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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 供应商:
上海联祖
- 库存:
47
- 检测方法:
微量法、可见分光光度法
- 规格:
100管/96样/50管/48样
| 规格: | 100管/96样 | 产品价格: | ¥409.5 |
|---|---|---|---|
| 规格: | 50管/48样 | 产品价格: | ¥320.0 |
| 产品名称 | 半胱氨酸(Cys)含量测试盒 |
| 规格 | 100管/96样 50管/48样 |
| 测试方法 | 微量法、可见分光光度法 |
| 货号 | LZ-S01118 |
商品介绍:
测定意义
蛋白质含有三种含硫氨基酸:甲硫氨酸、胱氨酸和Cys。其中,Cys是唯一一种含有巯基的含硫氨基酸,从甲硫氨酸转化而来,并且可与胱氨酸互相转化。Cys参与蛋白质二硫键的形成,经常是蛋白质活性中心的组成部分,还可以为其它生理生化反应提供巯基。此外,Cys大量积聚在皮肤和粘膜表面,在角蛋白生成中维持重要的琉基酶的活性,并且补充硫基,以维持皮肤的正常代谢,调节表皮最下层的色素细胞生成的底层黑色素。具有美白、解毒、改善炎症和过敏性皮肤等作用。
测定原理
半胱氨酸与磷钨酸反应,可将磷钨酸还原成钨蓝,在600nm处有吸收峰,通过测定钨蓝的生成量,即可计算出半胱氨酸含量。
实验中所需仪器及设备
可见分光光度计、低温离心机、掌上离心机、可调式移液枪、1ml玻璃比色皿、双蒸水
注意事项:
1.阳性对照H2O2一般使用浓度为100 μM (推荐浓度50-200 μM,具体依细胞类型而定) 。通常刺激后30 min-4 h可以观察到显著的活性氧水平升高。对于不同的细胞,活性氧阳性对照的效果可能有较大的差别。如果在刺激后30 min内观察不到活性氧的升高,可延长诱导时间或适当提高活性氧阳性对照的浓度。如果荧光信号过强,可缩短诱导时间或适当降低活性氧阳性对照的浓度。
2.实验过程中,如果阴性对照细胞荧光也比较强,可以按照1:2000-1:5000 稀释荧光探针DCFH-DA,使DCFH-DA的终浓度为 2-5 μM。探针装载的时间可在15-60 min 内适当进行调整,尽量缩短读片时的曝光时间,并且试验组、对照组曝光时间需保持一致。
活性氧阳性对照 (H2O2) 仅仅用于作为阳性对照的样品,并非所有试验组样品中都需加入活性氧阳性对照。
3.探针装载后,一定要洗净未进入细胞内的探针,否则会导致背景较高。
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