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-80℃
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90天
- 英文名:
pMLAAV-EnCMV-ASMT(mouse)-2-HA-IRES-ZsGreen1(优化密码子)
- 库存:
100
- 供应商:
科淼生物
- 规格:
0.5ug/0.5ug
| 规格: | 0.5ug | 产品价格: | ¥680.0 |
|---|---|---|---|
| 规格: | 0.5ug | 产品价格: | ¥1280.0 |
英文名称:pMLAAV-EnCMV-ASMT(mouse)-2-HA-IRES-ZsGreen1(优化密码子)
货号:KM1045190
图谱:微客服
宿主:哺乳细胞,腺相关病毒
用途:蛋白表达
片段类型:ORF
片段物种:小鼠
原核抗性:Amp
真核抗性:
荧光标记:绿色
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文献和实验Western Blot 现在仍然是检测和分离蛋白最常用的一种实验方法,但是要想得到较好的结果并不容易,只有找到合适的实验条件并进行优化,才能以更少的时间得到更多的结果,达到事半功倍的效果!下面是 R&D Systems 品牌为您推荐的免疫印迹优化步骤和实验涉及参考数据:一抗浓度对实验结果的影响抗体:Human/Mouse/Rat RSK1 Antibody (Catalog # AF992)样本:人 HeLa 细胞 (Fig.1)A:5% 脱脂奶粉封闭,一抗浓度:1.0 mg/mL,溶于
成分。5.优化表达条件(1)重组蛋白不表达或者表达量低。如果重组蛋白不表达(包含体和可溶蛋白都没有)通过改变诱导剂浓度,诱导温度,时间等都不表达的时候,然后尝试更换菌株、质粒载体。降低诱导后培养温度。重组蛋白表达得越慢,其折叠效果就越好,大肠杆菌在4℃时依然可以表达重组蛋白,而将培养温度降低至25-30℃就能显著改善蛋白折叠。此方法不适用于温度诱导的重组蛋白表达;减少诱导剂。诱导剂浓度可以降低至1/10;选用Lac渗透酶缺陷型菌株,如Tuner、Rosetta等,也有很好的效果。这类菌株能够使进入每个细胞
、遗传操作相对困难、外源蛋白有时得不到有效的表达等等。但AtaGenix却能成功避免以上问题使外源目标蛋白在枯草芽孢杆菌表达系统中有效表达,这主要得益于以下三个方面的优势: 1 丰富的表达宿主 由于枯草芽孢杆菌没有明显的密码子偏爱性,表达外源蛋白时无需对DNA序列进行优化。在不同宿主中表达时,蛋白表达情况可能有差异。在AtaGenix拥有的多种枯草芽孢杆菌表达宿主中,1012 wild type宿主菌是最常用到的,可作为胞内和胞外表达的通用菌;168
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