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90天
- 英文名:
pLV-UBC-mCherry-EGFP-CCDC50(human)
- 库存:
100
- 供应商:
科淼生物
- 规格:
0.5ug/0.5ug
| 规格: | 0.5ug | 产品价格: | ¥680.0 |
|---|---|---|---|
| 规格: | 0.5ug | 产品价格: | ¥1280.0 |
英文名称:pLV-UBC-mCherry-EGFP-CCDC50(human)
货号:KM1052126
图谱:微客服
宿主:哺乳细胞,慢病毒
用途:蛋白表达
片段类型:ORF
片段物种:人
原核抗性:Amp
真核抗性:Zeo
荧光标记:绿色,红色
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文献和实验限制性酶切位点。3. ShRNA 插入片段中的茎环应当靠近寡核苷酸的中央。4. 5~6 个 T 必须放置在 ShRNA 插入片段尾部以确保 RNA 聚合酶 III 终止转录。5. 在正义链和反义链序列上不能出现连续 3 个或以上的 T。这可能导致 ShRNA 转录的提前终止。下面以 pSUPER 质粒载体设计 ShRNA 为例:1. 选择双酶切位点分别是 BglII-HindIII site。2. pSUPER ShRNA design model:红色部分包含限制性酶切位点,绿色部分为茎环序列。3. shRNA 的引物
。 用这个技术,我们已经在几个细胞系中测试了许多目标基因的RNAI效应。图三表现的时 egfp 被敲除 图四时为Dsred 被敲除。 Control Sense Antisense Both cassettes (a/s) siRNAs LineSilence LineSilence LineSilence Figure 3: LineSilence reagents reduce GFP expression. Human 293 cells
expression,SAGE) SAGE其原理是以mRNA为模板,用生物素标记的Oligo(dT)为引物合成双链cDNA,以限制酶进行酶切,捕获cDNA 3′端;产物被分为两部分,分别与包含有标签内切酶位点的A、B连接子相接。经过酶切,就有可能得到只有9~10bp的标签序列。每两个标签的钝端结合后成为PCR的模板,以基于A、B连接子的引物进行PCR反应的结果是得到了大量每条包含两个不同来源标签的序列,接下来再用限制酶酶切、连接,就能将多个不同的标签链接在一起,克隆至质粒载体中后集中测序。SAGE可以检测不同
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