总胆固醇(T-CHO)测试盒

总胆固醇(T-CHO)测试盒
（分光光度法） 三、操作过程:
1、样本处理:
①、血清(浆)：直接测定，如超过线性范围用生理盐水稀
释后测定。
②、培养液样本：吸取培养液，1000 转/分，离心 10 分
钟，取上清测定。[注]：一般建议细胞密度在 100
万个/mL 以上。
③、组织样本：准确称取组织重量，按重量(g):体积
(mL)=1:9 的比例，加入 9 倍体积的匀浆介质，冰水
浴条件下机械匀浆，2500 转/分，离心 10 分钟，取
上清液待测。[注]:如组织样本均为非高脂样本，匀
浆介质统一用磷酸盐缓冲液(0.1mol/L pH 7.4)或生
理盐水进行匀浆提取；如组织样本均为高脂样本或
部分为高脂样本，匀浆介质可统一用无水乙醇进行
匀浆提取。
④、细胞样本：
A、细胞收集:将制备好的细胞悬液取出，1000 转/分，
离心 10 分钟，弃上清液，留细胞沉淀；用等渗缓冲
液（推荐 0.1mol/L、pH7～7.4 磷酸盐缓冲液）清洗
1～2 次，同样 1000 转/分，离心 10 分钟，弃上清液，
留细胞沉淀；
B、细胞破碎:加入 0.2～0.3mL 的匀浆介质（推荐
0.1mol/L、pH7～7.4 磷酸盐缓冲液或生理盐水）进
行匀浆，冰水浴条件下超声破碎(功率 300W，3～5
秒/次，间隔 30 秒,重复 3～5 次)或手动匀浆，制备好
的匀浆液不离心直接测定。也可采用裂解液裂解(推
荐 TritonX-100,1～2%,裂解 30～40 分钟)，裂解好的
液体不离心直接测定。
[注]：建议收集的细胞密度在 100 万个/mL 以上。破碎
好的液体可显微镜观察细胞是否破碎完全。
五、性能指标：
1、试剂空白管吸光度≤0.100（光径 0.5cm）。
2、线性：0～19.39mmol/L 范围内，r 2＞0.995。
3、精密度：CV≤3%，批间相对极差≤5%。
4、稳定性：原装试剂盒在 2℃～8℃避光保存，有效期为 12
个月。开启后 2℃～8℃避光保存，可稳定 3 个月。
六、注意事项：
1、本产品仅用于科研，不得用于临床诊断，切勿服用。
2、样品含量如超出检测范围上限时，可用生理盐水稀释样本
后进行测定，测定结果乘以稀释倍数。
3、试剂防止葡萄糖、胆固醇等试剂的污染。
4、试剂与样本量可按照全自动生化分析仪的要求，按照 1：
100 的比例增减。
5、标准品为醇溶性试剂，打开后易挥发，96 管板操作时尽量
在加完样本后加标准品，且标准管优先加入工作液以降低
标准品的挥发，从而降低偏差。
七、参考文献：
1、Searay R .L.Diagonstic Biochemistry. Mc Graw-Hill . New York. NY.1969
2、Richmand W.Clin.Chem.1973;19:1350
总胆固醇(T-CHO)测试盒