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- 肿瘤类型:
否
- 供应商:
上海研生
- 库存:
21
- 生长状态:
贴壁
- 是否是肿瘤细胞:
否
- 细胞形态:
内皮细胞样
- 物种来源:
大鼠
- 组织来源:
皮肤组织
- 规格:
5×10⁵Cells/T25培养瓶
大鼠真皮微血管内皮细胞分离自真皮组织;真皮,位于表皮深层,向下与皮下组织相连,真皮结缔组织的胶原纤维和弹性纤维互相交织在一起,埋于基质内。其内分布着各种结缔组织细胞和大量的胶原纤维弹性纤维,使皮肤既有弹性,又有韧性。其由两层组成——乳头层与网状层。真皮的结构组成是胶原蛋白、弹性纤维以及基质。微血管内皮细胞(MEC)在炎症反应、肿瘤生长、创面愈合过程中起着非常重要的作用。在创面愈合研究领域,由于表皮细胞、真皮成纤维细胞体外培养技术的成熟,人们对这两种细胞早已进行了大量深入的研究。与之相比,对参与创面愈合过程的另一种主要细胞——真皮微血管内皮细胞,则因其体外分离培养技术的困难而使相关的研究受限。
基本信息:
细胞名称:大鼠真皮微血管内皮细胞
组织来源:皮肤组织
商品货号:YS-01X7588
种属来源:大鼠
产品规格:5×105cells/T25细胞培养瓶
包被条件:PLL(0.1mg/ml),明胶(0.1%)
培养基:含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等
换液频率:每2-3天换液一次
生长特性:贴壁
细胞形态:内皮细胞样
传代特性:可传2-3代
传代比例:1:2
消化液:0.25%胰蛋白酶
培养条件:气相:空气,95%;CO2,5%
原代细胞试用的实验类型:

原代细胞不仅广泛应用于分子、细胞生物学和生物医学基础研究,如蛋白质组学、基因组学、细胞株(系)研究、DNA,RNA和遗传学研究等,还可应用于当今热门的
生物医药产业如药物筛选、药物代谢和毒理研究、癌症药物的研究等。在这些应用中几乎都涉及了几个最常见的且最基础的细胞实验,如下:
一、细胞增殖检测:
常见检测方法:CCK8检测法 ,MTT检测法,Brdu检测法,Edu检测法,平板克隆形成
二、细胞周期检测
常见检测方法:流式检测细胞周期,标记有丝分裂百分率法
三、细胞凋亡检测
常见检测方法:流式检测细胞凋亡,线粒体膜电位,活性氧检测,Hoechst染色,电镜,TUNEL
四、细胞转移能力检测
常见检测方法:细胞划痕实验,Transwell实验,Invasion实验


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原代细胞培养方法及注意事项:
1.准备:取各种已消毒的培养用品置于净化台面,紫外线消毒20分钟。开始工作前先洗手、75%酒精擦拭手至肘部。
2.布局:点燃酒精灯,安装吸管帽。
3.处理组织:把组织块置于烧杯中,用Hanks液漂洗2~3次,去除血污;如怀疑组织可能污染,可先置于含有青链霉素的混合液中30~60分钟。
4.剪切:用眼科剪把组织切成2~3毫米大小的块,以便于消化。加入比组织块总量多30~50倍的胰蛋白酶液,然后一并倒入三角烧瓶中,结扎瓶口或塞以胶塞。
5.消化:或用恒温水浴,或置于37℃温箱消化均可,消化中每隔20分钟应摇动一次,如用电磁恒温搅拌器消化更好。消化时间依组织块的大小和组织的硬度而定。
6.分离:在消化过程中见消化液发混浊时,可用吸管吸出少许消化液在镜下观察,如组织已分散成细胞团或单个细胞,立即终止消化,随即通过适宜不锈钢筛,滤
掉尚未充分消化开的组织块。低速(500~1000转/分)离心消化液5分钟,吸出上清,加入适量含有血清的培养液。
7.计数:用计数板计数,如细胞悬液细胞密度过大,再补加培养液调整后,分装入培养瓶中。对大多数细胞来说,pH要求在7.2~7.4范围,培养液呈微红色,如颜色
偏黄,说明液体变酸,可用NaHCO3调整。
8.培养:置于36.5℃温箱培养,如用CO2温箱培养,瓶盖需拧松半圈。
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文献和实验体外培养模型已被广泛应用于血脑屏障的研究、脑血管疾病的病理生理及分子生物学研究、新药筛选、脑微血管内皮细胞生理生化及药理学研究等领域。而大多数体内实验采用大鼠为动物模型,而且大鼠具有较多的细胞生物学研究所需的抗体可用,因此进行大鼠脑微血管内皮细胞的培养具有重要的意义。自从Panula等[2]首次成功培养大鼠脑微血管内皮细胞以来,国内外有关大鼠脑微血管内皮细胞的分离和培养方法已有较多的报道,我们发现国内的方法多以组织匀浆、两次尼龙网过滤分离脑微血管段为主[3,4],也有采用酶消化、梯度离心及尼龙网过滤
【摘 要】目的:培养脑皮质微血管内皮细胞。方法:取1~5d Wistar乳鼠脑皮质,经不同孔径的筛网过滤后,用胶原酶振荡消化获得的微血管内皮细胞进行培养,用Ⅷ因子相关抗原免疫组化鉴定。结果:培养的细胞呈单层贴壁生长,7~9d呈典型的铺路卵石样征象。结论:建立了一种简便易行的培养脑皮质微血管内皮细胞的方法。【关键词】 细胞培养;微血管内皮细胞;Wistar大鼠脑微血管内皮细胞是构成血脑屏障的主要成分,具有特殊的形态结构和机能,在许多病理状态下起重要作用[1]。建立脑微血管内皮细胞体外培养,可获
。 选用80克SD大鼠(雌雄不限,购自复旦大学实验动物部),1%戊巴比妥钠(1ml/100g)腹腔注射麻醉,75%酒精浸泡5min消毒,将大鼠移至超净台进行操作,止血钳固定四肢,逐层打开胸腔,暴露心脏,剪开心包,由升主动脉处剪下心脏,放入D-Hanks平衡盐缓冲液中.冲净心腔中的血液,辨清心脏解剖结构,去除大血管、左右心房以及右心室和室间隔,保留左心室,小心去除心内膜及心外膜,用眼科剪剪碎余下的心室肌约2mm见方,滴加1ml进口胎牛血清.均匀接种于处理过的50ml培养瓶中,放入37℃、5%CO2
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