谱、EST12 晶体结构、共聚焦显微镜、小鼠结核感染模型等。 研究结果: 1、EST12(Rv1579c)诱导 GSDMD 介导的巨噬细胞焦亡 表达纯化 40 种 RD 区编码蛋白,通过 LDH 释放实验,发现 EST12(Rv1579c)具有明显的巨噬
Detection of Pyroptosis by Measuring Released Lactate Dehydrogenase Activity
Pyroptosis is a form of programmed, inflammatory cell death that is dependent on the activation of a cysteine protease caspase-1. Following caspase-1 activation via inflammasomes (including NLRP3, NLRC4, Nlrp1b, and AIM2), cells lose membrane
of BMDCs with established Nlrp3 inflammasome activators, and the measurement of activation by both ELISA and western blot. These methods can be useful for the study of potential inflammasome activators, and of the signaling pathways involved in inflammasome
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