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- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
大量
- 英文名:
MIF
- CAS号:
00002
- 保质期:
1年
- 供应商:
上海瓦兰生物
- 保存条件:
-20°
- 规格:
50ul
| 基因调 控方式 |
基因名称 | 物种 | 基因ID | 基因大小 | 转录本 | 载体名称 | 备注1 |
| 过表达 | MIF | 人 | 4282 | 345bp | NM-002415.2 | pCDH-EF1a-CoGFP- PURO- SFFV-MIF -myc-WPRE | 1.病毒量:≥1x108TU,病毒滴度:≥1x108TU/mL,Puro抗性元件, 约8-10管; 2.含myc标签 |
| 对照 | CoGFP | pCDH-EF1a-CoGFP- PURO- SFFV-MCS WPRE | 1.病毒量:≥1x108TU,病毒滴度:≥1x108TU/mL,Puro抗性元件,约8-10管; |
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文献和实验AAV 装载容量 4.7kb 超限怎么办?元件长度和五种扩容方案一篇讲清
小? scAAV 为自互补双链,包装容量约为 ssAAV 的一半(约 2.4 kb),但起效更快。 超限后先试什么? 先换短启动子、去标签,仍超再考虑双载体拆分或改慢病毒(大基因载体)。 大基因用什么病毒? 明显超过 AAV 上限可转慢病毒,吉凯 GV747 大基因载体适合 >4 kb 基因(具体以官方为准)。 --- 主要公开来源 通用共识:AAV 包装容量 ssAAV < 4.7 kb(含 ITR 及目的序列),scAAV < 2.4 kb;ITR 为包装必需(见 AAV 载体设计文献)。 吉凯
要保护好自己,需要生物安全柜(往里吹风最好),或者超净台(把风给关了 (*^__^*))。(下图是慢病毒构建载体示意图)病毒来了,需要分装,-80 保存,反复冻融影响病毒活性,一般情况系,我是将病毒分成 10 ul 一管。其次是看清你自己的病毒情况,是荧光标记(一般 GFP),还是非荧光标记 (一般标签蛋白是过表达是 Flag,敲降是 scramble)。元元做的是肿瘤相关实验,所以咱们这里讲的是贴壁的肿瘤细胞的稳转,一定注意,元元讲的是普适的方法,一定要看厂家的说明书。一般先用带有 GFP 荧
、GFAP、CAG、CMV 发货分装 50 μL/管 200 μL/管 50 μL/管 标签/报告基因 EGFP/mCherry/Luc 等 过表达可带标签 可带标签 安全等级 BSL-2 复制缺陷型,风险低 安全性高 常见场景与边界 基因治疗、CAR-T、稳定株:慢病毒主场。 难转染细胞快速出蛋白、Cre-loxp 工具、短期验证:腺病毒更省事。 神经、肝肾、心血管等体内长期表达,尤其要穿血脑屏障:AAV 几乎主要选择之一。 细胞实验上 AAV 效果不好,建议改慢病毒或腺病
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