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-20℃保存
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12个月
- 英文名:
Recombinant Sorbitol Dehydrogenase (SDH)
- 库存:
100
- 供应商:
科淼生物
- 规格:
50ug/50ug
| 规格: | 50ug | 产品价格: | ¥2180.0 |
|---|---|---|---|
| 规格: | 50ug | 产品价格: | ¥3980.0 |
产品英文名称:Recombinant Sorbitol Dehydrogenase (SDH)
别名:SORD; L-iditol 2-dehydrogenase
种属:Bos taurus; Bovine (Cattle)
蛋白序列:Ala4~Lys344
标签:N-terminal His Tag
Uniprot:Q58D31
表达系统:Prokaryotic expression
来源:E.coli
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文献和实验1 介绍用于生产治疗性重组蛋白的哺乳动物补料批次细胞培养物的性能和产量取决于细胞对变化的培养环境的反应。广泛报道的一种提高哺乳动物细胞生产力的策略是基于在高渗条件下培养细胞的。例如,通过加入无机或有机渗透剂(如 NaCl 或山梨糖醇)来增加渗透压。但是,细胞比生产率的提高与细胞生长的降低相结合,通常不会在产品产量方面带来整体收益。双相分批培养或逐渐增加渗透压、渗透保护成分和随后的继代培养已被成功地用于克服细胞生长抑制的问题。然而,这些研究大多数是在分批条件下进行的,高渗透压对补料批次培养的影响
中,使其完全解冻; (1)将100μl菌体移出至一新的无菌Eppendorf管中,加入5-20μg线性化质粒(5~10μl),轻弹混匀,尽数吸出转移到0.2cm型的电穿孔转化杯中; (2)转化杯置于冰浴中5~10分钟,保持低温。 (3)电穿孔转化电击条件:电压:1500V;电阻:400Ω;电容:25μF;脉冲时间:10mS;一次电击。 (4)电击后,马上在电击转化杯中加入1ml 4℃预冷的1M的山梨醇溶液,用微量移液枪吹打均匀,置于冰浴中; (5)取30℃烘至表面半干的MD培养基平板
明显的细菌裂解[212,213]。同样,在山梨糖醇和甘氨酰甜菜碱存在的渗透压力下培养细菌,可以使可溶性的活性蛋白产量提高多达400倍[139]。 高细胞密度培养系统也有其自身的缺陷。这些缺陷包括在高细胞密度情况下,溶解氧的量有限;二氧化碳水平能够降低生长速度、刺激乙酸形成降低发酵罐的混合效率和产热等。有关这些问题的解决方案已经有详细的介绍[193]。利用高细胞密度培养系统生产重组蛋白质的一个主要问题是乙酸的积累,这种亲脂性成分对细胞的生长是有害的[193]。虽然有多种解决这一问题的方案,但是均
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