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卡梅德生物科技(天津)有限公司
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大规模冻干|蛋白冻干
卡梅德生物建立了完善的抗体、蛋白平台,配备了不同规格的发酵罐、高速离心机、蛋白纯化仪、冻干机等重组蛋白生产设备。我们拥有的蛋白制备技术人员,积累了丰富的蛋白重组表达、发酵和纯化经验,可以为客户提供从蛋白表达制备到蛋白大规模发酵生产、蛋白纯化、冻干及后续鉴定等全程一站式服务。
蛋白液体状态与冻干粉状态的区别:
| 蛋白液体特点 | 蛋白冻干粉特点 |
| * 蛋白溶液多为无色,或呈淡黄色,具有一定的浓度 | * 多孔疏松结构的产品外观,具有良好的复水性 |
| * 蛋白液体中含有多种活性成分,同时也含有盐类缓冲液等非活性成分 | * 干燥去除水分,在低温下进行,能避免蛋白产生变性或丧失生物活性 |
| * 蛋白容易降解,液体状态不易长期保存 | * 冻干蛋白结构与性质较为稳定,不易被氧化,利于长途运输和长期保存 |
冻干技术原理:
冻干技术的基本原理是把重组蛋白溶液先在低温环境下冻结,再在真空条件下干燥,形成重组蛋白固体制剂。其中干燥过程又可分为去除结晶水的初步干燥和去除结合水的二次干燥。但是由于冻干过程实质上是物质和能量的转换过程,蛋白可能会出现一定程度的变性。
了解冷冻干燥技术中蛋白的变性机理,以便制定可靠的冷冻干燥程序,卡梅德生物采用自主优化的冷冻技术流程,能够生产出结构稳定的高质量蛋白。冻干蛋白中易挥发变性成分损失较少,生物活性基本不变。
| 蛋白的变性机理 | |
| 1、冷冻过程的变性机理 | * 低温变性机理:非极性基团在水中的溶解度随温度降低而增加,导致重组蛋白中的疏水作用减弱 * 冷冻变性机理:冷冻变性主要受浓缩、冰水界面、PH值变化和相分离4个方面的影响 |
| 2、干燥过程的变性机理 | * 干燥过程的变性主要是发生在去除结合水的二次干燥阶段。重组蛋白在水溶液中是水化的,水化的重组蛋白表面有一层水化层,干燥过程去除这一部分水化层的水,破坏了蛋白表面的氢键结构,可能会引起重组蛋白天然结构的变性 |
冻干保护剂:
为了保护蛋白的活性,通常添加活性物质的保护剂,冻干保护剂能够有效减少或阻止冻干对蛋白带来的变性影响。常用的保护剂类型如下:
| 类型 | 特点 |
| 糖类 | * 糖类是较为常见,使用广泛的一类冻干保护剂 * 经常用的是二糖, 蔗糖和海藻糖是二糖中有效的保护剂 * 海藻糖的玻璃态转化温度较高,吸水性小,自身分子内部不形成氢键,有利于和重组蛋白形成氢键。因此海藻糖用来保护重组蛋白的效果更好 |
| 高分子化合物 | * 经常用的是血清白蛋白,是一种优良的蛋白稳定剂 * 既可以作为冷冻保护剂也可以用作干燥保护剂,保护蛋白的效果较好 |
| 多羟基化合物 | * 是常见的蛋白保护剂之一 * 常用的有甘油,甘露醇,山梨醇,肌醇,聚乙二醇等 |
我们能提供的服务:
| 冻干过程是个复杂多变的过程,会有诸多因素影响。卡梅德生物深耕蛋白研究多年,熟悉冻干机理与操作,能够根据客户的研究需求,提供一套完整的解决方案。我们可为您选择合适的冻干条件,优化和制定冻干流程,尤其是冻干制剂的研究。基于完备的工艺生产线,我们也可以直接交付给客户最终的成品。 |
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文献和实验WHO国际生物制剂书目(由WHO国际标准生物实验室制定分类) 试剂 剂型 13059143940/13380091861 第一页 重组人Activin A冻干粉 标准品 5 units / ampoule 人甲胎蛋白冻干粉 标准品 100,000 IU / ampoule. 氨基羟丁基卡那霉素冻干粉 标准品 50,600 IU / ampoule 两性霉素B冻干粉 标准品 . 940 IU / mg(含约50mg两性霉素B) Ancrod冻干粉 标准品 55 IU
试剂 剂型 13059143940/13380091861 第一页 重组人Activin A冻干粉 标准品 5 units / ampoule 人甲胎蛋白冻干粉 标准品 100,000 IU / ampoule. 氨基羟丁基卡那霉素冻干粉 标准品 50,600 IU / ampoule 两性霉素B冻干粉 标准品 . 940 IU / mg(含约50mg两性霉素B) Ancrod冻干粉 标准品 55 IU / ampoule 炭疽芽孢疫苗,34F2菌链孢子悬液冻干粉 1 IU
我们知道,PeproTech的所有细胞因子和蛋白均为冻干粉,这使得运输非常便捷,只要常温即可。而且,细胞因子和蛋白冻干粉非常稳定,在-20℃或-80℃条件下可保存数年。冻干粉在使用前需进行溶解,然后以液体形式加到培养体系或注射入动物体内。溶解步骤非常关键,因溶解不好会导致细胞因子或蛋白的失活,这也是很多用户在实际使用中经常遇到的问题。 那么,应该如何进行正确的溶解呢? 下面我们以Recombinant Human IL-4 (重组人IL-4,产品编号:200-04)的说明书为例
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