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-20℃保存
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12个月
- 英文名:
Recombinant Left/Right Determination Factor 2 (LEFTY2)
- 库存:
100
- 供应商:
科淼生物
- 规格:
50ug/50ug
| 规格: | 50ug | 产品价格: | ¥2180.0 |
|---|---|---|---|
| 规格: | 50ug | 产品价格: | ¥3980.0 |
产品英文名称:Recombinant Left/Right Determination Factor 2 (LEFTY2)
别名:TGFB4; EBAF; LEFTA; LEFTYA; Endometrial Bleeding Associated Factor; Left-right determination factor A; Transforming growth factor beta-4
种属:Mus musculus (Mouse)
蛋白序列:
标签:N-terminal His Tag
Uniprot:P57785
表达系统:Prokaryotic expression
来源:E.coli
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文献和实验素、链霉素等)是影响转染的培养基添加物。由于阳离子脂质体试剂增加了细胞的通透性,使得对真核细胞无毒的抗生素进入细胞,从而降低细胞活性,导致转染效率降低。因此,应避免在转染前细胞铺板时和在转染培养基中使用抗生素,在转染前也不必润洗细胞。 03细胞状态 众所周知,细胞的生长状态影响实验结果,原代细胞和传代次数多的细胞都不是最佳选择,处于对数生长期的细胞生长状态最好,最适合转染。有文献研究传代不要超过17代,细胞复苏后的3代左右时细胞状态最好,传代过多细胞形态都会发生变化。大多数已建立的细胞系都是
高表达常常导致包涵体的形成,虽然包涵体具有富集目标蛋白质、抗蛋白酶、对宿主毒性小等优点,但包涵体蛋白质的复性率一般都很低,而分子伴侣、低分子量添加物等在复性过程中的应用及新的复性方法的建立都大大提高了重组蛋白质复性产率。 一、包涵体: 1.1包涵体的定义、组成与特性: 包涵体是指细菌表达的蛋白在细胞内凝集,形成无活性的固体颗粒。 一般含有50%以上的重组蛋白,其余为核糖体元件、RNA聚合酶、内毒素、外膜蛋白ompC、ompF和ompA等,环状或缺口的质粒DNA,以及脂体
缺乏生物学活性,加上剧烈的处理条件,使蛋白的高级结构破坏,因此重组蛋白的复性特别必要。 通过缓慢去除变性剂使目标蛋白从变性的完全伸展状态恢复到正常的折叠结构,同时去除还原剂使二硫键正常形成。一般在尿素浓度4M左右时复性过程开始,到2M 左右时结束。对于盐酸胍而言,可以从4M开始,到1.5M 时复性过程已经结束。 2.1包涵体蛋白复性方法 2.1.1稀释复性:直接加入水或缓冲液,放置过夜,缺点是体积增加较大,变性剂稀释速度太快,不易控制。目前稀释法主要有一次稀释、分段稀释和连续
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