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-80℃
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90天
- 英文名:
pQE30-Sirt4(25-314)
- 库存:
100
- 供应商:
科淼生物
- 规格:
0.5ug/0.5ug
| 规格: | 0.5ug | 产品价格: | ¥680.0 |
|---|---|---|---|
| 规格: | 0.5ug | 产品价格: | ¥1280.0 |
英文名称:pQE30-Sirt4(25-314)
货号:KM103440
图谱:微客服
宿主:大肠杆菌
用途:蛋白表达
片段类型:ORF
片段物种:人
原核抗性:Amp
真核抗性:
荧光标记:
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文献和实验偶然发现的一个pQE30系统表达蛋白纯化案例,帖出来和大家分享。 Purification of LF. 诱导与表达 E. coli SG13009(pREP4) carrying the recombinant plasmid pPG-LF1 was grown at 37°C in Luria broth with 100 μg of ampicillin and 25 μg of kanamycin per ml at 250 rpm. When the A600
/pmolDNA末端。 2。连接质粒载体和DNA插入片断时: (1)初次实验的可以建立几种不同的连接体系,比如插入片段与载体分子数比率可以为3:1,1:1,或1:3。 (2)可以尝试三种温度和时间的连接如4度,过夜;15度,4-6小时;25度,1小时。 3。细菌转化和筛选时: (1)如果是感受态细胞,-80度储存的在5-6周后,转化率低。可用一已知标准闭环质粒鉴定感受态细胞的转化能力。 (2)用无DNA转化物的感受态细菌铺板,如果有菌落生长,说明其中抗生素浓度不够。
霉素乙酰化转移酶基因(chloramphenicol acetyl transferase gene,CAT),这个基因不带有启动子,通常不会被表达。根据菌株和载体的不同,会有少量的CAT活性被检测到。ColE1复制起点pQE-TriSytem不含有CAT盒(cassette)并利用pUC的复制起点,此载体含有三个启动子,可以分别在大肠杆菌、杆状病毒和哺乳动物中进行表达Qiagen表达载体的分类可以根据加入的标签的种类、位置以及利用何种蛋白酶进行标签切割来分类。在N末端加入标签这一系列载体的N末端加有标签,其中pQE-30、pQE-9带有6×
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