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IP类实验检测服务
信帆生物提供IP类实验服务,丰富的项目经验确保实验重复性,已进行多样本间的比较分析,真正一站式服务。每张膜(1-3个样品),客户需提供新鲜冰冻组织或者细胞及抗体。

免疫共沉淀(Co-IP 蛋白与蛋白)
免疫共沉淀(Co-Immunoprecipitation)是以抗体和抗原之间的专一性作用为基础的用于研究蛋白质相互作用的经典方法。是确定两种蛋白质在完整细胞内生理性相互作用的有效方法。 当细胞在非变性条件下被裂解时,完整细胞内存在的许多蛋白质-蛋白质间的相互作用被保留了下来。当用预先固化在agarose beads上的蛋白质A的抗体免疫沉淀A蛋白,那么与A蛋白在体内结合的蛋白质B也能一起沉淀下来。再通过蛋白变性分离,对B蛋白进行检测,进而证明两者间的相互作用。 这种方法得到的目的蛋白是在细胞内与兴趣蛋白天然结合的,符合体内实际情况,得到的结果可信度高。这种方法常用于测定两种目标蛋白质是否在体内结合;也可用于确定一种特定蛋白质的新的作用搭档。

Clip实验(RNA-蛋白相互作用)
核小体组蛋白可以发生多种翻译后的共价修饰,如乙酰化、甲基化、磷酸化、泛素化等,这些共价修饰与真核基因的表达密切相关。根据“组蛋白密码"假说,组蛋白的各种共价修饰的组合会以协同或拮抗的方式诱导特异的下游生物学功能,因此,ChIP也为研究组蛋白修饰在基因表达中的作用,全面阐明真核基因的表达调控机制提供了强有力的研究工具。
该技术主要应用于:
1.组蛋白修饰酶的抗体作为“生物标记"
2.转录调控分析
3.药物开发研究
4.有丝分裂研究
5.DNA损失与凋亡分析

MeRIP-PCR(m6A RNA甲基化)
MeRIP-Seq (methylated RNA immunoprecipitation sequencing)结合RNA-蛋白免疫共沉淀和高通量测序技术,可实现全转录组水平上RNA甲基化分析。由于甲基化修饰约占所有RNA修饰的60% 以上,而N6-甲基腺嘌呤(N6-methyladenosine,m6A),作为最常见的一种转录后修饰,介导了超过80%的RNA甲基化。基于MeRIP-Seq分析RNA甲基化模式,加速了癌症发生和转移、胚胎发育、脂类代谢、环状RNA翻译和DNA损伤修复等生物学功能和作用机制的研究。
服务类型如下:
免疫共沉淀(Co-IP 蛋白与蛋白)
CHIP实验(DNA-蛋白相互作用)
RIP技术(RNA结合蛋白免疫沉淀)
Clip实验(RNA-蛋白相互作用)
MeRIP-PCR(m6A RNA甲基化)
IP类实验检测服务
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文献和实验Chromatin IP (CHIP assay) This protocol has some minor modification to the protocol described in Strahl-Bolsinger S. et al. [1997, Gen & Dev 11, p83-93] and was obtained from Flick K. (The Scripps Research Institute).
蛋白质-蛋白质相互作用(PPI)对解析生命活动过程与疾病发生发展过程至关重要。随着时代发展,虽然大规模、高通量的生物学研究手段大大促进了蛋白质相互作用的预测,但这种预测还需要进一步利用体外和体内系统进行验证。分析蛋白质互作的方法多种多样,本篇文章为大家介绍以下几种互作分析技术: 免疫共沉淀 Co-IP 免疫沉淀 (IP)、免疫共沉淀 (Co-IP)和 pull-down 都是常用的从复杂的混合样品中获取目标分子,以进行下一步分析的方法,如检测蛋白质能否相互作用。在此类实验中,被研究的蛋白质称为
PHI/Ca2+/AMPK 信号通路的激活。TRPA1 抑制剂 HC030031 预处理显著抑制了 PHI 诱导的 P-AMPK 和 P-CaMKⅡ增加,并显著减少了 PHI 诱导的 Ca2+荧光。PHD2 shRNA 组中 TRPA1 蛋白水平显著高于对照组。这些结果强烈表明 TRPA1 在 PHD 诱导的 Ca2+释放途径中发挥着至关重要的作用。 图 3 慢病毒介导的特异性 shRNA 对 PHD2、RyR2 和 IP3R 的敲低效果。 案例 3:慢病毒递送高灵敏度的报告
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