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- 文献和实验
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- 保存条件:
-20℃保存
- 保质期:
12个月
- 英文名:
Recombinant Meteorin (METRN)
- 库存:
100
- 供应商:
科淼生物
- 规格:
50ug/50ug
| 规格: | 50ug | 产品价格: | ¥2180.0 |
|---|---|---|---|
| 规格: | 50ug | 产品价格: | ¥3980.0 |
产品英文名称:Recombinant Meteorin (METRN)
别名:C16orf23; RJD6; Glial Cell Differentiation Regulator
种属:Rattus norvegicus (Rat)
蛋白序列:Gly22~Asp291
标签:N-terminal His Tag
Uniprot:Q5Q0T9
表达系统:Prokaryotic expression
来源:E.coli
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文献和实验螯合树脂 用于分离 6XHis 标签重组蛋白,高度结合效率和低的非特异性结合。 固定的金属亲和层析树脂(IMAC)使用镍离子来纯化 6XHis 标签蛋白。树脂可以结合 6X 组氨酸残基(6XHis),一种在蛋白纯化中非常常用的标签。树脂由氨基二乙酸偶联到 6% 交联的琼脂糖上组成。氨基二乙酸可以共价结合到镍离子上,每毫升树脂可以结合 20-40μmoles 镍离子。 这种镍螯合树脂有单独的树脂也有离心柱形式供选择。 特定的结合和洗脱缓冲液液可以提供, 100 ml His 结合
6xHis 标签,也称为多组氨酸标签, His6 标签或 hexa 组氨酸标签, 是一种在转染的细胞中目标蛋白的 C 端或 N 端上由至少 6 个组氨酸残基链接上所组成的氨基酸序列。这种标签通常在重组蛋白的纯化中使用,这是因为组氨酸残基的序列可以在特定的缓冲液条件下结合到几种类型固定的离子上(比如镍,钴和铜)从而达到容易检测和纯化 His 标签蛋白的目的。 由于它的相对小的分子量,低的免疫原性,亲水性和在去污剂和其他添加剂存在的情况下的易变性, 因此在天然和变性的条件下,多组氨酸标签
【原创】真核表达His蛋白,进行天然构象蛋白纯化的心得和疑问。
由于要做酶活性实验,所以选择真核表达His标签蛋白进行非变形的纯化。(避免了原核表达可能得到没功能的蛋白。)先上图上真相:这个说明了:细胞超声裂解后,离心沉淀的碎片里含少量His标签的过表达目的蛋白(第一道),上清里含大量His蛋白(第二道)。之后用特殊的含有镍的树脂小球纯化His蛋白,由于裂解液体积太大了,就分了两次加到柱子里。第一次加进去之后4度孵育1h,然后弃流出液(第三道),第二次把剩下的裂解液加进去,同样4度孵育1h后弃流出液(第四道)然后用漂洗液洗2次柱子里的树脂,使得非特异性黏着
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