- ￥680 - 1280
- KEMOBio
- 进口/国产
- KM1035528
- 2025年07月06日
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- 详细信息
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-80℃
- 保质期：
90天
- 英文名：
pCMV-SPORT6-DCAF15(cattle)
- 库存：
100
- 供应商：
科淼生物
- 规格：
0.5ug/0.5ug
| 规格： | 0.5ug | 产品价格： | ￥680.0 |
|---|---|---|---|
| 规格： | 0.5ug | 产品价格： | ￥1280.0 |
英文名称：pCMV-SPORT6-DCAF15(cattle)
货号：KM1035528
图谱：微客服
宿主：大肠杆菌
用途：基因模板
片段类型：cDNA
片段物种：牛
原核抗性：Amp
真核抗性：
荧光标记：
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文献和实验1. 质粒载体构建不成功（目的片段和载体不能成功连接）的常见原因分析 ①DNA 片段纯度差：体系中的杂质会降低连接效率，如果使用不纯化直接连接的方法一直无法成功构建载体，可以考虑进行纯化后再进行连接； ②目的片段和载体片段使用比例悬殊，或者用量过多或过少：目的片段和载体的摩尔比需要控制在一定范围之内，否则会影响连接效率，具体比例可以草靠连接酶说明书； ③连接条件不当：比如连接时间不足、温度不合适、酶失活等，可以通过设置对照组来排查原因； ④引物设计问题：比如通过无缝克隆的方式进行连接，同源
外源蛋白的表达水平及产量。此外甲醇酵母的表达载体都为E.coli/Pichia Pastoris的穿梭载体，其中含有E.coli复制起点和筛选标志，可在获得克隆后采用E.coli细胞大量扩增.目前，将质粒载体转入酵母菌的方法主要有原生质体转化法、电击法及氯化锂法等。甲醇酵母一般先在含甘油的培养基中生长。培养至高浓度。再以甲醇为碳源。诱导表达外源蛋白。这样可以大大提高表达产量。利用甲醇酵母表达外源性蛋白质其产量往往可达克级。与酿酒酵母相比其翻译后的加工更接近哺乳动物细胞，不会发生超糖
死亡丢失一些细胞，这会影响结果。 15、问：RNA干扰如果用慢病毒做稳转的细胞株，什么样的目的RNA都可以用来干扰来做稳转的细胞株吗，目的RNA所编码蛋白的作用跟能不能稳转有关系吗，若能稳转，这个筛选的过程大概是多长时间呢？ 答：当然不是任何mRNA都适合建立稳转的细胞株，这里面有两个前提，一是细胞能稳定存活传代，二是某mRNA被稳定的干扰掉。这两个前提必须同时存在才算成功。换句话说，如果某mRNA被干扰会导致细胞不能存活或无法稳定传代，自然无法建立这样的带RNAi
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