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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 供应商:
上海联祖
- 库存:
44
- 检测方法:
微量法、可见分光光度法
- 规格:
100管/96样/50管/48样
| 规格: | 100管/96样 | 产品价格: | ¥357.5 |
|---|---|---|---|
| 规格: | 50管/48样 | 产品价格: | ¥195.0 |
| 产品名称 | 细胞色素b5含量测试盒 |
| 规格 | 100管/96样 50管/48样 |
| 测试方法 | 微量法、可见分光光度法 |
| 货号 | LZ-S01266 |
商品介绍:
测定意义
细胞色素P450酶是一组主要存在于肝脏的同工酶,在外源物质代谢中具有重要作用,尤其是药物和毒物的代谢。细胞色素P450和细胞色素b5是P450酶系的两个血红素蛋白,其比值的变化与P450代谢活性密切相关。
测定原理:
氧化型细胞色素b5经连二亚还原后,在424nm处有最大吸收峰,通过测定424nm和490nm处吸光值的差异,即可计算出细胞色素b5的含量。
自备仪器和用品:
普通离心机,超速离心机、可调式移液枪、紫外分光光度计/酶标仪、微量玻璃比色皿/96孔板、和蒸馏水。
注意事项:
1.阳性对照H2O2一般使用浓度为100 μM (推荐浓度50-200 μM,具体依细胞类型而定) 。通常刺激后30 min-4 h可以观察到显著的活性氧水平升高。对于不同的细胞,活性氧阳性对照的效果可能有较大的差别。如果在刺激后30 min内观察不到活性氧的升高,可延长诱导时间或适当提高活性氧阳性对照的浓度。如果荧光信号过强,可缩短诱导时间或适当降低活性氧阳性对照的浓度。
2.实验过程中,如果阴性对照细胞荧光也比较强,可以按照1:2000-1:5000 稀释荧光探针DCFH-DA,使DCFH-DA的终浓度为 2-5 μM。探针装载的时间可在15-60 min 内适当进行调整,尽量缩短读片时的曝光时间,并且试验组、对照组曝光时间需保持一致。
活性氧阳性对照 (H2O2) 仅仅用于作为阳性对照的样品,并非所有试验组样品中都需加入活性氧阳性对照。
3.探针装载后,一定要洗净未进入细胞内的探针,否则会导致背景较高。
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文献和实验细胞色素b5 存于高等动物内质网膜的一种细胞色素。可从兔肝微粒体中提纯。因为与膜结合,用蛋白酶或表面活性剂处理可以使其溶解。还原型和氧化型的最大吸收光谱分别为 555、 526、 423和 414毫微米,分子量为 12, 500,氧化还原电位+ 0.02V。可由同样内质网膜内的还原酶通过 NADH进行还原。还原型 b5与被称为氰感受因子的酶一起,参与由氧将饱和酰基辅酶 A转变成不饱和酰基辅酶 A的脂肪酸不饱和化反应。
细胞色素b5存于高等动物内质网膜的一种细胞色素。可从兔肝微粒体中提纯。因为与膜结合,用蛋白酶或表面活性剂处理可以使其溶解。还原型和氧化型的最大吸收光谱分别为555、526、423和414毫微米,分子量为12500,氧化还原电位+0.02V。可由同样内质网膜内的还原酶通过NADH进行还原。还原型b5与被称为氰感受因子的酶一起,参与由氧将饱和酰基辅酶A转变成不饱和酰基辅酶A的脂肪酸不饱和化反应。
一、实验目的 (1)通过细胞色序C的制备,了解制备蛋白质制品的一般原理和步骤 (2)掌握制备细胞色素C的操作技术及含量的测定方法 二、实验原理 细胞色素是一类含有铁 啉基团的电子传递蛋白,只存在于需氧细胞中。细胞色素在线粒体内膜上起传递电子的作用。细胞色C (cytochrome c) 是细胞色素一种。它在线粒体呼吸链上位于细胞色素B 和细胞色素氧化酶之间,是呼吸链的一个重要组成部分。每分子细胞色素C含有一个血红素和一条多肽链。现已从许多来源获得细胞色素C结晶,并已对
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