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- 技术资料
- 细胞类型:
人细胞系
- 供应商:
上海邦景
- 库存:
28
- 生长状态:
贴壁生长
- 是否是肿瘤细胞:
是
- 物种来源:
人
- 规格:
1×10^6cells
选择培养基没有一定的标准:
(1)建立某种细胞株所用的培养基应该是培养这种细胞的培养基。可以查阅参考文献,或在购买细胞株时咨询。
(2) 其它实验室惯用的培养基不妨一试,许多培养基可以适合多种细胞。
(3) 根据细胞株的特点、实验的需要来选择培养基。如小鼠细胞株多选 RPMI1640
(4)用多种培养基培养目的细胞,观察其生长状态,可以用生长曲线、集落形成率等指标判断,根据实验结果选择最佳培养基,这是最客观的方法,但比较繁琐。
细胞系具有易培养、品类多、价格便宜、无限传代等优点,也非常容易在培养、冻存中发生错误鉴定及交叉污染的问题。
细胞系的实验步骤:
一、实验前准备工作
1、提前24h取12mL DMEM(abs9483)和RPMI 1640(abs9484)完全培养基(含10%FBS(abs972),下同)于50mL离心管内,置于4℃冰箱中预冷;
2、将分装好的Matrigel基质胶(abs9490)提前24h从-20℃放入4℃,使其融化成液体状态;
3、将无菌的1mL移液器枪头放入无菌50mL离心管内,置-20℃冰箱预冷。
二、琼脂糖包被96孔板
1、准确量取6mL RPMI 1640培养基(或DMEM培养基)于2个10mL的注射玻璃瓶内,加入90mg琼脂糖(abs44056213),盖塞后放入80℃的水浴锅内加热溶解30min;
2、加热结束后,将注射瓶放入灭菌锅内,115℃灭菌30min;
3、灭菌完成后,迅速取出注射瓶放入超净台内。将注射瓶内的琼脂糖溶液倒入无菌的加样槽中,用多通道移液器以每孔60μL的量加入96孔板内。注意:由于琼脂糖溶液在室温时会凝固,因此从灭菌锅内取出琼脂糖溶液后
一定要快速转移至超净台内并迅速加入至96孔板中。此外,为保证加样时琼脂糖不冷却,需要同时灭菌加样槽和100μL的移液器枪头。
4、加入完成后,96孔板要保持水平约30min使孔内的琼脂糖凝固。
如何正确地使用细胞系?
首先做好细胞系的保存,尽量多的保存早期分裂增殖的细胞系。因为随着传代次数增多,细胞系的稳定性下降,遗传物质,细胞形态,倍增时间等都可能发生改变。其次,熟悉所用细胞系的增殖和生长特点,熟悉它对营养物质的需求。比如,倍增时间,培养液需求特征,血清浓度要求等等。最后,定期做好细胞系鉴定工作,尤其是从外部借来使用的细胞系,要求其遗传谱图与细胞库中的一致。这点关系到你研究研究结果的可靠性和可重复性。
基础研究
(1)药物作用机理
(2)基因功能
(3)疾病发生机理
2、生物制药
(1)疫苗生产:如病毒性疫苗(肝炎病毒疫苗、艾滋病疫苗等)、肿瘤疫苗(多肽疫苗)等。
(2)基因工程药物生产:如在临床医学中具有治疗价值的一些细胞生长因子如干扰素、粒细胞生长因子、胸腺肽等。
(3)诊断用和药用单克隆抗体生产。
(4)细胞工程药物生产:生物细胞内的一些生物活性多肽,生物活性物质等。
细胞系的用途有哪些?
1、科学研究:药物研究开发与基础研究药物研究与开发
(1)新药筛选:如化学合成药物药效研究、中药有效成分筛选与鉴定等。
(2)疫苗研究与开发:如病毒性疫苗的研究与开发(肝炎病毒疫苗、艾滋病疫苗等)、肿瘤疫苗(多肽疫苗)等。
(3)基因工程药物研究与开发:如干扰素研究与开发,细胞生长因子研究与开发等。
(4)细胞工程药物研究与开发:生物活性多肽研究与开发,人参皂甙、紫杉醇等生物活性成分研究与开发。
(5)单克隆抗体制备:包括诊断用单克隆抗体,治疗用单克隆抗体。
下列是公司正在出售的产品:
MEF, 小鼠胚胎成纤维细胞 兔血管内皮细胞粘附分子1(VCAM-1/CD106)ELISA 试剂盒 Goat Anti-Bovine IgG/Alexa Fluor 647 Alexa Fluor 647标记的羊抗IgG 0.1ml
FAM82B: 微管相关蛋白FAM82B抗体 NRK-52E,大鼠肾细胞 Rattus
hMo-PB-c single donorpre-screened 外周血来源的人类单核细胞,单一来源,预选型 10 million 人绒毛间充质成纤维细胞HVMF 兔血管内皮细胞生长因子(VEGF)ELISA 试剂盒 Goat Anti-Bovine IgG/PE-Cy5.5 PE-Cy5.5标记的羊抗IgG 0.1ml
Fibrinogen alpha chain: 纤维蛋白原A链抗体 小鼠髋动脉内皮细胞;PIEC
EJ(人膀胱癌细胞) 5×106cells/瓶×2 兔血管紧张素Ⅱ(ANG-Ⅱ)ELISA 试剂盒 Goat Anti-Bovine IgG/PE-Cy7 PE-Cy7标记的羊抗IgG 0.1ml
PC14人肺癌细胞 PC14 human lung cancer cells DMEM+10% FBS 大鼠胃动蛋白1(GKN1)ELISA试剂盒 VEGF-B(Human Vascular Endothelial cell Growth Factor B) 人血管内皮细胞生长因子B 96T
phospho-MAP4K1(Ser171): 0酸化造血祖细胞激酶抗体 ERBB2 Others Human 人 ErbB2 / HER2 人细胞裂解液 (阳性对照)
CL-0291MKN-28(人胃癌高转移细胞)5×106cells/瓶×2 大鼠胃蛋白酶原C(PGC)ELISA试剂盒 PGF2 Alpha 大鼠前列腺素F2α 96T
PRAK: p38调节/激活蛋白激酶抗体 小鼠诱导性多潜能干细胞;PUMC-mips-C2
P3/NSI/1-Ag4-1 [NS-1] (小鼠骨髓瘤细胞) 5×106cells/瓶×2 MC3T3-E1 Subclone 14(小鼠原成骨细胞) 大鼠胃蛋白酶原A(PGA)ELISA试剂盒 Beta-EPR(Mouse Beta-Endorphin receptor) 小鼠β内啡肽受体
HT细胞OS-RC-2 人肾癌细胞 大鼠胆囊收缩素/肠促胰酶肽(CCK)ELISA 试剂盒 NN-T4(Human Neonatal Thyroxine) 人新生甲状腺素 96T
PDHA1: 酸脱氢酶α1抗体 SF9细胞,昆虫卵巢细胞 人卵巢癌细胞,Sw626细胞 人生发基质细胞裂解物HHGMCL
LBP Others Human 人 LBP / Lipopolysaccharide Binding 人细胞裂解液 (阳性对照) 大鼠胆囊收缩素(CCK)ELISA试剂盒 INS(Human Insulin) 人胰岛素 96T
phospho-PDHA1(Ser293): 0酸化酸脱氢酶α1抗体 大耳山羊肺细胞;LDG-1
MEF, 小鼠胚胎成纤维细胞 大鼠胆绿素还原酶A(BLVRA)ELISA试剂盒 Human C-Peptide 人C肽 96T
IDO: 吲哚胺2,3-双加氧酶抗体 小鼠海马趾星形胶质细胞MA-h
CCL3 Protein Mouse 重组小鼠 CCL3 / Mip1a 蛋白 人程序性死亡配体-1(PDL1)ELISA试剂盒 IL-6R Alpha (IL6R-alpha) 白细胞介素6受体α抗原 0.5mg
IL-19: 白细胞介素19抗体 HA Others H7N9 甲型流感 H7N9 (A/Pigeon/Shanghai/S1069/2013) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照)
人淋巴血管内皮细胞完全培养基 100mL 人程序性死亡分子-1(PD-1)ELISA 试剂盒 gp130/IL-6R 白介素-6受体抗原 0.5mg
Inhibin Alpha: 抑制素A/Inhibin α抗体 猴肾细胞;Vero IgCD4 人巨核细胞白血病,CHRF细胞 SK-N-MC(神经上皮瘤细胞)
(1)建立某种细胞株所用的培养基应该是培养这种细胞的培养基。可以查阅参考文献,或在购买细胞株时咨询。
(2) 其它实验室惯用的培养基不妨一试,许多培养基可以适合多种细胞。
(3) 根据细胞株的特点、实验的需要来选择培养基。如小鼠细胞株多选 RPMI1640
(4)用多种培养基培养目的细胞,观察其生长状态,可以用生长曲线、集落形成率等指标判断,根据实验结果选择最佳培养基,这是最客观的方法,但比较繁琐。
| 产品名称 | 规格 | 货号 |
| HT细胞 | 1×10^6cells | BJ-X6232 |
细胞系的实验步骤:
一、实验前准备工作
1、提前24h取12mL DMEM(abs9483)和RPMI 1640(abs9484)完全培养基(含10%FBS(abs972),下同)于50mL离心管内,置于4℃冰箱中预冷;
2、将分装好的Matrigel基质胶(abs9490)提前24h从-20℃放入4℃,使其融化成液体状态;
3、将无菌的1mL移液器枪头放入无菌50mL离心管内,置-20℃冰箱预冷。
二、琼脂糖包被96孔板
1、准确量取6mL RPMI 1640培养基(或DMEM培养基)于2个10mL的注射玻璃瓶内,加入90mg琼脂糖(abs44056213),盖塞后放入80℃的水浴锅内加热溶解30min;
2、加热结束后,将注射瓶放入灭菌锅内,115℃灭菌30min;
3、灭菌完成后,迅速取出注射瓶放入超净台内。将注射瓶内的琼脂糖溶液倒入无菌的加样槽中,用多通道移液器以每孔60μL的量加入96孔板内。注意:由于琼脂糖溶液在室温时会凝固,因此从灭菌锅内取出琼脂糖溶液后
一定要快速转移至超净台内并迅速加入至96孔板中。此外,为保证加样时琼脂糖不冷却,需要同时灭菌加样槽和100μL的移液器枪头。
4、加入完成后,96孔板要保持水平约30min使孔内的琼脂糖凝固。
如何正确地使用细胞系?
首先做好细胞系的保存,尽量多的保存早期分裂增殖的细胞系。因为随着传代次数增多,细胞系的稳定性下降,遗传物质,细胞形态,倍增时间等都可能发生改变。其次,熟悉所用细胞系的增殖和生长特点,熟悉它对营养物质的需求。比如,倍增时间,培养液需求特征,血清浓度要求等等。最后,定期做好细胞系鉴定工作,尤其是从外部借来使用的细胞系,要求其遗传谱图与细胞库中的一致。这点关系到你研究研究结果的可靠性和可重复性。
基础研究
(1)药物作用机理
(2)基因功能
(3)疾病发生机理
2、生物制药
(1)疫苗生产:如病毒性疫苗(肝炎病毒疫苗、艾滋病疫苗等)、肿瘤疫苗(多肽疫苗)等。
(2)基因工程药物生产:如在临床医学中具有治疗价值的一些细胞生长因子如干扰素、粒细胞生长因子、胸腺肽等。
(3)诊断用和药用单克隆抗体生产。
(4)细胞工程药物生产:生物细胞内的一些生物活性多肽,生物活性物质等。
细胞系的用途有哪些?
1、科学研究:药物研究开发与基础研究药物研究与开发
(1)新药筛选:如化学合成药物药效研究、中药有效成分筛选与鉴定等。
(2)疫苗研究与开发:如病毒性疫苗的研究与开发(肝炎病毒疫苗、艾滋病疫苗等)、肿瘤疫苗(多肽疫苗)等。
(3)基因工程药物研究与开发:如干扰素研究与开发,细胞生长因子研究与开发等。
(4)细胞工程药物研究与开发:生物活性多肽研究与开发,人参皂甙、紫杉醇等生物活性成分研究与开发。
(5)单克隆抗体制备:包括诊断用单克隆抗体,治疗用单克隆抗体。
下列是公司正在出售的产品:
MEF, 小鼠胚胎成纤维细胞 兔血管内皮细胞粘附分子1(VCAM-1/CD106)ELISA 试剂盒 Goat Anti-Bovine IgG/Alexa Fluor 647 Alexa Fluor 647标记的羊抗IgG 0.1ml
FAM82B: 微管相关蛋白FAM82B抗体 NRK-52E,大鼠肾细胞 Rattus
hMo-PB-c single donorpre-screened 外周血来源的人类单核细胞,单一来源,预选型 10 million 人绒毛间充质成纤维细胞HVMF 兔血管内皮细胞生长因子(VEGF)ELISA 试剂盒 Goat Anti-Bovine IgG/PE-Cy5.5 PE-Cy5.5标记的羊抗IgG 0.1ml
Fibrinogen alpha chain: 纤维蛋白原A链抗体 小鼠髋动脉内皮细胞;PIEC
EJ(人膀胱癌细胞) 5×106cells/瓶×2 兔血管紧张素Ⅱ(ANG-Ⅱ)ELISA 试剂盒 Goat Anti-Bovine IgG/PE-Cy7 PE-Cy7标记的羊抗IgG 0.1ml
PC14人肺癌细胞 PC14 human lung cancer cells DMEM+10% FBS 大鼠胃动蛋白1(GKN1)ELISA试剂盒 VEGF-B(Human Vascular Endothelial cell Growth Factor B) 人血管内皮细胞生长因子B 96T
phospho-MAP4K1(Ser171): 0酸化造血祖细胞激酶抗体 ERBB2 Others Human 人 ErbB2 / HER2 人细胞裂解液 (阳性对照)
CL-0291MKN-28(人胃癌高转移细胞)5×106cells/瓶×2 大鼠胃蛋白酶原C(PGC)ELISA试剂盒 PGF2 Alpha 大鼠前列腺素F2α 96T
PRAK: p38调节/激活蛋白激酶抗体 小鼠诱导性多潜能干细胞;PUMC-mips-C2
P3/NSI/1-Ag4-1 [NS-1] (小鼠骨髓瘤细胞) 5×106cells/瓶×2 MC3T3-E1 Subclone 14(小鼠原成骨细胞) 大鼠胃蛋白酶原A(PGA)ELISA试剂盒 Beta-EPR(Mouse Beta-Endorphin receptor) 小鼠β内啡肽受体
HT细胞OS-RC-2 人肾癌细胞 大鼠胆囊收缩素/肠促胰酶肽(CCK)ELISA 试剂盒 NN-T4(Human Neonatal Thyroxine) 人新生甲状腺素 96T
PDHA1: 酸脱氢酶α1抗体 SF9细胞,昆虫卵巢细胞 人卵巢癌细胞,Sw626细胞 人生发基质细胞裂解物HHGMCL
LBP Others Human 人 LBP / Lipopolysaccharide Binding 人细胞裂解液 (阳性对照) 大鼠胆囊收缩素(CCK)ELISA试剂盒 INS(Human Insulin) 人胰岛素 96T
phospho-PDHA1(Ser293): 0酸化酸脱氢酶α1抗体 大耳山羊肺细胞;LDG-1
MEF, 小鼠胚胎成纤维细胞 大鼠胆绿素还原酶A(BLVRA)ELISA试剂盒 Human C-Peptide 人C肽 96T
IDO: 吲哚胺2,3-双加氧酶抗体 小鼠海马趾星形胶质细胞MA-h
CCL3 Protein Mouse 重组小鼠 CCL3 / Mip1a 蛋白 人程序性死亡配体-1(PDL1)ELISA试剂盒 IL-6R Alpha (IL6R-alpha) 白细胞介素6受体α抗原 0.5mg
IL-19: 白细胞介素19抗体 HA Others H7N9 甲型流感 H7N9 (A/Pigeon/Shanghai/S1069/2013) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照)
人淋巴血管内皮细胞完全培养基 100mL 人程序性死亡分子-1(PD-1)ELISA 试剂盒 gp130/IL-6R 白介素-6受体抗原 0.5mg
Inhibin Alpha: 抑制素A/Inhibin α抗体 猴肾细胞;Vero IgCD4 人巨核细胞白血病,CHRF细胞 SK-N-MC(神经上皮瘤细胞)
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