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百徕普惠(北京)科技有限公司
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10块/盒
AN鉴定板(厌氧菌鉴定板),主要用于:
一、厌氧菌鉴定(包含各种乳酸菌、双歧杆菌);
二、厌氧菌、乳酸菌代谢实验;
三、需要与BUA培养基、AN接种液配合使用;
- Biolog AN微孔板通过微生物对微孔板中的不同碳源的利用及氧化情况进行测试,测试 使得有特征代谢的孔变成紫色,从而使微生物在测试板上显示出“代谢指纹图谱”1,2。
- 所有必要的营养物质以及生化试剂都被预先填充、干化在96个孔中。四唑类氧化还原 染料通过色度的变化来指示微生物对碳源的利用程度。
- 试验的操作过程非常简单。在平板上按照常规方法划线分离需要鉴定的微生物,然后 将分离的到的纯种用棉签挑到一种特殊的“凝胶”接种液(AN-IF)3中,配成指定细 胞浓度的菌悬液。将菌悬液按每孔100µl的量加到AN板后孵育。所有的孔在刚开始的 时候都是无色的,当孵育一段时间之后,那些能被细胞利用的碳源孔中的呼吸作用增 强了。增强的呼吸作用导致四唑氧化还原染料被还原,变成紫色。而阴性孔则保持无 色,就像没有碳源的阴性对照孔(A1)一样。
- 孵育后20-24小时后,通过AN板上显紫色孔所产生的指纹图谱同Biolog数据库中的数 据进行比对。如果找到匹配的,所分离出来的微生物得到鉴定 。
注意事项:
为获取准确且可重复的结果,请务必遵循下列建议:
- 纯培养是一切鉴定的前提,
- 使用专用培养基进行活化培养非常重要,同一菌株可能会由于接种前在不同的培养基上生 长而在鉴定时产生不同的代谢特征。
- 无菌操作,避免污染影响结果。
- 应尽量使用一次性玻璃器皿来处理所有细胞悬液和其他溶液。已经清洗过的玻璃器皿可能 含有微量的皂剂或洗涤剂,会影响到结果。
- 在使用前将AN微孔板及AN接种液预热到室温。一些菌种对冷冲击非常敏感。
- 准确校正浊度仪,使菌悬液浓度位于指定的浓度范围。请参考“接种液制备”这一部分内 容。
- AN鉴定板上包被的化学物质对温度和光敏感。AN微孔板请置于2-8℃冰箱,避光保存。如 孔颜色为深褐色表示鉴定板碳源已变质。一些孔本身就是黄色或浅红色,这是正常的。
- 请永远记住:你正在测试的是活细胞的代谢特性。一些菌种在受到应激作用(如温度、pH 及渗透压变化)时会失去代谢活力,哪怕是仅仅几分钟。为了从这些微孔板上获得可接受 的最佳效果,请意识到这些细胞是活的,并小心的对待它们。
- 检查 AN 鉴定板: 其包装袋里含有可吸附 O2的化学物质小袋,可使鉴定板处于厌氧状态。一旦外面的包 装打开,里面的包装袋会吸附空气,变成“枕头形状”。一旦包装打开,就不能再使用该鉴 定板。要将其带着外包装放于 2-8℃冰箱,避光保存。
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文献和实验世纪80年代初,美国BIOLOG公司开发了一种新的微生物鉴定方法-代谢指纹法,并将其应用于微生物的自动化检测。其原理是根据细菌对碳源(或氮源)利用的差异来区别和鉴定细菌,不同的细菌会利用不同碳源(或氮源)进入新陈代谢过程(称为呼吸),而对其他一些碳源(或氮源)则无法利用。将每种细菌能利用和不能利用的一系列碳源(或氮源)进行排列组合,就构成了该种细菌特定的代谢指纹,由于细菌在利用碳源进行呼吸时,会发生一系列的氧化-还原反应,产生电子。TTC(四
库数据比较后,得出鉴定结果。 4. 代谢指纹法:20世纪80年代初,美国BIOLOG公司开发了一种新的微生物鉴定方法-代谢指纹法,并将其应用于微生物的自动化检测。其原理是根据细菌对碳源(或氮源)利用的差异来区别和鉴定细菌,不同的细菌会利用不同碳源(或氮源)进入新陈代谢过程(称为呼吸),而对其他一些碳源(或氮源)则无法利用,将每种细菌能利用和不能利用的一系列碳源(或氮源)进行排列组合,就构成了该种细菌特定的代谢指纹,由于细菌在利用碳源进行呼吸时,会发生一系列的氧化-还原反应,产生电子,TTC
摘要:通过PCR,从E.coli K12 Y1090株系中扩增获得glgC基因,插入pUC19的PstI和SacI 位点之间,得到重组质粒pAGP。对所克隆的glgC基因进行全序列测定,结果表明,与已发表的序列相比,有7个核苷酸发生了改变,核苷酸顺序的同源性为99.4 %; 推导的氨基酸序列的同源性为99.2 %, 其中,第296位由赖氨酸变为谷氨酸。通过寡核苷酸介导的定点诱变,将第1007位核苷酸由G变为A,从而使第336位氨基酸由甘氨酸变为天门冬氨酸,将此glgC的突变基因定
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